一、镉对机体毒性作用机制国内研究进展（论文文献综述）
褚梦颖[1]（2021）在《蛆症异蚤蝇Megaselia scalaris对重金属镉的毒性反应和解毒机制研究》文中研究说明镉（cadmiun,Cd）是重要的重金属污染物,不仅对人类和生物产生直接的毒害作用,还可以在生物体内富集,并通过食物链在生物体间迁移,影响生态系统。昆虫种类多,分布广,在食物链中承担重要角色,既是重金属的消耗者和富集者,也是重金属的传递者,研究生物在镉胁迫下的毒理反应,对重金属的生物修复和生物监测有重要作用。本研究以蛆症异蚤蝇M.scalaris为试验材料,首次从个体发育、内部解剖、酶学和分子层面较为全面且详细的研究了Cd2+对蛆症异蚤蝇产生的毒性效应以及蛆症异蚤蝇对Cd2+的生理响应机制。主要结论如下:（1）不同浓度Cd2+胁迫条件下,亲代蛆症异蚤蝇M.scalaris幼虫的体长、体重、化蛹率以及成虫的羽化率和寿命均随着胁迫浓度的升高而显着降低（P<0.05）。Cd2+胁迫显着延长了蛆症异蚤蝇M.scalaris亲代的发育历期和蛹期（P<0.05）且具有浓度依赖性。Cd2+胁迫对蛆症异蚤蝇M.scalaris亲代成虫的雌雄比产生了显着影响（P<0.05）。结果表明,Cd2+胁迫可以抑制蛆症异蚤蝇M.scalaris个体生长发育,同时,由于个体生物学指标的变化,也可能改变蛆症异蚤蝇M.scalaris种群数量和结构。与对照组相比,不再受到Cd2+胁迫的子代（F1）蛆症异蚤蝇M.scalaris幼虫的体长、体重、化蛹率、蛹期以及成虫的羽化率、寿命、发育历期和雌雄比均不具有显着差异性（P>0.05）。表明Cd2+胁迫对蛆症异蚤蝇M.scalaris生理水平上生长发育的影响在子代得到消除。（2）Cd2+胁迫能够使蛆症异蚤蝇M.scalaris幼虫消化道受损。取食Cd2+浓度为60μg/g人工饲料5d后蚤蝇幼虫体内消化道明显黄化,尤其是中肠部分,并可清楚观察到有许多颗粒状结构密集分布在肠壁内侧。Cd2+可以改变蚤蝇幼虫中肠长度与直径大小,损伤消化道结构,推测Cd2+能够使蚤蝇幼虫消化功能受损。（3）抗氧化酶是蛆症异蚤蝇M.scalaris机体抵御Cd2+诱发的氧化应激相关毒性效应的早期响应。与对照组相比,随着处理时间的增加,蛆症异蚤蝇M.scalaris的抗氧化酶CAT的酶活力变化呈促进-抑制趋势,抗氧化酶SOD的酶活力变化中低浓度（7.5,15,30μg/g）组呈促进-抑制趋势,高浓度（60μg/g）组呈抑制趋势,抗氧化酶GSH-PX的酶活力变化呈低浓度（7.5μg/g）组呈促进-抑制,中高浓度组（15,30,60μg/g）呈抑制趋势;其中GSH-PX酶反应较SOD与CAT更为快速灵敏;蛆症异蚤蝇M.scalaris体内MDA含量持续升高,呈现出一定的浓剂量效应和时间效应关系。这些结果表明,Cd2+胁迫幼虫体内产生并积累了大量的ROS,影响了抗氧化酶活性,打破了虫体内氧化还原的平衡稳态,诱发了氧化应激,发生了脂质过氧化,进而会对蛆症异蚤蝇M.scalaris机体造成氧化损伤。（4）经过不同浓度Cd2+处理后,蛆症异蚤蝇M.scalaris体细胞DNA的TL值、DNAT%值、TM值和OTM值随着Cd2+处理浓度和时间的增加而增大,表明蛆症异蚤蝇DNA损伤程度随Cd2+处理浓度和时间的增加而加重,且具有显着的浓度-效应和时间-效应关系。上述结果表明Cd2+能够引发蛆症异蚤蝇DNA损伤,造成DNA链断裂,具有遗传毒性,DNA损伤程度与Cd2+处理浓度和时间具有效应关系。（5）结合对各检测指标的相关性分析,蛆症异蚤蝇对重金属Cd2+毒性效应的生理响应顺序应该为:抗氧化酶活力与氧化应激程度,DNA损伤,组织器官,个体指标,种群指标,最后结合实际操作难易程度在各个层次上推荐蛆症异蚤蝇对重金属Cd2+毒性效应灵敏的生理生化指标为GSH-PX酶活力与MDA含量,TM值,化蛹率、羽化率。本文以蛆症异蚤蝇M.scalaris为研究对象,首次从个体发育、内部解剖、酶学和分子层面探讨其在重金属镉胁迫下的累积代谢规律和解毒代谢机制,为更好地理解重金属镉的生物毒理过程及其在城市生态系统的传递过程提供理论支持与数据参考。
刘亚红[2]（2020）在《环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨》文中进行了进一步梳理背景镍（Nickel,Ni）暴露通过对水、空气、土壤的污染日渐成为威胁生态环境和人类健康的研究热点,由于其对机体内分泌代谢状态的干扰效应,已被列入环境内分泌干扰物（Environmental endocrine disrupting chemicals,EEDs）之一。内分泌腺体特别是甲状腺和胰腺通过严密反馈机制调控着机体三大物质的代谢平衡,是能量代谢的核心调控器官。Ni对机体代谢调控的干扰往往与胰腺、甲状腺组织的细胞凋亡和增殖紧密相关。目的本研究通过设计一系列不同剂量硫酸镍（Nickel sulfate,NiSO4）处理的细胞模型,探讨Ni致人甲状腺滤泡上皮细胞（Nthy-ori 3-1,Nthy）及胰腺导管上皮细胞（h TERT-HPNE,HPNE）损伤的剂量及时间效应关系,利用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,并通过检测线粒体膜电位,探讨Ni所致人Nthy细胞及人HPNE细胞凋亡与线粒体凋亡通路之间的相关性。然后构建不同剂量NiSO4染毒的大鼠动物模型,通过检测Ni染毒后大鼠甲状腺和胰腺的功能及组织形态学的变化,评估Ni对大鼠代谢损伤的毒性效应;并同步检测Ni暴露环境下大鼠甲状腺及胰腺组织细胞凋亡相关指标在mRNA及蛋白质水平的表达,以期阐明Ni暴露代谢损伤发生发展的可能机制,为寻找有效的预防和干预Ni代谢损伤提供科学依据。方法本研究采用人Nthy细胞及HPNE细胞系,通过CCK-8法检测不同剂量NiSO4对人Nthy及HPNE细胞活力的影响,筛选NiSO4的适宜损伤浓度及损伤时间,构建Ni损伤细胞模型。Hoechst 33258荧光染色法、Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术观察Ni对人Nthy细胞和HPNE细胞凋亡的影响。利用流式细胞术及激光共聚焦显微镜测定干预前后细胞线粒体膜电位变化,探讨Ni损伤人Nthy及HPNE细胞与线粒体凋亡的关系。将32只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为四组:对照组（N）、低剂量组（L）、中剂量组（M）、高剂量组（H）,每组8只,对照组腹腔注射5 ml/kg生理盐水,染毒组分别等体积（5 ml/kg）腹腔注射2.5、5.0、10.0 mg/kg NiSO4,1次/日,连续40日。观察亚慢性NiSO4染毒后大鼠一般情况、体重变化、甲状腺功能、胰岛功能、甲状腺及胰腺组织形态学变化,并采用实时荧光定量PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）及免疫组化法检测甲状腺及胰腺组织凋亡相关因子（Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas）mRNA和蛋白水平的表达。结果1.NiSO4对人Nthy细胞及HPNE细胞的活力有较为明显的时间依赖效应和剂量反应关系。随着NiSO4的暴露剂量升高或者暴露时间延长,细胞活力明显降低,细胞形态变圆,贴壁细胞数目减少,出现细胞凋亡,甚至死亡。2.用不同浓度的NiSO4处理人Nthy细胞和HPNE细胞24h及48h,24h-640μM、48h-480μM及48h-640μM浓度可引起人Nthy细胞细胞凋亡增加,48h-640μM浓度可引起HPNE细胞凋亡增加,而各浓度组均能降低其线粒体膜电位水平,影响人Nthy细胞及HPNE细胞能量代谢。3.连续腹腔注射NiSO4 40天后,高剂量组大鼠甲状腺组织及胰腺组织病理均出现明显改变,且NiSO4导致大鼠的甲状腺功能及胰腺功能异常。与对照组相比,各染毒组大鼠的游离T4（Free thyroxine,FT4）和促甲状腺激素（Thyroid Stimulating Hormone,TSH）均降低,差异有统计学意义（P<0.05）,但各组间游离T3（Free triiodothyronine,FT3）差异无统计学意义（P>0.05）。对胰岛功能的影响,与对照组比较,中、高剂量NiSO4染毒后,大鼠随机血糖随NiSO4剂量增高而增高,差异有统计学意义（P<0.05）,而血清胰岛素及C肽水平均下降（P<0.05）。4.NiSO4染毒后,大鼠甲状腺组织Caspase-3的mRNA表达水平较对照组升高,差异有统计学意义（P<0.05）,高剂量NiSO4染毒组Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平均高于其它各组,差异有统计学意义（P<0.01）。与对照组相比,高剂量NiSO4染毒组Bcl-2的mRNA表达水平降低,差异有统计学意义（P<0.05）。对照组和各NiSO4染毒组Bax基因的表达水平无统计学差异（P>0.05）。Bcl-2/Bax mRNA比值随着NiSO4染毒剂量的增加而下降,差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,高剂量NiSO4组Fas的mRNA表达水平明显升高（P<0.01）,并显着高于其他剂量组（P<0.01）。大鼠甲状腺Caspase-3、Fas和Bax蛋白表达水平与mRNA表达一致。低、中、高剂量NiSO4组的Bcl-2蛋白表达均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）,但各剂量NiSO4染毒组之间差异无统计学意义（P>0.05）。5.中、高剂量NiSO4染毒组大鼠胰腺组织Caspase-3 mRNA及蛋白表达水平均显着高于对照组,差异有统计学意义（P<0.01）。Caspase-8、Caspase-9的mRNA表达水平仅在高剂量NiSO4染毒组显着高于其它各组（P<0.01）。与对照组相比,各剂量NiSO4染毒组Fas的mRNA表达水平显着增加（P<0.01）,中、高剂量NiSO4染毒组Bcl-2的mRNA表达显着降低（P<0.01）。中、高剂量NiSO4染毒组Fas蛋白表达水平均显着高于对照组（P<0.01）,各组间Bcl-2的蛋白表达水平无统计学差异（P>0.05）。Bax mRNA及蛋白表达水平与对照组相比均无统计学差异（P>0.05）。Bcl-2/Bax的mRNA比值随着暴露剂量的增加而显着降低,差异有统计学意义（P<0.01）,而仅高剂量NiSO4染毒组Bcl-2/Bax蛋白比值低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论1.NiSO4通过降低人Nthy细胞及HPNE细胞的线粒体膜电位水平致使细胞发生凋亡,且凋亡作用的产生呈现剂量依赖性,从而影响人Nthy细胞及HPNE细胞能量代谢。2.NiSO4作为内分泌干扰物可通过细胞凋亡诱导大鼠甲状腺及胰腺损伤,导致大鼠甲状腺功能和胰岛功能异常。3.NiSO4可能通过介导Caspase依赖线粒体凋亡途径和Fas信号通路诱导大鼠甲状腺组织及胰腺组织发生细胞凋亡。
水雅慧[3]（2020）在《镉在克氏原鳌虾中的蓄积及对其p38 MAPK基因表达的影响研究》文中研究表明镉（Cadmium,Cd）是常见的重金属污染物,其在环境中不能被生物降解,当环境受到镉污染,镉会在生物体内富集,通过食物链进入人体,产生潜在危害,影响人类健康。克氏原螯虾俗称小龙虾,其对镉等重金属有较强的富集能力,能够在重金属污染的环境下生存和繁衍,而有机体能在不利条件下生存的关键就是尽可能将有害污染物排除在某些关键组织之外,由先前文献可知p38 MAPK基因可能在生物应对环境胁迫过程中起重要作用,那么可推断克氏原螯虾面对镉胁迫,其p38 MAPK基因很可能参与调节了镉在其体内不同组织中的积累分布,以此维持虾的正常生命活动。因此对克氏原螯虾镉蓄积及p38基因表达进行研究,有一定的价值和意义。在本文中,先研究了克氏原螯虾三个重要组织鳃,肝胰腺,肌肉在不同浓度镉环境下对镉的蓄积量,结果发现鳃和肝胰腺组织对镉的蓄积量远大于肌肉组织。而为了验证克氏原螯虾p38 MAPK基因能调节镉在其不同组织中的积累分布这一假设,本文进行了克氏原鳌虾p38 MAPK基因克隆及序列分析,检测了克氏原螯虾p38基因和镉含量在组织中的分布情况,分析比较了镉暴露下各组织在不同时间的p38基因表达量和镉含量。结果表明:克氏原螯虾p38 MAPK基因的开放阅读框长为1098bp,可编码365个氨基酸,与日本沼虾和脊尾白虾的同源性最高,相似度为95%。p38基因在检测的各组织中均有表达,表达水平有所差异,其在肝胰腺组织中的表达量最低。镉胁迫下克氏原螯虾不同组织中p38基因的表达水平随时间的变化有所差异,其中心脏,触角腺,鳃和肌肉中p38基因表达量在整体上表现出前期上升,后期下降的趋势,有一定的波动性和往复性,与各自的对照组相比,p38基因表达量存在上调和下调。而对于肝胰腺组织,在镉暴露下随着时间变化其p38基因表达量有所波动,但表达水平始终低于对照组。不同组织中的镉蓄积量随着暴露时间增加而上升,其中肝胰腺的镉含量远高于心脏,触角腺和肌肉组织,而其p38表达量始终低于其他组织。这些结果表明,克氏原螯虾p38 MAPK基因在调控镉在不同组织中的积累分布方面起着重要作用,该基因在肝胰腺中的低表达使得该组织成为镉蓄积的主要组织,使得镉尽可能少的在其他关键组织里蓄积,减小了对克氏原螯虾整体的危害,以此维持其在镉污染环境下的生存及生命活动。
黄晓[4]（2019）在《钙补充拮抗膳食镉暴露致骨毒作用的研究》文中进行了进一步梳理镉（cadmium,Cd）污染涉及全人群,对肾脏、骨骼、肺、生殖系统等均有损害作用。膳食是一般人群（非污染区、非职业、非吸烟人群）镉暴露的主要途径。有研究预测,一般人群镉暴露量在未来几十年呈增加趋势。相关领域专家指出,中国重金属污染健康危害防控与风险评估的研究重点,应该集中于镉的健康风险。镉接触最关键有害效应的认定,是风险评估的首要关键步骤。目前食品中镉限量标准,是以肾损伤作为镉接触最关键有害效应制定的。最近越来越多的流行病学研究和动物研究表明,在引起肾损伤水平以下的低剂量镉暴露,能增加骨质疏松症和骨折的风险。有学者认为应以骨损伤,作为镉接触的最关键有害效应,修改并降低食品中镉限量标准。钙（calcium,Ca）摄入不足也是骨质疏松症的危险因素,一般人群中膳食镉暴露和低钙摄入往往同时存在,人群研究中可能因钙摄入不足,造成对镉致骨毒作用高估。在现有关于肾损伤水平以下的低镉暴露增加低骨密度、骨质疏松症和骨折风险的人群研究中,仅2篇报告了钙的摄入量,且钙的摄入量在902-1081mg间,低于美国医学科学院对50岁以上女性人群钙摄入量的建议值（1000-1200mg）。因此,由于膳食钙摄入不足的混杂,人群研究中肾损伤水平以下低镉暴露与骨骼损伤的关系仍不确定。高钙摄入是人体骨密度的保护因素,生命早期足够钙摄入能获得最佳骨峰值,并降低生命后期骨折的风险。但过量摄入钙也可能产生不良作用,如增加肾结石的相对危险性,影响钙及其它金属元素吸收。因此,在增加钙摄入拮抗镉毒作用时,需注意钙摄入过高可能的健康风险。此外,一般人群中存在少部分个体钙摄入量,接近或超过钙的可耐受最高摄入量（tolerable upper intake level,UL）。而膳食是镉暴露和钙摄入的主要途径,且肾也是镉、钙毒作用的主要靶器官,两者进入机体后可能毒作用相加,但目前尚无整体动物水平相关毒理学资料。一般人群因饮食习惯、膳食结构等原因,膳食镉暴露水平不一。目前在一般人群膳食镉暴露剂量下,钙补充是否对镉致骨损伤有保护效应,以及对哪个水平镉暴露人群有保护效应和效应大小尚无研究报道。此外,以往大多数研究表明钙补充能拮抗镉吸收,但膳食钙摄入与镉吸收之间存在复杂的交互作用,在不同镉暴露剂量下,随钙摄入量的不同可能减少、不影响甚至增加镉吸收。目前在一般人群膳食镉暴露剂量下,能否在安全的钙补充范围内通过增加钙摄入减少镉吸收也不明确。鉴于以上研究的不足、人群研究中技术及伦理学等方面的限制,和上述问题亟待研究的现实意义,本论文通过动物模型,模拟一般人群膳食镉暴露和钙摄入水平,以明确钙补充是否对一般人群膳食镉致骨损伤有保护效应,更准确地估计肾损伤水平以下膳食低镉暴露与骨骼损伤的关系,及了解钙补充对镉骨毒作用的保护效应。主要研究内容如下:参考《食品安全性毒理学评价程序和方法》,采用大鼠饲料添加镉建立动物模型,模拟一般人群膳食镉暴露,进行90天经口毒性试验,除观察一般毒理学指标外,还观察了不同剂量钙补充对钙、铁、锌、铜吸收的影响,获得大鼠一般人群膳食镉暴露剂量下钙补充的最小观察到有害作用剂量（the lowest observed adverse effect level,LOAEL）。然后通过检测大鼠镉吸收相关指标（镉表观吸收率,肝肾镉浓度）,探讨在一般人群膳食镉暴露剂量下,能否通过钙补充减少镉吸收;并对小肠和肾脏钙转运关键蛋白基因表达进行检测,以解释钙补充对镉吸收影响的可能机制。研究结果将为人群钙补充的风险-收益评估提供相关资料。随后进一步通过建立一般人群和污染区人群不同水平膳食镉暴露动物模型,观察钙补充后不同水平膳食镉暴露的骨效应指标变化,以了解钙补充对哪个水平镉暴露人群有保护效应及效应大小。镉暴露动物模型大鼠钙摄入量正常,可以排除因钙摄入不足而高估镉暴露致骨损伤的可能性,再给予钙补充干预,可以排除高钙摄入可能的保护作用,更准确地估计低镉暴露与镉致骨骼损伤的定量关系。随后进一步从FGF23/Klotho轴出发,探讨钙补充对镉致骨毒作用的潜在保护机制。研究结果不仅为镉的风险评估提供相关毒理学资料,也为理解钙对镉骨毒作用的保护效应及机制提供重要的理论依据。第一章一般人群膳食镉剂量下不同剂量钙补充的大鼠亚慢性毒性研究本研究参考《食品安全性毒理学评价程序和方法》,选用清洁级健康断乳雌性Sprague–Dawley大鼠50只,按体重随机分为5组,分别将氯化镉和碳酸钙掺入钙含量适宜饲料（AIN-93G,含0.5%Ca,为大鼠钙适宜摄入量）,连续喂饲90天。既往研究已经证实,以饲料添加1mg/kg镉的方式,给大鼠染毒可以模拟一般人群膳食镉暴露。各组每公斤饲料中加入量（以镉钙计）分别为:0+0（对照组）;1mg Cd/kg+0（镉暴露组）;1mg Cd/kg+0.15%Ca（低钙补充组）;1mg Cd/kg+0.4%Ca（中钙补充组）;1mg Cd/kg+0.6%Ca（高钙补充组）。通过对钙毒作用的靶器官肾进行病理学检查,和氮素氮等生化、血液指标检查,以了解不同水平钙补充的钙毒作用;通过对血清钙、铁、锌、铜,钙、铁、锌、铜表观吸收率,肝肾铁、锌、铜浓度和骨钙含量的检测,以观察不同剂量钙补充对钙、铁、锌、铜吸收的影响,从而确定一般人群膳食镉暴露剂量下,大鼠钙补充的LOAEL。与对照组比较,（1）钙补充各组动物活动、生长正常,实验末体重、总进食量、总食物利用率,以及脏器绝对重量、脏体比差异均无统计学意义（p>0.05）。（2）中、高剂量钙补充组尿素氮升高,差异有统计学意义（p<0.05）,低剂量钙补充组尿素氮差异无统计学意义（p>0.05）,且低、中、高剂量钙补充组间呈剂量-效应关系;（3）低剂量钙补充组病理结果未见明显异常,但在中、高剂量钙补充组肾小管上皮细胞钙化等级和发生率升高,钙补充各组间呈剂量-效应关系,结果与血尿素氮结果一致。（4）低、中剂量钙补充组血常规各指标差异无统计学意义（p>0.05）,高剂量钙补充组白细胞计数,单核细胞计数和淋巴细胞计数的增加,且差异有统计学意义（p<0.05）。（5）低、中剂量钙补充组肝、肾组织铁浓度差异无统计学意义（p>0.05）,高剂量钙补充组肝、肾铁浓度降低,差异有统计学意义（p<0.05）。（6）镉暴露组与对照组比较各项指标均无统计学意义（p>0.05）。根据中钙补充组的肾病理改变和血清尿素氮高于正常组,且各钙补充剂量组之间呈剂量-效应关系,本研究确定对暴露于1mg Cd/kg饲料,雌性大鼠钙补充的LOAEL,低于中钙补充组钙含量（即每公斤饲料+0.4%Ca）,低于文献报道钙单独摄入时的LOAEL值（即每公斤饲料+0.6%Ca）。第二章一般人群膳食镉暴露剂量下不同剂量钙补充对大鼠镉吸收的影响通过对上述动物模型镉吸收相关指标（镉表观吸收率,肝肾组织镉浓度）的检测,及对小肠和肾脏钙结合蛋白基因表达量检测,以明确在一般人群膳食镉暴露剂量下,能否在安全的钙补充范围内,通过钙补充减少镉吸收及可能机制。各钙补充组与镉暴露组比较,低剂量钙补充组肾镉浓度升高,且差异有统计学意义（p<0.05）;但中、高剂量钙补充组肾镉浓度与镉暴露组相比较,差异无统计学意义（p>0.05）。大鼠小肠钙结合蛋白基因表达量与肾镉浓度的变化趋势一致。低钙补充组钙结合蛋白基因表达高于镉暴露组（p<0.05）,中、高钙补充组小肠钙结合蛋白基因表达与镉暴露组相比差异无统计学意义（p>0.05）。一般人群膳食镉暴露剂量下,中、高剂量钙补充并不减少大鼠的镉吸收;且低剂量钙补充能增加镉吸收,小肠钙结合蛋白可能参与了其过程。第三章钙补充对大鼠镉致骨毒作用的干预效应研究建立一般人群和污染区人群膳食镉暴露动物模型,以第一部分实验获得的大鼠钙补充LOAEL（+0.4%Ca含量）为钙干预剂量,进行干预实验,以了解钙补充对哪个水平镉暴露人群骨损伤有保护作用及效应大小。选用雌性断乳后SD大鼠70只,按体重随机分为7组,分别将氯化镉和碳酸钙掺入AIN-93G饲料连续喂饲90天。各组每公斤饲料中加入量（以镉钙计）分别为:0+0（对照组）;1mg Cd/kg+0（低镉暴露组）;1mg Cd/kg+0.4%Ca（低镉暴露钙干预组）;5mg Cd/kg+0（中镉暴露组）;5mg Cd/kg+0.4%Ca（中镉暴露钙干预组）;50mg Cd/kg+0（高镉暴露组）;50mg Cd/kg+0.4%Ca（高镉暴露钙干预组）。在镉暴露指标上,除大鼠平均每日膳食镉摄入量外,还通过原子吸收法检测肾脏,肝脏和股骨中镉含量,以准确估计大鼠镉体内暴露量。在骨效应指标上,除骨量指标外,还从宏观敏感指标骨生物力学,病理学骨微结构、血清骨代谢生物标志物及骨代谢OPG/RANKL通路进行观察,以评估钙补充干预的保护效应。对中、高镉暴露组大鼠,钙补充干预后,股骨弹性模量和抗弯最大应力分别增加25.32%32.8%,9.9%11.2%,血清PINP（骨形成标志物）增加、骨微结构（骨小梁数量和皮质厚度）增加,骨代谢OPG/RANKL通路中OPG基因（成骨相关）和蛋白表达增加（p<0.05）。但对低镉暴露组大鼠,钙补充除增加骨代谢OPG/RANKL通路中成骨相关基因和蛋白表达外,对上述指标没有影响。钙补充对大鼠镉致骨骼损伤有保护效应,特别是对中、高剂量膳食镉暴露大鼠效应显着。但对低剂量镉暴露组大鼠,钙补充除增加骨代谢OPG/RANKL通路中OPG基因和蛋白表达外,对宏观敏感指标骨生物力学没有影响。第四章钙补充对镉致骨毒作用的干预机制研究通过酶联免疫吸附试验,检测上述动物模型血清1,25-二羟基维生素D3,血清Klotho蛋白和FGF23蛋白,实时定量PCR、免疫组织化学染色检测肾组织Klotho基因和蛋白表达;实时定量PCR,免疫组织化学染色和检测Western blot法检测股骨FGF23基因和蛋白表达,及Wnt/β-catenin通路,成骨细胞的增殖分化相关基因和蛋白,从FGF23/Klotho轴,探讨钙补充对镉致骨毒作用的潜在保护机制。钙补充干预后血清Klotho蛋白、肾Klotho基因和蛋白表达降低（p<0.05）;肾钠依赖性磷酸盐协同转运蛋白（Napi2a）基因表达低于干预前（p<0.05）;肾1,25-（OH）2D3合成的线粒体Cyp27b1酶基因表达干预后高于干预前（p<0.05）。钙补充干预后,大鼠股骨FGF23基因和蛋白表达升高（p<0.05）。干预后高镉暴露组骨Wnt/β-catenin通路Wnt靶基因Tcf1和Axin2基因表达增加（p<0.05）;Wnt通路下游与增殖相关的C-myc蛋白表达增加（p<0.05）。干预后骨促进成骨细胞分化的Runx2蛋白上调,反映成骨细胞终末分化水平的Ⅰ型胶原（Col1a1）基因和蛋白表达上调。在血清蛋白、肾基因和蛋白表达层面,钙补充干预后Klotho表达均下调,骨FGF23基因和蛋白上调,推测钙补充可能通过FGF23/Klotho轴发挥其对镉骨毒作用的保护效应。基于肾组织基因和蛋白表达结果,推测这一生物学效应可能与Klotho和FGF23形成特异性受体复合物,间接影响肾脏中的影响维生素D合成、钙的重吸收和肾磷酸盐转运有关;基于骨组织基因和蛋白表达结果,推测其与FGF23/Klotho轴调控成骨细胞中Wnt/β-catenin通路影响成骨细胞的增殖分化有关。综上所述,对暴露于1mg Cd/kg饲料雌性大鼠,钙补充的LOAEL值低于文献报道钙单独摄入时的LOAEL值,结果提示人群中少部分钙摄入量接近或超过UL者,不能忽视膳食镉暴露的毒作用。一般人群膳食镉暴露剂量下,中剂量钙补充,并不减少低镉暴露大鼠的镉吸收,提示减少镉吸收可能不是钙拮抗镉骨毒作用的机制;且低剂量钙补充能增加镉吸收,提示在人群钙补充的风险-收益评估时,需关注钙补充增加镉吸收的潜在不良作用。钙补充对大鼠镉致骨骼损伤有保护效应,提示在镉的风险评估中,需考虑高钙摄入对镉致骨毒作用的保护效应;而对低剂量组大鼠,钙补充除增加骨代谢OPG/RANKL通路中OPG基因和蛋白表达外,对宏观敏感指标骨生物力学没有影响,提示钙补充对镉骨毒作用的保护效应具有一定的范围和剂量选择性。钙补充对镉致骨毒作用的保护机制涉及FGF23/Klotho轴,还直接影响骨代谢OPG/RANKL信号通路。
卓俊哲[5]（2019）在《镉胁迫对拟水狼蛛生长发育及抗寒性的影响研究》文中研究表明本文探究重金属镉对稻田蜘蛛拟水狼蛛（Pirata subpiraticus）抗寒性的影响,并通过高通量测序技术对其抗寒性可能的影响机制进行探讨。主要研究结果如下:1.镉胁迫对拟水狼蛛的生长发育有不利影响。镉胁迫组幼蛛发育总历期57±1.8212天,略长与对照组幼蛛54.7±1.2103天;镉胁迫组5-7龄幼蛛背甲宽、体长、体重、中眼域宽等指标均显着低于对照组（P<0.01）。2.镉胁迫对拟水狼蛛血淋巴中营养物质的代谢有影响,发现正常蜘蛛血淋巴中的蛋白、糖类、脂肪含量低于镉胁迫蜘蛛的含量;低温（4℃）刺激对拟水狼蛛血淋巴中营养物质的代谢有影响,发现4℃时蜘蛛血淋巴中的蛋白、糖类、脂肪含量高于25℃时的含量;镉胁迫和低温刺激对拟水狼蛛的死亡率有不利影响,25℃下,龄期是影响拟水狼蛛的死亡率的主要因素,镉胁迫是次要因素,温度为8℃、4℃和0℃时,镉胁迫是影响拟水狼蛛死亡的主要因素,龄期是次要因素。3.比较低温下有无镉胁迫拟水狼蛛幼蛛基因表达情况,并对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析,发现幼蛛的上调差异基因在GO中主要富集在代谢方面（氧化还原酶活性、氧化还原过程、脂质运输）、应激性方面（生物刺激反应、对外界生物刺激的反应、刺激反应的负调控）和酶活性方面（谷氨酰-t RNA还原酶活性、半胱氨酸型肽酶活性、氧化还原酶活性）,表明重金属镉对拟水狼蛛幼蛛新陈代谢、应激性和机体内酶活造成影响。下调差异基因主要富集在代谢方面（抗生素生物合成过程）,表明镉可能影响低温下幼蛛的抵抗力。在KEGG中,上调差异基因主要富集在细胞凋亡和溶酶体,表明镉胁迫及低温处理条件的综合作用,能促使拟水狼蛛幼蛛细胞凋亡、溶酶体相关基因的表达。下调基因主要富集途径在甾类激素生物合成,甾类激素也就是类固醇物质,说明了镉可能影响到了低温下幼蛛的免疫调节和蜕皮调控方面。4.比较低温下有无镉胁迫拟水狼蛛成蛛基因表达情况,并对差异表达基因进行GO富集分析,发现成蛛在GO中的上调差异基因主要富集在应激性方面（细胞对化学刺激的反应、细胞对内源性刺激的反应）,说明镉可能对拟水狼蛛成蛛的感官和神经系统有影响。下调差异基因主要富集在代谢方面（核苷酸分解代谢过程,蛋白质水解）和酶活性方面（金属肽酶活性、水解酶活性）,说明重金属镉可能对低温下的成蛛营养吸收、金属肽酶活性和水解酶活性有影响。
李向阳[6]（2019）在《镉胁迫引起胎盘滋养层细胞氧化损伤的机制研究》文中进行了进一步梳理镉（Cadmium,Cd）是一种被广泛应用于工业生产中的有毒重金属,对发展中国家以及高度工业化的国家公共卫生造成了严重危害。之前的研究表明,Cd可以通过食物链、职业暴露和香烟烟雾而富集,最终蓄积在血液,脑,肾脏和肝脏以及生殖器官中,包括卵巢,睾丸和胎盘。尤其是怀孕期间妇女更容易受到Cd毒性的影响,因为Cd更容易积聚在胎盘中,导致一系列与胎盘相关的疾病,如先兆子痫、胎儿生长受限和流产等。因此,本研究以人的胎盘滋养层（HTR-8/SVneo）细胞为研究模型,探究Cd诱导人胎盘滋养层细胞损伤及凋亡的分子机制,为研究Cd引起哺乳动物流产的致病机理提供理论基础。实验结果如下:1.MTT实验结果表明,CdCl2可以降低HTR-8/SVneo细胞活力,抑制细胞生长,并且具有时间和剂量依赖性关系。通过光学显微镜观察发现HTR-8/SVneo细胞经CdCl2处理后,随着CdCl2浓度的增大和处理时间的延长,细胞形态有明显的变圆皱缩现象。DCFH-DA荧光染色和流式细胞术检测均表明,CdCl2处理可以诱导HTR-8/SVneo细胞产生大量的ROS。通过检测细胞内的抗氧化酶活性发现,CdCl2处理可以抑制HTR-8/SVneo细胞内的SOD、CAT和GSH-Px活性,损伤细胞内的抗氧化系统;同时,CdCl2诱导HTR-8/SVneo细胞发生明显的脂质过氧化损伤,引起细胞内MDA含量升高。抗氧化剂NAC可以抑制CdCl2造成的细胞内ROS积累,并保护其抗氧化系统。2.通过透射电子显微镜观察发现,CdCl2处理后HTR-8/SVneo细胞内线粒体出现空泡化且基质密度降低,嵴出现断裂甚至消失;JC-1荧光染色发现,CdCl2处理后HTR-8/SVneo细胞内线粒体膜电位降低。通过碱性彗星实验表明,CdCl2可以诱导HTR-8/SVneo细胞产生彗星状拖尾,发生DNA损伤;免疫荧光检测发现,在CdCl2处理组内可以明显的观察到γ-H2AX焦点的形成;同时,western blot检测也发现,经CdCl2处理后的HTR-8/SVneo细胞内γ-H2AX蛋白表达量明显升高,印证了彗星实验结果。此外,通过流式细胞术检测发现,CdCl2处理可以改变HTR-8/SVneo细胞周期分布,将细胞周期阻滞在G0/G1期,减少S期细胞数量,抑制细胞生长。通过Hoechst33342和AO/EB荧光染色发现,CdCl2处理后细胞核内出现染色质凝聚,核固缩甚至碎裂等;透射电镜观察发现,CdCl2处理后细胞核内出现染色质凝聚,边集化等凋亡特征。Annexin V-FITC/PI双荧光染色检测显示细胞凋亡率随着CdCl2浓度的增大而升高。通过琼脂糖凝胶电泳发现,CdCl2处理后,细胞内DNA逐渐断裂为180-200 bp的片段,形成DNA ladder,这是细胞凋亡的显着特征。Western blot检测结果也显示出,细胞内cleaved caspase-3和Bax表达量升高,而Bcl-2的表达量降低,Bax与Bcl-2的比值逐渐升高,说明CdCl2处理可以诱导HTR-8/SVneo细胞发生凋亡。抗氧化剂NAC可以缓解CdCl2诱导HTR-8/SVneo细胞内ROS积累对线粒体和DNA造成的损伤及细胞周期阻滞,并降低细胞凋亡率。3.通过建立小鼠Cd中毒模型发现,CdCl2处理后小鼠的胎盘直径和质量均明显降低,滋养层细胞发生严重的细胞核固缩、碎裂,部分细胞出现溶解性坏死。通过免疫荧光检测发现,CdCl2可以特异性诱导胎盘组织中滋养层细胞发生DNA损伤和凋亡。结论:总之,Cd在人滋养层HTR-8/SVneo细胞中通过引发氧化应激介导线粒体损伤和细胞凋亡。本研究中的这些发现为揭示Cd暴露引起的胎盘相关疾病预防提供了新的见解。
宋昌霞[7]（2019）在《重金属Cd2+扰动克氏原螯虾proPO-AS活性的毒性通路研究》文中进行了进一步梳理目的:近年来,我国水域环境的污染状况日益严峻,重金属镉是典型的污染物之一,能对水生动物造成氧化应激、免疫抑制等毒性效应,严重危害了机体健康。酚氧化酶原激活系统（proPO-AS）是甲壳动物主要的免疫防御系统,其组成成分活性的变化与甲壳动物的健康状况密切相关。通常proPO的激活受到严密、精准的调控,但目前对环境胁迫下调控proPO-AS的信号通路尚不清楚。关键转录因子（NF-κB p65、Nrf2）、信号转导通路（p38 MAPK）在水生动物对重金属胁迫的响应及其调控氧化损伤、免疫（或炎症）反应中的重要作用备受关注。环境胁迫会诱导p38MAPK、NF-κB、Nrf2等信号通路分子在肝胰腺合成、表达。气体信号分子内源性H2S具有重要免疫调节功能,是当前国内外研究胁迫响应、信号转导、免疫调节的前沿和热点,在人类、哺乳动物、植物细胞内具有主要的生理功能,如氧化胁迫响应、疾病发生发展、抗逆生理等方面。信号通路和气体信号分子内源性H2S在重金属Cd2+扰动天然免疫防御中可能也发挥着重要作用。本研究通过对信号通路关键蛋白以及气体信号分子H2S的研究,解析低、中、高三个亚致死浓度Cd2+诱导对克氏原螯虾proPO-AS活性的影响,初步探讨重金属Cd2+扰动天然免疫防御的毒性机制,旨在为甲壳动物的病害防治提供理论依据。方法:以克氏原螯虾（Procambarus clarkii）为试验动物,重金属Cd2+为胁迫因子,采取96h静态水质急性染毒实验,在得到克氏原螯虾的半致死浓度LC50(约为42 mg·L-1)的基础上,分别设置1.0、5.0和10.0 mg·L-1(近似于LC50的1/42,1/8,和1/4)3个Cd2+处理组和一个0 mg·L-1对照组。分别在Cd2+暴露24h、48h、72h和96h后,采集血淋巴和肝胰腺组织,用于生化法检测氧化应激指标ROS、主要免疫因子（THC、pro-PO、PO和SP）以及内源性硫化氢含量;免疫组化法检测肝胰腺组织中NF-κBp65、Nrf2、p38、p-p38以及CBS的表达水平,并采用Pearson法分析其相关性。结果:1.重金属Cd2+使克氏原螯虾肝胰腺和血淋巴中ROS含量上升,机体产生氧化应激反应。在染毒96h后,随着浓度的增大ROS含量显着上升（P<0.05）。重金属Cd2+胁迫下,1mg·L-1Cd2+、5mg·L-1Cd2+和10mg·L-1Cd2+组螯虾肝胰腺组织均出现了典型的病理损伤。在整个染毒期间,三个Cd2+处理组都不同程度的诱导了肝胰腺组织p38表达,并发生了不同程度的磷酸化,其中5mg·L-1Cd2+处理组的作用更明显（P<0.05）。随着染毒时间的延长,高浓度Cd2+(10mg·L-1)对肝胰腺组织p38的表达与磷酸化水平有抑制作用。关键转录因子NF-κB p65和Nrf2与对照组相比,表达水平明显上升（P<0.05）,其中5mg·L-1Cd2+组水平相较其他实验组增幅明显,表明其被不同程度激活。通过相关性分析表明,p-p38 MAPK与NF-κB p65和Nrf2正相关,NF-κB p65和Nrf2负相关。Cd2+提高了p38MAPK、p-p38MAPK、NF-κB p65以及Nrf2的表达水平,这可能是Cd2+的毒性效应。2.在重金属Cd2+暴露期间,p38 MAPK、p-p38 MAPK、NF-κB p65和Nrf2表达增强,酚氧化酶、丝氨酸蛋白酶、酚氧化酶原活性均被抑制,这可能与p38 MAPK、NF-κB p65和Nrf2介导了Cd2+的毒性作用有关。3.Cd2+暴露染毒48h后,免疫组化分析表明,CBS在低浓度组(1mg·L-1)相对于其他组表达量都极显着升高（P<0.01）。内源性硫化氢（H2S）含量相对于对照组也有不同程度的变化,表明气体信号分子内源性H2S的变化与Cd2+暴露密切相关。相关性分析显示,CBS与NF-κB p65、PO有显着相关性,结果提示,内源性H2S合成酶与NF-κB、PO的活性变化存在密切的关系。结论:本研究表明,重金属Cd2+胁迫下,机体产生大量ROS,导致氧化应激反应,肝胰腺组织中信号转导通路（p38 MAPK）被激活,下游转录因子（NF-κB p65、Nrf2）的表达增强,PO、SP和proPO活性均被不同程度抑制。其中,气体信号分子内源性H2S可能也参与了Cd2+扰动酚氧化酶原激活系统的活性的变化。通过对信号通路关键蛋白以及气体介质的研究,解析Cd2+对克氏原螯虾proPO-AS活性的影响,初步探讨环境Cd2+暴露扰动克氏原螯虾等无脊椎动物天然免疫防御的毒性机制,为水产养殖动物的病害防治提供了理论依据,对水生动物的健康养殖具有重要意义。
李有幸[8]（2019）在《氯化镉对大鼠免疫毒性及Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡影响的研究》文中研究说明第一部分亚慢性镉暴露对SD大鼠的免疫毒性效应目的:建立动物染毒模型,观察亚慢性镉暴露对SD大鼠血常规、肝肾功能指标的影响及肝、肾、肺、胸腺、脾脏、肠系膜淋巴结的病理学改变,探讨长期低剂量镉暴露对机体的免疫毒性效应。方法:选择SD大鼠40只,雌雄各半,平均体重（284.71±55.95）g,随机分为4组:对照组（ddH2O）、CdCl275 mg/L组、150 mg/L组、300 mg/L组。常规喂养标准饲料,自由采食和饮水,其中对照组饮用纯双蒸水,染镉组饮用含CdCl2双蒸水,连续染毒9个月,每周称量大鼠体重并记录。实验结束后,麻醉处死并行腹主动脉采血,采血后取肝、肾、肺、胸腺、脾脏、肠系膜淋巴结等脏器,称重及计算其脏器系数,将部分组织进行染色及切片,观察和分析各脏器组织的病理学改变。采用全自动血常规检测仪、全自动生化分析仪分别检测血常规及肝肾功能指标。结果:（1）各剂量组大鼠体重随时间增长呈递增趋势（P<0.05）,但各时间周期各组间大鼠体重差异均无统计学意义（P>0.05）;各剂量组肝、肾、肺、脾的脏器质量及脏器系数差异均无统计学意义（P>0.05）,75 mg/L、150 mg/L剂量组的胸腺质量和脏器系数明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;（2）血常规指标检测结果显示:与对照组比较,300 mg/L剂量组的WBC、LYMPH、PLT均明显升高（P<0.05）,150mg/L、300 mg/L剂量组的HGB明显下降（P<0.05）;与75 mg/L剂量组比较,300 mg/L剂量组的WBC、PLT均明显升高（P<0.05）;肝肾功能指标检测结果显示:与对照组比较,150 mg/L剂量组的AST、UREA、UA和300 mg/L剂量组的ALT、AST、UREA、CREA、UA均明显升高（P<0.05）;与75 mg/L剂量组比较,150 mg/L剂量组的UA和300 mg/L剂量组的ALT、AST、UREA、CREA均明显升高（P<0.05）;（3）组织病理学检查结果显示,各组大鼠肝组织出现不同程度的淤血、水肿、坏死和增生,肾组织近曲小管上皮细胞不同程度的肿胀、空泡变性及坏死;肺组织局灶性肺间质纤维增生、间隔增宽、间质血管闭塞、消失、肺泡腔变小;胸腺和肠系膜淋巴结淋巴滤泡反应性增生,滤泡生发中心扩大、吞噬细胞增多;脾脏白髓萎缩,动脉周围淋巴鞘及边缘区淋巴细胞减少,红髓血窦扩张、淤血,吞噬细胞增多,300 mg/L剂量组的红髓出现部分纤维化;肝、肾、肺、胸腺、脾脏及肠系膜淋巴结病变程度随染毒剂量增加而逐渐加重。结论:（1）亚慢性镉暴露能够引起大鼠肝肾功能及肝、肾、肺组织不同程度的损害。（2）亚慢性镉暴露能够引起大鼠血常规指标改变及胸腺、脾、淋巴结组织不同程度的损害,提示亚慢性镉暴露对机体具有免疫毒性效应。第二部分氯化镉对Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡的影响目的:越来越多的证据表明镉可诱导自身免疫性疾病的发生,但其机制尚未清楚。本研究主要在细胞和动物水平上检测氯化镉暴露后CD4+T淋巴细胞Th1/Th2/Th17/Treg四种亚群细胞主要转录因子及相关细胞因子的表达变化,共同探讨镉对Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡的影响及其在诱导自身免疫性疾病中所起的作用。方法:（1）本实验采用Jurkat T淋巴细胞作为体外实验研究对象,用不同浓度（0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L、50μmol/L）Cd Cl2对Jurkat T淋巴细胞染毒24h、48h、72h,观察各组细胞的生长方式和形态学改变,用CCK8试剂盒检测各组细胞的增殖抑制情况,参考相关文献及半抑制率（IC50）的结果,选用（0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L）Cd Cl2浓度对Jurkat T淋巴细胞进行染毒实验,染毒时间为24h、48h、72h。染毒结束后,提取细胞RNA,逆转录合成c DNA,采用Real-time PCR技术检测Th1/Th2/Th17/Treg细胞主要转录因子T-bet、GATA3、RORC、Foxp3及相关细胞因子TGF-β、IL-6、IL-16、IL-23的m RNA表达变化。（2）将第一部分SD大鼠的外周血作为实验对象,采用ELISA试剂盒检测血浆中Ig G、Ig M抗体浓度及细胞因子IL-1α、IL-1β、IL-4、IL-5、IL-6、IL-17A、IL-17F、TNFa的蛋白表达变化;外周血中提取RNA,检测Th1/Th2/Th17/Treg细胞主要转录因子T-bet、GATA3、RORc、Foxp3及相应细胞因子IFN-r、IL-2、IL-4、IL-6、IL-17A、IL-17F、IL-22、IL-10、TGF-β的m RNA表达变化。结果:1、Real-time PCR检测Jurkat T淋巴细胞各基因m RNA表达的结果显示:与对照组比较,各染毒时间段各剂量组的T-bet、GATA3、RORc表达均未出现明显改变（P>0.05）,染毒72h后各剂量组的Foxp3表达均下降（P<0.05）,染毒72h后各剂量组的TGF-β表达均下降（P<0.05）,各染毒时间段20μmol/L剂量组的IL-6表达均出现升高（P<0.05）,各染毒时间段各剂量组的IL-16表达均未出现明显改变（P>0.05）,染毒72h后各剂量组的IL-23表达均升高（P<0.05）。2、（1）ELISA检测SD大鼠外周血抗体和细胞因子蛋白表达的结果显示:与对照组比较,300 mg/L剂量组的Ig G抗体浓度出现升高（P<0.05）,150 mg/L、300 mg/L剂量组的IL-1α表达均升高（P<0.05）,各剂量组的IL-6表达均升高,各剂量组的IL-1β、IL-4、IL-5、IL-17F、TNFa表达未出现明显改变（P>0.05）,300 mg/L剂量组的IL-17A表达升高（P<0.05）。（2）Real-time PCR检测SD大鼠外周血各基因m RNA表达的结果显示:与对照组比较,各剂量组的T-bet表达未出现明显改变（P>0.05）,150mg/L剂量组的GATA3表达升高（P<0.05）,150 mg/L、300 mg/L剂量组的RORc表达均升高（P<0.05）,各剂量组的Foxp3表达均下降（P<0.05）,各剂量组的RORc/Foxp3比例均升高（P<0.05）,各剂量组的IFN-r、IL-2、IL-22表达均未出现明显改变（P>0.05）,300 mg/L剂量组的IL-4表达下降（P<0.05）,300 mg/L剂量组的IL-6、IL-17A、IL-17F表达均升高（P<0.05）,各剂量组的IL-10表达均下降（P<0.05）;150 mg/L、300 mg/L剂量组的TGF-β表达均下降（P<0.05）。结论:（1）镉暴露能够引起Jurkat T淋巴细胞及大鼠外周血Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡失衡,主要以Th17/Treg细胞比例上调为主。（2）镉暴露引起的Th17/Treg细胞失衡,可能会增加镉诱导自身免疫性疾病发生的风险。
孙良琦[9]（2019）在《十溴二苯乙烷和镉复合作用对蚯蚓的毒性效应》文中研究说明十溴二苯乙烷（decabromodiphenyl ethane,DBDPE）是美国阿尔伯马尔公司于1990年研究出的一种新式溴代阻燃剂,它具有稳定性强,渗出性低等特点;非常适合用于电脑、传真机、复印机、家电等高档材料的阻燃。2003年,Kierkegaard等首次在一些环境介质中检测出DBDPE,此后,在大气、水体、土壤、沉积物等不同环境介质中DBDPE开始不断地被检出。目前,DBDPE的使用非常广泛,使用量也很大,且有不断增加的趋势。镉（Cadmium,Cd）是一种过渡重金属,被列为危害人类健康的第七大危险物质。镉可以在人体的骨骼和肾脏中积累,会导致肾小管损伤、肾功能不全、骨软化和骨质疏松等病症,会引起肺癌、前列腺癌等癌症。镉还对动植物的代谢功能、生长发育和生理功能产生影响。本文以赤子爱胜蚓（Eisenia fetida）为研究对象,研究了DBDPE单一及其与镉复合作用对赤子爱胜蚓的毒性效应。试验在土壤中进行,选取了0、2.5、5、10、20mg/kg的DBDPE和5 mg/kg的镉进行单一和复合试验,染毒之后在7 d、14 d、21 d、28 d取样测定相关指标,对蚯蚓的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、谷胱甘肽硫转移酶（GST）的活性,丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）的含量,蚯蚓体腔细胞DNA的损伤程度进行了测定。主要试验结果如下:（1）随着染毒时间的增加,DBDPE单一组蚯蚓体内CAT、POD、GST的活性一直呈现上升的状态,SOD活性则出现先增加而后降低的情况;随着染毒时间的增加,各处理组的MDA、ROS含量较空白组呈现先升高后降低的趋势。（2）28 d的试验周期中,DBDPE与Cd复合组蚯蚓体内的SOD、CAT、POD均呈现出激活状态,从整体来看,活性高于DBDPE单一组;GST活性则一直处于被抑制状态。各处理组的MDA、ROS含量较空白组明显升高,且整体高于DBDPE单一组。DBDPE与镉整体表现为协同作用。（3）在DBDPE浓度为2.5 mg/kg时,蚯蚓体腔细胞的OTM值显着升高,DBDPE浓度越高,细胞的OTM值也会随之增高;并且随着时间的增加,蚯蚓DNA损伤程度也越大。（4）DBDPE与镉复合作用时,随着浓度的升高和时间的增加,蚯蚓的体腔细胞OTM值呈现出不断增加的趋势。DBDPE与镉复合染毒时表现为协同作用。
桂赛玉[10]（2017）在《镉胁迫下不同倍性鲫的抗逆性研究》文中研究指明随着工业化的急速发展,环境污染日益严重,其中重金属镉的污染尤为突出。鲫作为常见的水生生物,可从水体中吸收或通过摄食累积重金属,并富集于肝胰脏、肾脏、鳃、鱼鳍等部位。重金属暴露时间、暴露浓度、环境温度等一系列因素均会影响其在鲫体内的富集作用。三倍体湘云鲫2号（3n=150）是省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室研制的优质新型品种,抗逆性较强,对恶劣的自然环境具有较高的适应能力,主要表现在耐低温、抗病性强等方面。因此本实验以二倍体红鲫（2n=100）和三倍体湘云鲫2号为材料,分别从胚胎、仔鱼、成鱼等方面研究了镉胁迫下不同倍性鲫的抗逆性。主要研究结果如下:1.镉胁迫下不同倍性鲫胚胎的急性毒理实验在胚胎的急性毒理实验中,分别以3CdSOV8H2O和CdCl2·2.5H2O配制梯度Cd2+溶液,处理不同倍性鲫胚胎,统计96 h内胚胎的死亡率发现,两种不同的Cd2+溶液浓度分别为0-9 mg/L和0～3 mg/L时,胚胎的死亡率均较低且无显着差异,但当Cd2+浓度分别增至12 mg/L和4 mg/L,会导致胚胎的高死亡率,甚至达到全致死状态;CdCl2·2.5H2O对不同倍性鲫胚胎的毒性比3CdSO4·8H2O大;利用原子吸收分光光度法测定处理组和对照组胚胎的胶膜和胚体中的镉含量,处理组二倍体红鲫和三倍体湘云鲫2号胶膜中的镉含量均远高于对照组中的镉含量,且高达11倍多;在对照组中,二倍体红鲫和三倍体湘云鲫2号胶膜中的镉含量比胚体中的镉含量分别高56倍和45倍,但经过9 mg/LCd2+处理后,处理组二倍体红鲫和三倍体湘云鲫2号胶膜中的镉含量远超胚体中的镉含量,分别高达324倍和536倍;胶膜能有效阻隔胚胎对镉的吸收,对胚胎起到保护作用;镉胁迫下导致不同倍性鲫初孵仔鱼畸形率上升,畸形主要表现为:围心腔水肿、尾部/脊索弯曲、卵黄囊消化异常、尾部缺失、黑色素减少以及眼睛发育异常等。2.镉胁迫下不同倍性鲫仔鱼急性毒理实验在仔鱼的急性毒理实验中,统计96 h内镉胁迫下不同倍性鲫仔鱼死亡率,研究发现:镉胁迫下,不同倍性鲫仔鱼的死亡率与暴露时间呈现正相关。在3-6 mg/L内,镉对三倍体湘云鲫2号仔鱼的毒性比二倍体红鲫仔鱼毒性强;在9 mg/L时,二倍体红鲫仔鱼96 h的死亡率高达94.0%,而三倍体湘云鲫2号仔鱼仅为51.9%,三倍体湘云鲫2号仔鱼的抗镉能力强。原子吸收分光光度法测定仔鱼的镉含量,二倍体红鲫仔鱼体内的镉含量随着镉浓度的升高而增加,而三倍体湘云鲫2号仔鱼在Cd2+浓度为3 mg/L时,体内镉含量非常高,而在6～9mg/L时镉含量反而降低,呈现先减后增的总趋势。3.镉胁迫下不同倍性鲫成鱼的急性毒理实验实验结果显示,镉胁迫下,镉暴露时间、镉暴露浓度、生物体的发育程度均会影响不同倍性鲫的存活率;在9 mg/L Cd2+镉胁迫下,96 h内小规格二倍体红鲫的死亡率高达83.3%,而同一时间、相同规格的三倍体湘云鲫2号全活;在15 mg/LCd2+镉胁迫下,24h内小规格二倍体红鲫的死亡率高达100%,相同规格的三倍体湘云鲫2号在相同时间内全活,在96 h内的死亡率为66.7%。原子吸收分光光度法测定镉含量显示,鲫成鱼不同组织对镉的富集能力存在着差异,肾脏和肝胰脏中镉含量最高,肌肉和皮肤中较低;镉在二倍体红鲫肾脏和肝胰脏中的富集度均高于三倍体湘云鲫2号;镉胁迫对鲫成鱼肝胰脏和肾组织均有明显的组织学损伤,其中肝胰脏出现肝血窦扩张、气球样变、脂肪变性等病变,肾组织出现上皮细胞浊肿,肾凝固性坏死等现象。4.镉胁迫下PP2A和HSP在不同倍性鲫成体组织中的表达分析结合 RT-PCR 技术,分别检测了 PP2A-B”γ、PP2A-B”α、PP2A-PR/Bβ、HSP30、HSP40、HSP70、HSP90 在对照组和处理组肝胰脏和肾脏中的表达情况。在镉胁迫下,PP2A-B"α在两种不同倍性鲫肝胰脏和肾脏中的表达量均有显着升高,二倍体红鲫尤为突出;HSP30、HSP70在二倍体红鲫和三倍体湘云鲫2号肝胰脏中表达均有显着升高。综上所述,本研究探讨了二倍体红鲫和三倍体湘云鲫2号对镉胁迫的应答,结果表明三倍体湘云鲫2号成鱼表现出比二倍体红鲫具有更强的抗镉能力,这为进一步研究三倍体湘云鲫2号抗镉及其他环境胁迫的分子机制提供了思路和依据。
二、镉对机体毒性作用机制国内研究进展（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、镉对机体毒性作用机制国内研究进展（论文提纲范文）
（1）蛆症异蚤蝇Megaselia scalaris对重金属镉的毒性反应和解毒机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 城市重金属镉污染的概况 |
| 1.1.1 镉的物理化学性质 |
| 1.1.2 城市环境中镉的来源 |
| 1.1.3 城市环境中镉的分布 |
| 1.1.4 镉的危害 |
| 1.2 镉对昆虫的毒性效应 |
| 1.2.1 镉对昆虫生长发育的毒性效应 |
| 1.2.2 镉对昆虫细胞的毒性效应 |
| 1.2.3 镉对昆虫抗氧化酶系的毒性效应 |
| 1.3 镉与DNA损伤 |
| 1.3.1 DNA链断裂 |
| 1.3.2 DNA交联 |
| 1.4 监测技术研究进展 |
| 1.4.1 理化监测 |
| 1.4.2 生物监测 |
| 1.4.3 单细胞凝胶电泳实验在生物监测中的应用 |
| 1.5 本研究选题依据及意义 |
| 1.6 研究目标 |
| 1.7 研究内容 |
| 1.8 技术路线 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验试剂 |
| 2.2 仪器设备 |
| 2.3 蚤蝇来源与饲养传代 |
| 2.3.1 蚤蝇来源 |
| 2.3.2 重金属镉浓度选择 |
| 2.3.3 人工饲料配制 |
| 2.3.4 饲养方法 |
| 2.3.5 传代方法 |
| 2.4 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇生长发育的影响 |
| 2.4.1 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇亲代生长发育的影响 |
| 2.4.2 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇子代生长发育的影响 |
| 2.4.3 数据分析 |
| 2.5 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇抗氧化酶活性的影响 |
| 2.5.1 试验蚤蝇的选取 |
| 2.5.2 酶液提取 |
| 2.5.3 总蛋白含量测定 |
| 2.5.4 MDA含量测定 |
| 2.5.5 SOD酶活力测定 |
| 2.5.6 CAT酶活力测定 |
| 2.5.7 GSH-PX酶活力测定 |
| 2.5.8 数据分析 |
| 2.6 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇DNA的影响 |
| 2.6.1 试验蚤蝇选取 |
| 2.6.2 试验试剂配制 |
| 2.6.3 蚤蝇细胞悬浮液制备 |
| 2.6.4 单细胞凝胶电泳胶板的制备 |
| 2.6.5 蚤蝇细胞的裂解 |
| 2.6.6 蚤蝇细胞DNA的解旋 |
| 2.6.7 电泳 |
| 2.6.8 中和 |
| 2.6.9 脱水 |
| 2.6.10 染色、观察及分析 |
| 2.6.11 数据分析 |
| 第3章 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇生长发育的影响 |
| 3.1 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇亲代生长发育的影响 |
| 3.1.1 幼虫体长 |
| 3.1.2 幼虫体重 |
| 3.1.3 幼虫发育历期 |
| 3.1.4 化蛹率 |
| 3.1.5 蛹期 |
| 3.1.6 羽化率 |
| 3.1.7 成虫寿命 |
| 3.1.8 成虫雌雄性比 |
| 3.2 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇子代生长发育的影响 |
| 3.2.1 幼虫体长 |
| 3.2.2 幼虫体重 |
| 3.2.3 幼虫发育历期 |
| 3.2.4 化蛹率 |
| 3.2.5 蛹期 |
| 3.2.6 羽化率 |
| 3.2.7 成虫寿命 |
| 3.2.8 成虫雌雄性比 |
| 3.3 本章小结与讨论 |
| 第4章 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇内部组织器官的影响 |
| 4.1 蛆症异蚤蝇幼虫的内部结构特点 |
| 4.1.1 消化道 |
| 4.1.2 马氏管 |
| 4.2 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇内部组织器官的影响 |
| 4.3 本章小结与讨论 |
| 第5章 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇抗氧化酶活性的影响 |
| 5.1 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇幼虫体内MDA含量的影响 |
| 5.2 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇幼虫体内SOD酶活性的影响 |
| 5.3 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇幼虫体内CAT酶活性的影响 |
| 5.4 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇幼虫体内GSH-PX酶活性的影响 |
| 5.5 本章小结与讨论 |
| 第6章 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇体细胞DNA的影响 |
| 6.1 蛆症异蚤蝇体细胞彗星图像 |
| 6.2 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇体细胞彗星尾长的影响 |
| 6.3 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇体细胞彗星尾部DNA百分含量的影响 |
| 6.4 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇体细胞彗星尾矩的影响 |
| 6.5 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇体细胞彗星Olive尾矩的影响 |
| 6.6 本章小结与讨论 |
| 第7章 结论 |
| 7.1 Cd~(2+)对蛆症异蚤蝇的毒性效应 |
| 7.2 蛆症异蚤蝇对Cd~(2+)的生理响应及相关性 |
| 7.3 创新点 |
| 7.4 今后工作展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间研究成果 |
| 致谢 |
（2）环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第一章 前言 |
| 1.镍储量及应用现状 |
| 2.镍对生态环境的污染 |
| 2.1 空气、水、土壤的镍污染 |
| 2.2 镍污染对植被及微生物的影响 |
| 2.3 镍对动物的影响 |
| 2.4 镍暴露对人类的影响 |
| 3.镍与代谢 |
| 4.镍暴露损伤的机制 |
| 第二章 不同浓度NiSO_4 诱导人Nthy细胞凋亡及机制 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 Nthy-ori3-1 细胞株的复苏、培养、传代 |
| 2.2 构建人Nthy细胞镍损伤模型 |
| 2.3 Hoechst33258 荧光染色观察NiSO_4 诱导的Nthy细胞凋亡 |
| 2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率 |
| 2.5 人Nthy细胞线粒体膜电位检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 CCK-8细胞活力检测结果 |
| 3.2 普通光镜下人Nthy细胞形态改变 |
| 3.3 Hoechst33258 荧光染色法检测Nthy细胞凋亡情况 |
| 3.4 NiSO_4 对人Nthy细胞凋亡的处理作用 |
| 3.5 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化 |
| 3.6 激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第三章 不同浓度NiSO_4 诱导人HPNE细胞凋亡及机制 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 人HPNE细胞株的复苏、培养、传代 |
| 2.2 构建人HPNE细胞镍损伤模型 |
| 2.3 Hoechst33258 荧光染色观察NiSO_4 诱导的人HPNE细胞凋亡 |
| 2.4 流式细胞仪检测人HPNE细胞凋亡率 |
| 2.5 人HPNE细胞线粒体膜电位检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 CCK-8细胞活力检测结果 |
| 3.2 普通光镜下人HPNE细胞形态改变 |
| 3.3 Hoechst33258 荧光染色法检测人HPNE细胞凋亡情况 |
| 3.4 NiSO_4 对人HPNE细胞凋亡的处理作用 |
| 3.5 流式细胞仪检测线粒体膜电位变化 |
| 3.6 激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第四章 NiSO_4对大鼠甲状腺功能、形态及凋亡增殖的影响 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 主要试验仪器 |
| 1.2 主要试验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 染毒动物模型建立 |
| 2.2 大鼠甲状腺组织病理切片制备 |
| 2.3 大鼠甲状腺功能测定 |
| 2.4 RT-PCR法测定大鼠甲状腺组织中Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的 m RNA表达水平 |
| 2.5 免疫组化法检测大鼠甲状腺组织中Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 2.6 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 NiSO_4染毒后大鼠一般情况 |
| 3.2 大鼠体重的变化 |
| 3.3 大鼠甲状腺组织形态学改变 |
| 3.4 大鼠甲状腺功能的改变 |
| 3.5 大鼠甲状腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平和含量的变化 |
| 3.6 大鼠甲状腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2和Fas蛋白表达水平 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 第五章 NiSO_4对大鼠胰腺功能、形态及凋亡增殖的影响 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 主要试验仪器 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 染毒动物模型建立 |
| 2.2 大鼠胰腺组织病理切片制备 |
| 2.3 大鼠血糖、胰岛素及C肽水平测定 |
| 2.4 RT-PCR法测定大鼠胰腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的 m RNA表达水平 |
| 2.5 免疫组化法检测大鼠胰腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 大鼠胰腺组织形态学改变 |
| 3.2 大鼠随机血糖、血清胰岛素及C肽水平的变化 |
| 3.3 大鼠胰腺组织Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas的mRNA表达水平和含量的变化 |
| 3.4 大鼠胰腺组织Caspase-3、Bax、Bcl-2、Fas蛋白表达水平 |
| 4.讨论 |
| 5.结论 |
| 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 重金属甲状腺毒性及其作用机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
（3）镉在克氏原鳌虾中的蓄积及对其p38 MAPK基因表达的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 镉污染及其危害 |
| 1.1.1 镉的特性及对水环境的污染 |
| 1.1.2 镉在水生动物中的蓄积及危害 |
| 1.1.3 镉对人类健康的危害 |
| 1.2 克氏原螯虾概况 |
| 1.3 p38MAPK基因 |
| 1.3.1 p38MAPK概述 |
| 1.3.2 p38MAPK在水生动物中的研究进展 |
| 1.3.3 p38MAPK与镉毒性作用的研究进展 |
| 1.4 本课题研究意义与主要研究内容 |
| 1.5 技术路线 |
| 2 镉在克氏原螯虾组织中的蓄积 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验生物 |
| 2.1.2 实验试剂与仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 镉蓄积实验 |
| 2.2.2 样品处理与镉的测定 |
| 2.2.3 数据处理 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 克氏原螯虾p38MAPK基因克隆及序列分析 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 实验生物 |
| 3.1.2 实验试剂与仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 克氏原螯虾的总RNA提取 |
| 3.2.2 第一链cDNA的合成 |
| 3.2.3 5'-RACE c DNA和3'-RACE c DNA的合成 |
| 3.2.4 引物设计和PCR扩增 |
| 3.2.5 PCR产物的纯化 |
| 3.2.6 目的片段与 pMD-19T 的连接及转化 |
| 3.2.7 克氏原螯虾p38基因序列分析方法 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 克氏原螯虾p38基因序列分析 |
| 3.3.2 克氏原螯虾p38基因同源性及系统进化分析 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 克氏原螯虾p38在不同组织中的表达及镉对其表达量的影响 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 实验生物 |
| 4.1.2 实验试剂与仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 克氏原螯虾p38基因表达量的测定 |
| 4.2.2 克氏原螯虾组织镉含量的测定 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 克氏原螯虾p38基因和镉含量在组织中的分布情况研究 |
| 4.3.2 镉胁迫下鳌虾组织中p38基因表达量及镉含量分析 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 注射特异si RNA抑制螯虾p38 基因表达后对其镉蓄积的影响 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 实验生物 |
| 5.1.2 实验试剂与仪器 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 siRNA的设计合成 |
| 5.2.2 克氏原鳌虾siRNA的注射 |
| 5.2.3 siRNA作用效果检测 |
| 5.2.4 RNA干扰后镉胁迫下p38基因表达和镉蓄积的检测 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 siRNA作用效果 |
| 5.3.2 RNA干扰后镉胁迫下p38基因表达和镉蓄积 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 研究生期间成果 |
（4）钙补充拮抗膳食镉暴露致骨毒作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一章 一般人群膳食镉暴露剂量下大鼠钙补充的最小观察到有害作用剂量研究 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 材料与方法 |
| 1.2.1 试剂与仪器 |
| 1.2.2 实验动物及分组 |
| 1.2.3 钙补充剂量选择及给予方式 |
| 1.2.4 一般临床观察,体重和食物消耗 |
| 1.2.5 钙吸收代谢实验 |
| 1.2.6 血液学检查 |
| 1.2.7 血生化检查 |
| 1.2.8 脏器重量、脏体比 |
| 1.2.9 肾病理学检查 |
| 1.2.10 生物样品中钙、铁、锌、铜检测 |
| 1.2.11 统计分析 |
| 1.3 结果 |
| 1.3.1 大鼠一般状况、体重和进食量 |
| 1.3.2 大鼠食物利用率和膳食镉暴露量 |
| 1.3.3 血液学结果 |
| 1.3.4 血生化结果 |
| 1.3.5 脏器重量和脏器指数 |
| 1.3.6 肾病理学结果 |
| 1.3.7 钙补充对血清钙、磷、铁、锌、铜的影响 |
| 1.3.8 钙补充对钙、铁、锌、铜表观吸收率的影响 |
| 1.3.9 钙补充对大鼠肝、肾组织中铁、锌、铜含量的影响 |
| 1.3.10 钙补充对大鼠股骨干重和骨钙含量的影响 |
| 1.4 讨论 |
| 第二章 一般人群膳食镉暴露剂量下不同剂量钙补充对大鼠镉吸收的影响 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 试剂与仪器 |
| 2.2.2 实验动物、分组及染毒 |
| 2.2.3 镉吸收代谢实验 |
| 2.2.4 饲料钙、镉含量测定和肝、肾组织镉含量测定 |
| 2.2.5 CaBP、CaT1和DMT1 基因实时荧光定量PCR检测 |
| 2.2.6 统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 大鼠饲料镉钙含量 |
| 2.3.2 大鼠膳食每日镉摄入情况 |
| 2.3.3 钙补充对大鼠镉表观吸收率的影响 |
| 2.3.4 钙补充对大鼠肝、肾组织镉浓度的影响 |
| 2.3.6 钙补充对大鼠小肠CaBP基因表达的影响 |
| 2.3.7 钙补充对大鼠肾脏CaBP、CaT1、DMT1基因表达的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 钙补充对不同剂量膳食镉暴露致大鼠骨毒作用的干预效应研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 仪器与试剂 |
| 3.2.2 实验动物及分组 |
| 3.2.3 剂量选择及给予方式 |
| 3.2.4 体重、摄食量及一般情况观察 |
| 3.2.5 三点弯曲试验测试大鼠股骨生物力学特性 |
| 3.2.6 原子吸收法测定大鼠骨钙含量和肝、肾、骨组织镉含量 |
| 3.2.7 大鼠胫骨组织病理学检查 |
| 3.2.8 大鼠血清骨代谢标志物PINP、β-CTX酶联免疫吸附检测 |
| 3.2.9 大鼠股骨骨代谢通路OPG和 RANKL实时荧光定量PCR检测 |
| 3.2.10 大鼠股骨骨代谢通路OPG和 RANKL蛋白酶联免疫吸附检测 |
| 3.2.11 大鼠胫骨骨代谢通路OPG和 RANKL免疫组织化学检测 |
| 3.2.12 统计分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 大鼠体重情况 |
| 3.3.2 大鼠膳食镉摄入情况 |
| 3.3.3 钙补充干预对大鼠肾皮质,肝脏和股骨镉浓度的影响 |
| 3.3.4 钙补充干预对大鼠股骨重量和骨钙含量的影响 |
| 3.3.5 钙补充干预对大鼠血清骨代谢生物标志物的影响 |
| 3.3.6 钙补充干预对大鼠股骨生物力学指标的影响 |
| 3.3.7 钙补充干预对大鼠胫骨病理学的影响 |
| 3.3.8 钙补充干预对大鼠血清骨代谢OPG/RANKL通路蛋白酶联免疫吸附检测结果的影响 |
| 3.3.9 钙补充干预对大鼠股骨OPG/RANKL通路基因表达实时荧光定量PCR检测结果的影响. |
| 3.3.10 钙补充干预对大鼠股骨OPG/RANKL通路蛋白酶联免疫吸附检测结果的影响 |
| 3.3.11 钙补充干预对大鼠胫骨OPG/RANKL通路蛋白免疫组化检测结果的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 基于FGF23/Klotho轴探讨钙对镉致骨毒作用的保护机制研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 试剂与仪器 |
| 4.2.2 实验动物及分组 |
| 4.2.3 实验方法及样本收集 |
| 4.2.4 血清1,25-(OH)2D3,Klotho蛋白,全段FGF23,C端 FCF23 蛋白酶联免疫吸附检测 |
| 4.2.5 肾组织Klotho基因、FGF受体基因、VD代谢基因及磷转运基因实时荧光定量PCR |
| 4.2.6 骨FGF23、Wnt/β-catenin信号通路、成骨细胞分化相关基因实时荧光定量PCR |
| 4.2.7 肾Klotho蛋白和胫骨FGF23、Wnt/β-catenin、成骨细胞增殖分化相关蛋白免疫组化检测 |
| 4.2.8 骨组织蛋白提取和骨组织Col1a1蛋白酶联免疫吸附检测 |
| 4.2.9 骨组织FGF23 蛋白免疫印迹法检测(Western blotting) |
| 4.2.10 统计分析 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 钙补充干预对大鼠血清1,25-(OH)2D3的影响 |
| 4.3.2 钙补充干预对大鼠血清Klotho蛋白、全段FGF23 蛋白和C端 FGF23 蛋白的影响 |
| 4.3.3 钙补充干预对大鼠肾Klotho、FGF受体基因、VD代谢基因及磷转运基因表达的影响 |
| 4.3.4 钙补充干预对大鼠肾组织中Klotho蛋白表达酶联免疫吸附检测结果的影响 |
| 4.3.5 钙补充干预对大鼠肾组织中Klotho蛋白免疫组化检测结果的影响 |
| 4.3.6 钙补充干预对大鼠股骨FGF23基因与蛋白的影响 |
| 4.3.7 钙补充干预对大鼠股骨Wnt/β-catenin信号通路相关基因和蛋白的影响 |
| 4.3.8 钙补充干预对大鼠成骨细胞分化相关基因表达的影响 |
| 4.3.9 钙补充干预对大鼠成骨细胞分化相关蛋白的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 全文总结 |
| 5.1 主要研究结论 |
| 5.2 主要创新点 |
| 5.3 研究不足 |
| 5.4 展望 |
| 参考文献 |
| 综述 镉毒性损害的营养干预研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（5）镉胁迫对拟水狼蛛生长发育及抗寒性的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1 研究背景 |
| 1.1 土地重金属镉污染 |
| 1.1.1 国内耕地重金属污染现状 |
| 1.1.2 耕地重金属污染来源 |
| 1.2 镉对微生物、动物、植物及人体的影响 |
| 1.2.1 镉污染对土壤微生物的影响 |
| 1.2.2 镉污染对植物的影响 |
| 1.2.3 镉污染对动物的影响 |
| 1.2.4 镉污染对人体的影响 |
| 1.3 节肢动物越冬的相关研究 |
| 1.4 常用研究基因差异表达的实验方法 |
| 1.4.1 SAGE技术 |
| 1.4.2 RNA-Seq技术 |
| 第二章 重金属镉对拟水狼蛛生长发育的影响 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 培养基配置及果蝇的接种 |
| 2.1.2 供试果蝇 |
| 2.1.3 供试蜘蛛 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.1.5 主要试剂 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 拟水狼蛛幼蛛生长指标的测定 |
| 2.2.2 常温下镉胁迫的拟水狼蛛幼蛛存活率 |
| 2.3 数据分析 |
| 2.4 结果与分析 |
| 2.4.1 镉胁迫对拟水狼蛛幼蛛发育历期的影响 |
| 2.4.2 镉胁迫对拟水狼蛛幼蛛体长的影响 |
| 2.4.3 镉胁迫对拟水狼蛛幼蛛中眼域宽的影响 |
| 2.4.4 镉胁迫对拟水狼蛛幼蛛背甲宽的影响 |
| 2.4.5 镉胁迫对拟水狼蛛幼蛛体重的影响 |
| 2.4.6 常温下镉胁迫对拟水狼蛛幼蛛存活率的影响 |
| 2.5 讨论 |
| 第三章 在低温下镉胁迫对拟水狼蛛体内能量物质的影响 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.1.1 培养基配置 |
| 3.1.2 供试果蝇 |
| 3.1.3 供试蜘蛛 |
| 3.1.4 主要仪器 |
| 3.2 研究方法 |
| 3.2.1 拟水狼蛛血淋巴采样 |
| 3.2.2 拟水狼蛛血淋巴中蛋白含量测定 |
| 3.2.3 拟水狼蛛血淋巴糖类含量测定 |
| 3.2.4 拟水狼蛛血淋巴中脂肪含量测定 |
| 3.3 数据分析 |
| 3.4 结果与分析 |
| 3.4.1 拟水狼蛛血淋巴中蛋白含量 |
| 3.4.2 拟水狼蛛血淋巴中糖类含量 |
| 3.4.3 拟水狼蛛血淋巴中脂肪含量 |
| 3.5 镉胁迫对不同温度下拟水狼蛛死亡率的影响 |
| 3.6 讨论 |
| 第四章 镉胁迫对拟水狼蛛抗低温基因表达水平的影响 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 供试蜘蛛 |
| 4.1.2 主要仪器 |
| 4.2 实验步骤 |
| 4.2.1 Total RNA提取 |
| 4.2.2 Total RNA样品检测 |
| 4.2.3 文库构建及库检 |
| 4.2.4 文库上机测序 |
| 4.2.5 生物信息分析流程 |
| 4.3 数据处理与分析 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 测序数据质量评估 |
| 4.4.2 转录本拼接 |
| 4.4.3 数据库基因功能注释 |
| 4.5 分析 |
| 4.5.1 拟水狼蛛基因表达水平分析 |
| 4.5.2 低温下有无镉胁迫幼蛛差异基因功能富集分析 |
| 4.5.3 低温下有无镉胁迫成蛛差异基因功能富集分析 |
| 4.6 讨论 |
| 4.6.1 低温下幼蛛差异表达基因的生物学功能 |
| 4.6.2 低温下成蛛差异表达基因的生物学功能 |
| 第五章 结论、创新性及下一阶段工作 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 创新性 |
| 5.3 下一阶段工作 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）镉胁迫引起胎盘滋养层细胞氧化损伤的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 综述 |
| 1 Cd的污染现状及对人体的危害 |
| 1.1 Cd的污染现状 |
| 1.2 Cd对人体的危害 |
| 1.3 Cd的生殖毒性 |
| 1.4 Cd对胎盘的影响 |
| 1.5 Cd对滋养层细胞的影响 |
| 2 Cd的毒性机制研究 |
| 2.1 Cd与活性氧 |
| 2.2 Cd与抗氧化系统 |
| 2.3 Cd与脂质过氧化 |
| 2.4 Cd与线粒体损伤 |
| 2.5 Cd与 DNA损伤 |
| 2.6 Cd与细胞周期 |
| 2.7 Cd与细胞凋亡 |
| 3 NAC的研究进展 |
| 4 本学位论文的研究内容及研究意义 |
| 第二章 镉对HTR-8/SVneo细胞活性及抗氧化系统的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 细胞系 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 细胞培养 |
| 1.2.2 细胞冻存与复苏 |
| 1.2.3 MTT实验检测细胞活性 |
| 1.2.4 光学显微镜观察细胞形态变化 |
| 1.2.5 流式细胞术检测细胞内ROS含量 |
| 1.2.6 SOD、CAT、GSH-Px活性及MDA含量检测 |
| 1.2.7 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 CdCl_2对HTR-8/SVneo细胞活性的影响 |
| 2.2 CdCl_2对HTR-8/SVneo细胞形态的影响 |
| 2.3 CdCl_2对HTR-8/SVneo细胞内ROS水平的影响 |
| 2.4 CdCl_2对HTR-8/SVneo细胞内抗氧化酶活性的影响 |
| 2.5 CdCl_2对HTR-8/SVneo细胞内脂质过氧化水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 第三章 镉通过氧化应激诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 细胞系 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 细胞培养 |
| 1.2.2 流式细胞术检测线粒体膜电位(ΔΨm) |
| 1.2.3 碱性彗星实验检测DNA损伤 |
| 1.2.4 免疫荧光检测γ-H2AX |
| 1.2.5 流式细胞术检测细胞周期分布 |
| 1.2.6 Hoechst33342染色 |
| 1.2.7 AO/EB染色 |
| 1.2.8 Annexin-V FITC/PI双染检测细胞凋亡率 |
| 1.2.9 琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化 |
| 1.2.10 Western blot检测蛋白表达水平 |
| 1.2.11 透射电子显微镜观察细胞超微结构变化 |
| 1.2.12 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 CdCl_2引起HTR-8/SVneo细胞线粒体损伤 |
| 2.2 CdCl_2引起HTR-8/SVneo细胞DNA损伤 |
| 2.3 CdCl_2引起HTR-8/SVneo细胞周期阻滞于G0/G1期 |
| 2.4 CdCl_2诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡形态学检测 |
| 2.5 CdCl_2诱导HTR-8/SVneo细胞凋亡 |
| 3 讨论 |
| 第四章 镉特异性诱导小鼠胎盘中滋养层细胞发生氧化损伤 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 主要仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 动物染毒及取材 |
| 1.2.2 石蜡切片及HE染色 |
| 1.2.3 免疫荧光 |
| 1.2.4 数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 CdCl_2降低小鼠胎盘质量和直径 |
| 2.2 CdCl_2引起小鼠胎盘组织病理学损伤 |
| 2.3 CdCl_2引起小鼠胎盘中滋养层细胞DNA损伤 |
| 2.4 CdCl_2引起小鼠胎盘中滋养层细胞凋亡 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（7）重金属Cd2+扰动克氏原螯虾proPO-AS活性的毒性通路研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 水环境重金属污染现状及危害 |
| 1.1.1 水环境重金属污染现状 |
| 1.1.2 水环境重金属污染的危害 |
| 1.2 水生甲壳动物的免疫机制 |
| 1.3 毒性通路研究进展 |
| 1.3.1 重金属与氧化损伤 |
| 1.3.2 重金属的免疫毒性 |
| 1.3.3 p38 MAPK、Nrf2与NF-κB信号通路 |
| 1.4 内源性硫化氢研究进展 |
| 1.5 研究的目的与技术路线 |
| 1.5.1 研究的背景、目的与意义 |
| 1.5.2 实验方案与研究路线 |
| 第二章 重金属Cd~(2+)对克氏原螯虾毒性信号通路的影响 |
| 2.1 实验材料和仪器 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 实验仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 主要试剂的配制 |
| 2.2.2 染毒方法 |
| 2.2.3 样品采集与处理 |
| 2.2.4 氧化应激指标的测定 |
| 2.2.5 肝胰腺组织H.E.染色 |
| 2.2.6 肝胰腺组织NF-κB p65 表达的检测 |
| 2.2.7 肝胰腺组织Nrf2 表达的检测 |
| 2.2.8 肝胰腺组织p38 MAPK及磷酸化表达的检测 |
| 2.2.9 统计与分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 Cd~(2+)对ROS含量的影响 |
| 2.3.2 组织切片病理观察 |
| 2.3.3 肝胰腺组织p38 MAPK与磷酸化(p-p38 MAPK)的表达 |
| 2.3.4 肝胰腺组织NF-κB p65 的表达 |
| 2.3.5 肝胰腺组织Nrf2 的表达 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 Cd~(2+)对ROS含量以及肝胰腺病理损伤的影响 |
| 2.4.2 重金属Cd~(2+)胁迫对肝胰腺组织p38 MAPK与磷酸化表达的影响 |
| 2.4.3 重金属Cd~(2+)胁迫对肝胰腺组织核转录因子表达的影响 |
| 第三章 重金属Cd~(2+)对克氏原螯虾酚氧化酶原系统活性的影响 |
| 3.1 实验材料和仪器 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验试剂 |
| 3.1.3 实验仪器 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 主要试剂的配制 |
| 3.2.2 染毒方法 |
| 3.2.3 样品采集与处理 |
| 3.2.4 血淋巴细胞计数 |
| 3.2.5 酚氧化酶原激活系统活性的测定 |
| 3.2.6 统计与分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 Cd~(2+)对克氏原螯虾血细胞总数的影响 |
| 3.3.2 Cd~(2+)对克氏原螯虾酚氧化酶原系统活性的影响 |
| 3.4 讨论与结论 |
| 第四章 重金属Cd~(2+)对克氏原螯虾内源性硫化氢的影响 |
| 4.1 实验材料和仪器 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验试剂 |
| 4.1.3 实验仪器 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 样品采集与处理 |
| 4.2.2 肝胰腺组织CBS的免疫组化分析 |
| 4.2.3 内源性硫化氢水平的检测 |
| 4.2.4 统计与分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 Cd~(2+)对肝胰腺组织CBS表达的影响 |
| 4.3.2 Cd~(2+)对内源性硫化氢水平的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 总结 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简况及联系方式 |
（8）氯化镉对大鼠免疫毒性及Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英汉缩略词对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 亚慢性镉暴露对SD大鼠的免疫毒性效应 |
| 引言 |
| 1 材料及方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 第二部分 镉暴露对Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡的影响 |
| 引言 |
| 1 材料及方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及获得的科研成果 |
（9）十溴二苯乙烷和镉复合作用对蚯蚓的毒性效应（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 我国土壤污染现状 |
| 1.2 溴化阻燃剂的使用 |
| 1.3 DBDPE研究现状 |
| 1.3.1 DBDPE环境存在量及行为 |
| 1.3.2 DBDPE的毒性效应及机制 |
| 1.4 土壤重金属污染概述 |
| 1.4.1 镉的性质 |
| 1.4.2 镉污染的来源 |
| 1.4.3 镉污染的现状 |
| 1.4.4 镉的毒性效应 |
| 1.4.5 降低镉危害的研究进展 |
| 1.5 土壤环境复合污染 |
| 1.5.1 复合污染的研究现状 |
| 1.5.2 无机物复合污染 |
| 1.5.3 有机物复合污染 |
| 1.5.4 有机-无机复合污染 |
| 1.6 蚯蚓生态毒理学 |
| 1.7 本研究的目的和意义 |
| 1.8 本研究的内容 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 供试动物 |
| 2.2 供试试剂 |
| 2.3 仪器设备 |
| 2.4 试验方案 |
| 2.4.1 土壤配制 |
| 2.4.2 染毒方法 |
| 2.5 测定方法 |
| 2.5.1 酶液的制备 |
| 2.5.2 酶源中的可溶性蛋白质含量测定 |
| 2.5.3 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 |
| 2.5.4 过氧化物酶(POD)活性测定 |
| 2.5.5 过氧化氢酶(CAT)活性测定 |
| 2.5.6 谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性测定 |
| 2.5.7 丙二醛(MDA)含量测定 |
| 2.5.8 活性氧(ROS)含量测定 |
| 2.5.9 蚯蚓体腔细胞DNA损伤的测定 |
| 2.6 数据统计分析方法 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内SOD活性的影响 |
| 3.1.1 DBDPE对蚯蚓体内SOD活性的影响 |
| 3.1.2 DBDPE和 Cd复合作用对蚯蚓体内SOD活性的影响 |
| 3.2 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内CAT活性的影响 |
| 3.2.1 DBDPE对蚯蚓体内CAT活性的影响 |
| 3.2.2 DBDPE和 Cd复合作用对蚯蚓体内CAT活性的影响 |
| 3.3 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内POD活性的影响 |
| 3.3.1 DBDPE对蚯蚓体内POD活性的影响 |
| 3.3.2 DBDPE和 Cd复合作用对蚯蚓体内POD活性的影响 |
| 3.4 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内GST活性的影响 |
| 3.4.1 DBDPE对蚯蚓体内GST活性的影响 |
| 3.4.2 DBDPE和 Cd复合作用对蚯蚓体内GST活性的影响 |
| 3.5 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内MDA含量的影响 |
| 3.5.1 DBDPE对蚯蚓体内MDA含量的影响 |
| 3.5.2 DBDPE和 Cd复合作用对蚯蚓体内MDA含量的影响 |
| 3.6 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内ROS含量的影响 |
| 3.6.1 DBDPE对蚯蚓体内ROS含量的影响 |
| 3.6.2 DBDPE和 Cd复合作用对蚯蚓体内ROS含量的影响 |
| 3.7 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体腔细胞DNA损伤程度的影响 |
| 3.7.1 DBDPE彗星实验图像 |
| 3.7.2 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体腔细胞DNA损伤(OTM)的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓的氧化损伤效应 |
| 4.1.1 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内ROS含量的影响 |
| 4.1.2 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内抗氧化酶系的影响 |
| 4.1.3 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内GST活性的影响 |
| 4.1.4 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓体内MDA含量的影响 |
| 4.2 DBDPE单一和DBDPE/Cd复合作用对蚯蚓DNA的损伤效应 |
| 5 结论 |
| 6 创新点与不足之处 |
| 6.1 创新点 |
| 6.2 不足之处 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（10）镉胁迫下不同倍性鲫的抗逆性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 环境污染现状及影响 |
| 1.2 重金属对生物体的毒害作用 |
| 1.2.1 重金属毒性大小的影响因素 |
| 1.2.2 生物体对重金属的吸收与富集 |
| 1.2.3 重金属对生物体的毒害作用 |
| 1.3 镉污染及生物抗镉胁迫研究 |
| 1.3.1 镉的污染现状 |
| 1.3.2 镉的毒害作用 |
| 1.4 湘云鲫2号生物学特性 |
| 1.5 本研究的目的与意义 |
| 第二章 镉胁迫下不同倍性鲫的胚胎急性毒理实验 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验试剂与仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 急性毒理预实验 |
| 2.3.2 急性毒理实验 |
| 2.3.3 胶膜和胚体中重金属含量测定 |
| 2.4 实验结果与分析 |
| 2.4.1 Cd~(2+)对不同倍性鲫胚胎死亡率的影响 |
| 2.4.2 Cd~(2+)对不同倍性鲫胚胎发育的影响 |
| 2.4.3 胶膜、胚体镉含量的测定 |
| 2.5 小结与讨论 |
| 第三章 镉胁迫下不同倍性鲫的仔鱼急性毒理实验 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验试剂与仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.4 实验结果 |
| 3.4.1 Cd~(2+)对不同倍性鲫仔鱼死亡率的影响 |
| 3.4.2 仔鱼中的镉含量测定 |
| 3.5 小结与讨论 |
| 第四章 镉胁迫下不同倍性鲫的成鱼急性毒理实验 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.2 实验试剂与仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 不同倍性鲫成鱼的急性毒理实验 |
| 4.3.2 石蜡切片 |
| 4.4 实验结果与分析 |
| 4.4.1 3CdSO_4·8H_2O对不同倍性鲫成鱼死亡率的影响 |
| 4.4.2 各组织中的镉含量积累 |
| 4.4.3 镉胁迫下不同倍性鲫肝胰脏和肾脏的组织学观察 |
| 4.5 小结与讨论 |
| 第五章 PP2A和HSP在镉胁迫下不同倍性鲫肝胰脏和肾脏中的表达 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.2 实验试剂与仪器 |
| 5.3 实验方法 |
| 5.3.1 不同倍性鲫肝胰脏和肾脏总RNA的提取 |
| 5.3.2 cDNA第一条链的合成 |
| 5.3.3 RT-PCR所需引物设计 |
| 5.3.4 RT-PCR扩增反应体系及程序 |
| 5.4 实验结果与分析 |
| 5.4.1 PP2A在镉胁迫下不同倍性鲫肝胰脏和肾脏中mRNA水平的表达 |
| 5.4.2 HSP在镉胁迫下不同倍性鲫肝胰脏和肾脏中mRNA水平的表达 |
| 5.5 小结与讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
四、镉对机体毒性作用机制国内研究进展（论文参考文献）
- [1]蛆症异蚤蝇Megaselia scalaris对重金属镉的毒性反应和解毒机制研究[D]. 褚梦颖. 沈阳大学, 2021(06)
- [2]环境内分泌干扰物—硫酸镍诱导大鼠甲状腺和胰腺组织、细胞凋亡的机制探讨[D]. 刘亚红. 兰州大学, 2020(04)
- [3]镉在克氏原鳌虾中的蓄积及对其p38 MAPK基因表达的影响研究[D]. 水雅慧. 武汉纺织大学, 2020(02)
- [4]钙补充拮抗膳食镉暴露致骨毒作用的研究[D]. 黄晓. 东南大学, 2019(01)
- [5]镉胁迫对拟水狼蛛生长发育及抗寒性的影响研究[D]. 卓俊哲. 湖南农业大学, 2019(01)
- [6]镉胁迫引起胎盘滋养层细胞氧化损伤的机制研究[D]. 李向阳. 山西大学, 2019(01)
- [7]重金属Cd2+扰动克氏原螯虾proPO-AS活性的毒性通路研究[D]. 宋昌霞. 山西大学, 2019(01)
- [8]氯化镉对大鼠免疫毒性及Th1/Th2/Th17/Treg细胞平衡影响的研究[D]. 李有幸. 右江民族医学院, 2019(01)
- [9]十溴二苯乙烷和镉复合作用对蚯蚓的毒性效应[D]. 孙良琦. 山东农业大学, 2019(01)
- [10]镉胁迫下不同倍性鲫的抗逆性研究[D]. 桂赛玉. 湖南师范大学, 2017(01)