一、辣椒雄性不育两用系的特点及应用价值（论文文献综述）
张锐,尚伟,许旭明[1]（2020）在《辣椒雄性不育的选育及利用研究进展》文中指出雄性不育是辣椒育种中的重要表型性状,在试验研究和商业杂交种生产上得到了广泛应用。利用雄性不育制种可简化制种工序、降低制种成本、提高杂交种子纯度,增强杂交种市场竞争力,是辣椒育种发展的主要趋势。本研究概括了中国辣椒雄性不育的研究现状,从已被利用的雄性不育遗传类型及在杂种优势上的应用、小孢子败育机理、育性与生理生化、育性连锁标记的开发、基因克隆与表达等方面分析了雄性不育的败育机制,提出了当前辣椒雄性不育研究存在的问题及相应对策,旨在为相关辣椒育种研究者提供参考。
王永琦[2]（2020）在《西瓜核雄性不育两用系Se18不育特性的生理生化与分子机制研究》文中指出西瓜[Citrullus lanatus（Thunb.）Matsum.&Nakai]是异花授粉植物,具有明显的杂种优势,利用雄性不育系配制杂交种是西瓜杂种优势利用的重要途径。西瓜细胞核雄性不育两用系‘Se18’是本课题组发现的核基因雄性不育材料,其不育性状十分稳定。本研究以西瓜细胞核雄性不育两用系‘Se18’为材料,对其花药败育时期的细胞学特征进行观察比较;并通过比较不育株与可育株雄花花蕾发育过程中抗氧化酶活性、氧化物质代谢、内源激素含量等生理生化指标的变化,以探明雄性不育发生过程中生理生化特性;同时,结合BSA（Bulked Segregant Analysis,BSA）和RNA-Seq技术对不育株与可育株雄花蕾进行转录组测序,系统分析DEGs的生物学功能,以及初步预测雄性不育基因的候选区域,并对候选区域内的基因进行功能注释,为探究西瓜雄性不育发生的分子机理奠定基础。主要研究结果如下:1.利用光学显微镜观察了西瓜不育和可育花药的发育过程,发现不育花药败育时期发生在小孢子母细胞减数分裂末期。败育的原因可能是由于绒毡层细胞发育异常,引起小孢子母细胞只进行核分裂,而未进行细胞质分裂,不能形成四分体,导致小孢子母细胞减数分裂异常,最终引发雄性不育。2.通过对西瓜不育和可育雄花蕾不同发育时期抗氧化酶活性、抗氧化物质含量及活性氧含量的测定,发现不育雄花蕾超氧化物歧化酶（SOD）活性在单—双核小孢子期和花粉粒成熟期均显着高于相应时期可育雄花蕾;过氧化物酶（POD）活性在各时期均显着高于相应时期可育雄花蕾;超氧阴离子（O2-·）、过氧化氢（H2O2）和丙二醛（MDA）含量也一直高于可育雄花蕾。而过氧化氢酶（CAT）活性、谷胱甘肽还原酶（GR）活性、抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性和抗坏血酸（AsA）含量、谷胱甘肽（GSH）含量变化与可育雄花蕾的变化趋势相比呈下降趋势。以上结果表明抗氧化酶活性的改变和抗氧化物质含量的降低以及活性氧含量升高可能与花药败育有关。3.通过对西瓜不育和可育雄花蕾不同发育时期物质含量的测定,发现不育雄花蕾在各发育时期的可溶性蛋白含量明显低于可育雄花蕾。随着花蕾的生长发育,不育雄花蕾的游离脯氨酸含量变化呈下降趋势,而可育雄花蕾的游离脯氨酸含量则迅速积累,含量显着高于不育雄花蕾。表明可溶性蛋白的缺乏和游离脯氨酸含量的减少可能与花药败育有关。4.利用酶联免疫法测定了西瓜植株叶片和不同发育时期花蕾中生长素（IAA）、脱落酸（ABA）、赤霉素（GA3）、玉米素核苷（ZR）、茉莉酸（JA）、油菜素内酯（BR）及异戊烯基腺嘌呤核苷（IPA）的动态变化,发现在花蕾不同发育时期,不育株和可育株内源激素含量变化趋势不同,且含量高低差异明显。在不育株系中不论是叶片还是花蕾,其IAA、ZR和BR含量都表现缺乏,而ABA和JA含量却高于可育株;同时,各激素间的平衡关系也被打破。表明内源激素含量的异常及各激素间比例的失衡可能与花药败育有关。5.采用Illumina HiSeqTM 2500平台对不育株与可育株雄花蕾进行转录组测序,共得到43.27Gb的高质量数据。有2507个差异表达基因,其中593个为上调表达,1914个为下调表达。在差异表达基因中有2443个基因获得注释。GO分析结果显示这些差异表达基因涉及到了信号传递、生物调节、生殖生育、物质代谢、转录因子和蛋白合成等过程。在KEGG分析中,451个差异表达基因映射到95个不同的通路中,分析结果显示氮代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等代谢途径被显着富集。该研究结果为阐明西瓜核雄性不育的分子机制和调控基因鉴定提供了参考。6.通过BSR-Seq（Bulked segregant RNA-Seq）方法,选取不育与可育雄花蕾分别构建混池,利用ED算法和关联分析,初步将不育基因定位在Chr5和Chr9染色体上的2个区域内,总长度10.71Mb,差异表达的基因112个,其中20个基因上调表达,92个基因下调表达。GO分析结果显示候选区域内的基因涉及到了信号传递、物质代谢、转录因子和蛋白合成等过程。在KEGG分析中,候选区域内的14个基因映射到19个不同的通路中,分析结果显示二萜类生物合成、光合生物的固碳作用、精氨酸和脯氨酸代谢以及丙酮酸代谢等代谢途径被显着富集。在COG分析中,有36个基因映射到16个功能类别中,分析结果显示候选区域内的基因涉及到了信号传导机制、碳水化合物的运输与代谢、氨基酸转运与代谢等功能。以上研究结果为下一步西瓜雄性不育相关基因的精细定位奠定了基础。
侯杰[3]（2017）在《两个辣椒雄性不育系败育机理及育性稳定特性研究》文中认为以辣椒雄性不育系O-9、O-6及其相应保持系为研究材料,利用田间试验结合实验室分析,从植物形态学、生理生化、细胞学等方面对辣椒雄性不育性及其机理进行了研究。对不同育性材料的植株形态以及花器官性状测量比较;测定了不育系和保持系的花粉活力以及单个花药的花粉量;对试材进行分5期播种,测定了过氧化物酶活性、可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶活性、游离脯氨酸、丙二醛含量随着花蕾发育的动态变化;利用石蜡切片法,从细胞学角度研究了供试材料小孢子的发育过程。主要结果如下:1.雄性不育材料花药皱缩,雄蕊明显高于雌蕊,花粉极少或无花粉;而其相应保持系花药发育良好,雄蕊与雌蕊近乎平齐,花粉量大。2.细胞学观察结果显示,不育材料在四分体时期发生小孢子败育现象,其原因是绒毡层细胞高度液泡化,挤压致四分体破裂进而导致降解,无花粉粒产生;在单核小孢子时期,会出现其内部细胞质被降解现象。3.不育材料随着花蕾的发育可溶性糖含量、可溶性蛋白含量均低于保持系,可溶性糖含量最高时期保持系比两不育系材料分别高22%、43%,可溶性蛋白含量最高时期保持系比两不育系材料分别高45%、55%;游离脯氨酸含量在不育材料花蕾发育过程中逐渐降低,在花粉粒成熟期分别为73.41μg/g和62.29μg/g,其相应保持系则迅速积累,含量为339.25μg/g;过氧化物酶活性比其相应保持系活性低;超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量均高于保持系,丙二醛含量雄性不育材料比保持系分别高25%、66%。4.不同播期雄性不育材料花蕾发育过程中,可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、过氧化物酶活性各生理生化指标,在不同播期间有所变化但无显着性差异。5.O-6、O-9雄性不育材料育性稳定。
李超[4]（2016）在《咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育性研究》文中认为辣椒是我国重要蔬菜之一,具有明显的杂种优势,与人工杂交种制种相比,利用化学杀雄剂生产辣椒杂交种具有明显的优势。本试验选用咪唑乙烟酸作为化学杀雄剂,以辣椒材料P70为试验对象来研究对辣椒的化学杀雄效果。同时,通过细胞学和分子学实验研究咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育的机理,获得以下结果:1.浓度为15 mg/L的咪唑乙烟酸对辣椒的化学杀雄效果最好,在这个浓度下辣椒花药可以表现出完全的雄性不育性而且植株药害相对较小,对辣椒的坐果和结实影响较小。2.通过压片和石蜡切片观察,发现咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育发生在小孢子母细胞时期。在小孢子母细胞时期,对照组花药内绒毡层细胞发生降解,为小孢子母细胞的生长发育提供营养;而处理组花药内绒毡层不发生降解,导致小孢子母细胞得不到足够的营养,从而不能减数分裂形成四分体结构,以致最终降解引起雄性不育。此外,咪唑乙烟酸还可以引起辣椒花药中细胞分化分裂异常以及外绒毡层会发生延迟降解,进一步加剧了雄性不育的发生。3.通过电镜切片观察,我们发现在与处理组花药相比,对照组花药中,内绒毡层细胞中有自噬活动,从而导致细胞自噬性死亡。在小孢子母细胞时期,处理组花药中的小孢子开始降解,表现出外形畸形、四周胼胝质含量少、细胞核降解以及细胞器缺失;而对照组花药中,小孢子外形圆满、四周胼胝质含量多以及细胞核完整。在四分体时期,对照组花药中小孢子母细胞减数分裂形成四分体,而处理组花药中小孢子母细胞不能形成四分体结构而完全降解,细胞核和细胞里面各种细胞器降解粘连在一起,最终导致雄性不育。4.在对与自噬相关的基因ATG8s以及与细胞壁降解相关的的基因Pec做表达分析时发现,小孢子母细胞时期基因ATG8a、ATG8e和Pec在对照组中的表达要比处理组中的要高,这与在这一时期处理组花药中内绒毡层细胞出现自噬活动与降解密切相关;而ATG8b、ATG8c和ATG8d在处理组花药中的表达较高可能与小孢子母细胞中的自噬活动有关;基因EMS,CLV1和BAM1的表达异常可能与小孢子和绒毡层的发育异常有关。
靳艳革,岳振平,顾桂兰[5]（2013）在《辣椒常用育种方法研究进展初探》文中进行了进一步梳理介绍了辣椒育种中常用的几种育种方法,以及这几种方法在实际生产中的利用情况。
袁稳[6]（2012）在《辣椒细胞质雄性不育相关基因的克隆及表达研究》文中研究说明辣椒（Capsicum annuum L.）原产中南美洲,是一种世界性的蔬菜和加工调味品,据农业部统计,从2000年起全国每年栽培面积在140万公顷左右,是我国第二大蔬菜作物。作为常异花授粉植物,辣椒的杂种优势极为显着,F1代杂交品种在生产上已得到广泛应用。辣椒细胞质雄性不育系是杂种优势利用的基础和重要途径,是当今世界辣椒育种的主攻方向。为了更好地利用辣椒细胞质雄性不育系进行杂种优势育种,进一步阐述和丰富辣椒细胞质雄性不育的相关机理,本文以辣椒细胞质雄性不育系21A及其相应的保持系21B为材料,采用CTAB法提取基因组DNA,采用蔗糖沉淀与差速离心相结合的方法提取线粒体DNA,运用SRAP分子标记技术研究和分析辣椒细胞质雄性不育系和保持系DNA差异,寻找与辣椒细胞质雄性不育相关的分子标记,利用实时荧光定量PCR技术对找到的不育相关特异片段的表达情况进行了研究,主要研究结果如下：1.辣椒细胞质雄性不育系及其保持系基因组DNA-SRAP分子标记研究利用SRAP分子标记技术对辣椒细胞质雄性不育系21A及其相应保持系21B的基因组DNA进行比较分析,64对SRAP引物组合共扩增获得了1792条从100bp-1000bp大小不同的条带,平均每对引物组合扩增出28条清晰的条带,共检测到4个多态性位点,其中不育系材料中2个,将差异片段进行回收、克隆测序,特异片段Me7Em4-280和Me2Em7-230序列全长分别为283bp和236bp,经NCBI数据库比对分析表明,Me7Em4-280核苷酸序列与多种植物的NADH dehydrogenase subunit D （ndhD） gene具有较高的同源性,片段Me2Em7-230与Oryza sativa Indica Group strain WA-CMS mitochondrion基因同源性为74%。根据差异片段序列特点设计特异SCAR引物,在不育系和保持系单株DNA中进行扩增验证,都仅在不育系中扩增出目的条带,从而推测本研究获得的两个SCAR标记很可能与细胞质雄性不育基因紧密连锁。2.辣椒细胞质雄性不育系及其保持系线粒体DNA-SRAP分子标记研究以辣椒细胞质雄性不育系21A及其保持系21B为材料,采用差速离心与蔗糖沉淀相结合的方法提取辣椒黄化苗线粒体DNA,进行SRAP分子标记,结果表明：（1）128对引物组合共扩增获得了3072条100-1000bp的条带,多态性位点仅有9个,占0.29%,其中7条多态性条带位于21A中。（2）对多态性条带回收、克隆和测序,分析比对后发现,9个克隆在Genbank中找到了相似的功能,绝大部分与能量代谢有关。（3）根据21A中的多态性序列特点设计特异SCAR引物,在21A和21B的单株基因组DNA中进行扩增验证,4对引物在21A中扩增出目的条带,表明已成功地将SRAP标记转化为SCAR标记,是新发现的与辣椒细胞质雄性不育基因相关的片段。3.辣椒细胞质雄性不育相关基因的表达分析实时荧光定量PCR （qRT-PCR）技术作为一种精确的基因表达分析技术而广泛应用于多种植物的表达研究中。本文利用荧光定量PCR技术对从辣椒细胞质雄性不育系21A线粒体DNA分离出的与不育性状相关的基因CMS721在不同组织中的表达情况进行了分析。结果表明：该基因只在不育系中表达,并且在所检测的组织中均有表达,但表达量差异很大,基因表达量在中花蕾时期迅速下降,推测该基因控制辣椒花药中与能量代谢相关的蛋白的表达,中花蕾时期表达量减少,能量代谢异常,引起小孢子发育障碍,最终导致雄性不育。这些研究结果为进一步深入探讨辣椒细胞质雄性不育的分子机理奠定了基础。
吴国平[7]（2012）在《甜椒CMS育性相关基因的分子标记筛选与应用》文中指出辣椒（Capsicum annuum L.）是中国第二大蔬菜作物,栽培面积仅次于大白菜。辣椒作为常异花授粉作物,具有很强的杂种优势,优良一代杂种比常规种一般能够增产30%-50%。利用辣椒细胞质雄性不育系生产一代杂交种,可以省去人工去雄手续,简化制种程序,提高种子纯度等。辣椒细胞质雄性不育的研究一直受国内外广泛重视,利用细胞质雄性不育配制杂交种也成为了当今世界甜辣椒育种的热点。本研究以甜椒胞质雄性不育恢复系5-2R1和相应的保持系5-2为试材,利用SRAP、SCAR标记技术,以期筛选与甜椒CMS恢复基因相关的SRAP标记以及SCAR标记,利用SCAR特异引物对多份甜辣椒材料进行恢复基因验证,并对含有恢复基因的材料进行田间育性恢复调查;结合SRAP分子标记技术,比较分析甜椒细胞质雄性不育系CMST6A及其相应的保持系T6B的基因组差异,筛选与甜椒不育基因相关的特异片段。主要研究结果如下：1.甜椒胞质雄性不育恢复基因的SRAP及SCAR标记分析以甜椒胞质雄性不育恢复系5-2R1和相应的保持系5-2为试材,利用SRAP分子标记技术筛选与甜椒恢复基因相关的分子标记。128对SRAP引物组合共扩增获得了3796条从100bp至800bp大小不同的条带,平均每对引物组合可扩增出30条清晰的条带,共检测到4个多态性位点,其中恢复系材料仅有1个。对该特异片段进行回收、克隆和测序,结果表明该片段全长为259bp。经BLAST比对分析表明,该片段与烟草线粒体中的NADH脱氢酶第5亚基（GenBank:EF151914.1）具有81%的同源性；同时,该片段与辣椒BAC克隆PEPBAC158K24（GenBank:FJ597540.1）的部分序列高度同源。根据序列特点设计特异SCAR220引物,对恢复系和保持系进行扩增验证,仅在恢复系中扩增出目的条带,表明已成功地将此SRAP标记转化为简单、稳定的SCAR标记。我们推测本研究获得的SCAR220标记可能与胞质雄性不育恢复基因相关。2.甜椒恢复基因SCAR220标记的应用本文采用SCAR220标记对国内外引进的96份辣椒材料和34份甜椒材料进行分析,其中在32份甜（辣）椒材料中扩增出了220bp大小的特异条带。以上述130份甜（辣）椒材料和辣椒细胞质雄性不育系21A以及辽A为试材进行杂交,并对其杂交后代的育性进行田间鉴定。结果表明,96份辣椒材料中,有21份检测到了特异条带,但是仅有6份具有育性恢复能力,其中4份材料得到了SCAR220标记验证；14份转育的甜椒恢复系材料中,有8份检测到了特异条带；另外20份甜椒材料中,有3份材料扩增出了特异条带,但是仅有1份具有育性恢复能力,并且得到了SCAR220标记验证。说明恢复基因SCAR220标记具有一定的稳定性,可用作甜椒恢复系早期筛选手段之一。3.甜椒细胞质雄性不育基因的SRAP标记旨在筛选出甜椒细胞质雄性不育基因连锁的SRAP标记,为进一步深入研究甜椒细胞质雄性不育的分子机制奠定基础。本研究以甜椒细胞质雄性不育系CMST6A和相应的保持系T6B为试材,利用SRAP分子标记技术,筛选与甜椒雄性不育基因相关的特异片段。对特异片段进行回收、克隆和测序,并用blastn和blastx程序在NCBI数据库中进行同源性检索和相似性比对。128对SRAP引物组合共扩增获得了3844条100～1000bp的条带,平均每对引物组合可扩增出31条清晰的条带,共检测到3个多态性位点,其中不育系中仅有一个多态性条带,命名为CMS T6A201.用blastn程序进行核苷酸同源序列比较,此片段与Ty3-gypsy类逆转座子的部分序列高度同源；用blastx程序与蛋白质数据库进行同源性比对,由该片段推测的氨基酸序列与水稻假拟Ty3-gypsy逆转座子蛋白、蒺藜苜蓿的反转录酶、水稻gag-pol蛋白以及马铃薯的假拟gag-pol蛋白等相似性较高。由此推测,甜椒细胞质雄性不育系特异片段CMS T6A201的功能可能与逆转座子有关。
杨高强[8]（2012）在《辣椒细胞核雄性不育育性相关基因分离克隆及其生物信息学分析》文中研究表明本研究以沈阳市农业科学院辣椒育种课题组的辣椒雄性不育两用系‘AB23’为材料,采用cDNA-AFLP技术,研究辣椒细胞核雄性不育两用系可育株和不育株的花器官发育过程中基因转录组表达差异,并克隆辣椒育性相关基因,对其进行信息学分析,将得到的育性相关基因进行了RT-PCR验证。主要结果如下：1.分别以可育株群花蕾和不育株群花蕾的cDNA为模板,选用128对E+2/M+3的选择性扩增引物进行AFLP分析,得到了21·条与辣椒细胞核雄性不育育性相关的TDFs,在NCBI的公共数据库中经Blastx或Blastn在线检索,16条可以找到较高同源性的序列,在其余的5条中,4个在NCBI中无同源序列,一条功能未知。这5个TDFs可能代表与辣椒育性相关的新基因；在16个有较高同源性的序列中,可育株群花蕾特异表达的15个,不育株群花蕾特异表达的1个。2.经Blast比对,CAF01与番茄花药绒毡层特异表达并编码富含甘氨酸蛋白的基因在核苷酸序列上同源性75%；CAF11与拟南芥果胶甲酯酶有76%的同源性；CAF12与拟南芥脂质转移蛋白也有76%的同源性,上述3个基因已被证明与植物的育性建成相关,说明CAF01、CAF11、CAF12可能是与辣椒育性相关的基因；CAS30与番薯衰老相关蛋白同源性86%,该基因片段在不育株群花蕾中特异表达,说明该基因可能是导致细胞核雄性不育的相关基因；CAF26编码的产物功能未知,CAF02、 CAF09. CAF15及CAS33经BlastX和Blastn检索没有同源系列,说明可能得到了与辣椒雄配子发育相关的新基因。3.获得的16个功能差异片段,涉及分泌（CAF01）、代谢（CAF05）、转录（CAF21）、细胞程序性死亡（CAS30）、蛋白质修饰（CAF16）、胞间运输（CAF07、CAF12）、信号转导（CAF08）、细胞黏附（CAF03）等多个相关过程。4.为进一步验证cDNA-AfLP结果的可靠性,对21个特意表达的TDF进行半定量RT-PCR分析。结果显示,在AFLP中,CAF01、CAF05、CAF11、CAF21,没有表达,但在RT-PCR验证中,都出现了弱带,但其表达趋势同AFLP相一致,可能与AFLP的染色方法有关,其它基因片段的验证结果与cDNA-AFLP结果一致。RT-PCR分析结果进一步证明了利用cDNA-AfLP筛选差异基因的可靠性。
张玲玲[9]（2012）在《辣椒细胞质雄性不育系FS1030A小孢子发生细胞学观察和败育时期花药差异蛋白质组分析》文中研究表明辣椒（capsicum annuum L）为常异花授粉作物，杂种一代优势明显。辣椒雄性不育系的发现和利用，不仅降低育种成本，提高育种效率，而且也提高种子纯度。特别是细胞质不育系（cytoplasmic male sterility, CMS）的利用，可以避免辣椒雄性不育两用系必须要拔除50%可育植株的缺点，直接应用于辣椒的“三系”配套育种，促进了辣椒杂种优势的利用。在辣椒CMS利用过程中，恢复系主要分布在羊角椒和线椒中，灯笼椒类型恢复基因很难筛选到，就造成一部分CMS由于找不到恢复系而限制了其在育种中的利用。因此，对辣椒雄性不育发生的机理研究，有利于找出辣椒育性恢复规律，对辣椒CMS利用有着重要意义。对辣椒CMS败育机理的研究已经从细胞学、生理生化、分子水平等方面在败育时期和方式、线粒体嵌合基因的发现、mRNA编辑等方面取得了许多研究成果。但是国内外关于辣椒雄性不育系与其保持系花药蛋白质组中差异蛋白的研究报道较少。本研究在透射电镜细胞学观察的基础上，确定辣椒细胞质不育系FS1030A败育发生时期，又以败育时期花蕾为材料，提取花药总蛋白质组，经纯化，除盐处理，利用2D-DIGE技术进行蛋白质分离，Decyder6.5（GE）软件对凝胶图谱进行分析，选取13个差异蛋白质点进行MALDI-TOF/TOF-MS质谱鉴定，Mascot软件检索ncbi-green plant蛋白质数据库进行蛋白质生物信息学分析，得到如下研究结果：（1）辣椒细胞质不育系FS1030A败育发生在四分体形成之前，花蕾外部形态表现为心叶半展开，花萼紧闭。在小孢子母细胞减数分裂时期，绒毡层细胞结构发生了两种异常变化：部分绒毡层细胞高度液泡化，径向过度伸长，后期生长为多层细胞，导致药室狭小，严重挤压小孢子母细胞致使其发育畸形，进而退化解体，不能形成正常的四分体小孢子，最终导致小孢子败育；部分绒毡层细胞过早解体，解体的绒毡层细胞与小孢子母细胞残迹在药室中形成了一条染色较深的带。绒毡层异化，中层不解体，不能为小孢子母细胞的进一步发育提供营养，从而造成花粉母细胞变形，降解，最终败育。（2）通过Decyder6.5（GE）软件分析，等电点在3～10范围内，可识别约1070个较为清晰的蛋白质点，共确定了13个差异表达蛋白质点，6个在FS1030A中上调表达，7个下调表达。采用MALDI-TOF/TOF-MS肽指纹图谱分析，并结合Mascot软件在ncbi-green plant数据库搜索，鉴定出的蛋白质分别是：β-1,4-N乙酰氨基葡萄糖基转移酶、推定组蛋白H3和组蛋白H1、组成胞液80S核糖体和60S大亚基的核糖体蛋白L31和60S核糖体蛋白L13a、MADS相似蛋白AGL1、Ran结合蛋白1b、pollenless3、蛋白成熟酶K（maturase K）、AS-ZmSLR蛋白、推定的叶绿体RNA加工蛋白、胚胎缺陷蛋白2746（EMB2746）和一个未知蛋白。它们参与了蛋白质的翻译后修饰、基因表达调控、配子体发育调控以及细胞分裂调控等生命过程，辣椒CMS FS1030A的败育可能可能与这些生命过程异常有关。
黄炜[10]（2012）在《辣椒核雄性不育两用系创制及其不育机理研究》文中研究指明辣椒（Capsicum annuum L.）是世界上主要的常异花授粉蔬菜作物之一，在熟性、产量、品质及抗病性等方面具有明显的杂种优势。目前我国辣椒杂交种已在生产上占据主要地位，大面积主推品种都是品种间或自交系间一代杂交种。这类杂交种子在生产上虽然增产潜力很大，但其制种时必须人工去雄，成本较高，而且由于辣椒生殖器官同花同位，种子纯度很难保证。目前国内外已将辣椒雄性不育成功应用在辣椒杂种优势育种及杂种一代种子生产之中，对于解决人工去雄以降低生产成本，提高种子纯度具有重要的推动作用。当前辣椒雄性不育应用中的一个关键问题是雄性不育源匮乏或其农艺性状难以改良，已选育的不育系母本遗传背景大多数基本一致，这些都不利于辣椒杂种优势的进一步充分发挥利用。本研究针对这一辣椒育种中出现的瓶颈，自2002年以来利用远缘杂交结合人工诱变技术创制了MS4辣椒雄性不育种质资源，在明确其遗传规律的基础上选育出HW58AB雄性不育两用系，并对其主要农艺性状、细胞学、生理生化和分子生物学等方面进行研究，从而探索该辣椒核雄性不育两用系的不育机理，为进一步更好地利用这一新不育源奠定基础。主要研究结果如下：1.利用辣椒3个栽培种C. annuum、C. chinense、C. peruvianum远缘杂交结合人工诱变技术创制的MS4不育株花药干瘪皱缩，花粉量极少甚至无花粉，花粉无生活力，雌蕊具有正常的发育和异交授粉受精能力，不育性状典型，具有一定的研究和利用价值。通过对MS4株系内成对兄妹交和父本自交，结果表明若F1代植株为全可育，F2代群体中可育与不育性状分离符合3:1分离比例；若F1代植株育性发生分离，则不育与可育性状分离符合1:1分离比例。因此认为该不育源不育基因对可育基因为隐性，且仅受单基因控制。通过MS4株系中不育株与6个高世代自交系间成对杂交、自交及测交结果分析表明：F1代表现均为全可育，未在供试自交系中发现保持系。因此MS4株系中出现的不育性状为细胞核单基因控制的隐性质量性状。2.采用株系内固定单株进行成对兄妹交，同时结合主要农艺性状选择，经多代选育获得辣椒核雄性不育两用系HW58AB。该两用系雄性不育性状典型，花粉败育彻底，不育度高，育性受环境影响较小，不育性状稳定，果实圆锥形，抗辣椒疫病。本研究还利用二环系法将其不育性状转育至甜椒自交系CK15中，为进一步深入研究辣椒雄性不育机理及杂种优势利用奠定育种材料基础。3.利用石蜡切片和电镜技术对小孢子细胞学观察表明辣椒核雄性不育两用系HW58AB小孢子败育发生在小孢子母细胞末期，即四分体形成之前，部分绒毡层细胞过度膨大，液泡化现象严重，导致在药室内腔挤压小孢子母细胞破裂解体。在四分体时期，绒毡层细胞液泡化加剧膨大侵占了小孢子母细胞空间，不育株小孢子母细胞受绒毡层严重挤压解体自溶，并与绒毡层粘连在一起形成深着色带。不育株小孢子母细胞不能完成减数分裂，不能形成正常的四分体。4.利用酶联免疫检测技术研究不育株和可育株花蕾在小孢子不同发育时期内源激素含量的动态变化及激素平衡关系。结果表明：两用系中不育株花蕾组织中IAA、ZRs、GA3含量在小孢子发育的大部分时期均低于可育株，而不育株花蕾中ABA含量在小孢子发育各个时期均显着高于可育株。不育株花蕾ZRs/GA3均高于可育株，而IAA/ABA、ZRs/ABA、GA3/ABA均低于可育株，这说明辣椒花蕾发育过程中不育系中的内源激素的平衡关系发生了变化，ABA与IAA之间存在着相互拮抗的作用，IAA、ZRs及GA3供给失调导致雄性不育。5.利用cDNA-AFLP技术研究了辣椒核雄性不育两用系HW58AB不育株和可育株蕾期基因表达差异，共获得了93条阳性差异表达片段。经序列比对发现这些差异片段分别属于细胞壁合成及跨膜运输、电子传递与能量调控、防卫与胁迫反应、细胞周期、生理生化代谢、核酸代谢、信号传导、转录调控、未知或假定蛋白等，其中53条TDFs无同源基因功能或为假定蛋白，可能为新基因。在37条育性表达差异的TDFs中，27条在可育株花蕾中特异表达，其余10条在不育株花蕾中特异表达，不育株特有的差异片段数明显少于可育株，这可能是由于某些基因的沉默或特异表达导致不育株小孢子在发育途中败育，而可育株小孢子继续正常发育。6.通过半定量RT-PCR技术对小孢子发育过程中有代表性的差异片段时空表达模式进行分析，结果表明：分别与果胶裂解酶基因、酰基辅酶A合成酶、精氨酸脱羧酶基因高度同源的差异片段在可育株花蕾发育过程中特异表达或表达量很高，而与过氧化物酶基因、脯氨酸氧化脱氢酶基因高度同源的差异片段在不育株花蕾发育过程中特异表达或表达量很高。结合两用系小孢子发育过程中蕾期IAA含量、过氧化物酶活性和游离氨基酸含量的分析，说明不育株小孢子败育与胞间连丝或胞质通道形成受阻，多胺等信号物质合成不足，过氧化物酶过量表达引起的IAA亏缺，以及脯氨酸大量降解引起的细胞膜系统完整性受到破坏密切相关。
二、辣椒雄性不育两用系的特点及应用价值（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、辣椒雄性不育两用系的特点及应用价值（论文提纲范文）
（1）辣椒雄性不育的选育及利用研究进展（论文提纲范文）
| 1 辣椒雄性不育选育及在杂种优势上的应用 |
| 1.1 核不育型(GMS)选育及在杂种优势上的应用 |
| 1.2 质核互作型(CMS)选育及在杂种优势上的应用 |
| 1.2.1 不育系和保持系的选育 |
| 1.2.2 恢复系的选育 |
| 1.2.3 质核互作不育型在杂种优势的应用 |
| 2 小孢子发育的细胞学 |
| 3 辣椒雄性不育的生理生化 |
| 4 辣椒雄性不育与内源激素 |
| 5 辣椒雄性不育的分子生物学 |
| 5.1 不育基因(片段)与保持基因(片段)定位及连锁标记的开发 |
| 5.1.1 核不育基因的定位与连锁标记的开发 |
| 5.1.2 胞质不育基因(片段)连锁标记的开发与应用 |
| 5.2 恢复基因定位及连锁标记的开发 |
| 5.3 基因克隆及表达 |
| 6 展望 |
（2）西瓜核雄性不育两用系Se18不育特性的生理生化与分子机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物雄性不育的研究概况 |
| 1.1.1 植物雄性不育的起源 |
| 1.1.2 植物雄性不育的类型 |
| 1.1.3 植物雄性不育的遗传 |
| 1.1.4 花粉发育与雄性不育形成机制 |
| 1.2 植物雄性不育的生理生化研究进展 |
| 1.2.1 雄性不育与物质代谢 |
| 1.2.2 雄性不育与能量代谢 |
| 1.2.3 雄性不育与活性氧代谢 |
| 1.2.4 雄性不育与内源激素 |
| 1.3 植物雄性不育相关基因研究进展 |
| 1.3.1 植物细胞核雄性不育相关基因 |
| 1.3.2 拟南芥花药和花粉发育相关基因 |
| 1.4 植物雄性不育的转录组分析 |
| 1.4.1 转录组测序技术的发展 |
| 1.4.2 RNA-seq技术测序流程 |
| 1.4.3 RNA-seq技术在植物雄性不育研究中的应用 |
| 1.5 西瓜雄性不育的研究与利用 |
| 1.5.1 西瓜雄性不育的类型及遗传研究 |
| 1.5.2 西瓜雄性不育的研究与利用 |
| 1.6 本研究的目的、意义和内容 |
| 1.6.1 研究目的意义 |
| 1.6.2 研究内容 |
| 第二章 西瓜细胞核雄性不育系的细胞学研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 不育株与可育株花的形态特征 |
| 2.2.2 可育株花药发育过程 |
| 2.2.3 不育株花药发育过程 |
| 2.3 讨论与结论 |
| 第三章 西瓜细胞核雄性不育与膜脂过氧化的关系 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 取样 |
| 3.1.3 测定项目与方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 花蕾抗氧化酶活性的变化 |
| 3.2.2 花蕾抗氧化物质含量的变化 |
| 3.2.3 花蕾活性氧含量的变化 |
| 3.3 讨论与结论 |
| 3.3.1 雄性不育与抗氧化酶活性的关系 |
| 3.3.2 雄性不育与抗氧化物质含量的关系 |
| 3.3.3 雄性不育与活性氧含量的关系 |
| 第四章 西瓜细胞核雄性不育与物质代谢的关系 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 取样 |
| 4.1.3 测定项目与方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 花蕾可溶性蛋白含量的变化 |
| 4.2.2 花蕾游离脯氨酸含量的变化 |
| 4.3 讨论与结论 |
| 4.3.1 雄性不育与可溶性蛋白含量的关系 |
| 4.3.2 雄性不育与游离脯氨酸含量的关系 |
| 第五章 西瓜细胞核雄性不育与内源激素的关系 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试验材料 |
| 5.1.2 取样 |
| 5.1.3 测定项目与方法 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 花蕾内源激素含量的变化 |
| 5.2.2 叶片内源激素含量的变化 |
| 5.2.3 花蕾中内源激素之间的平衡关系 |
| 5.3 讨论与结论 |
| 5.3.1 雄性不育与内源激素含量的关系 |
| 5.3.2 雄性不育与激素比值的关系 |
| 第六章 西瓜细胞核雄性不育花蕾转录组分析 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 试验材料 |
| 6.1.2 取样 |
| 6.1.3 文库建立和RNA-Seq分析 |
| 6.1.4 数据处理和分析 |
| 6.1.5 qRT-PCR分析 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 转录组测序及数据分析 |
| 6.2.2 差异表达基因的功能注释和分类 |
| 6.2.3 植物内源激素相关的差异表达基因 |
| 6.2.4 花发育相关的差异表达基因 |
| 6.2.5 差异表达的转录因子相关基因 |
| 6.2.6 差异表达基因的qRT-PCR验证 |
| 6.3 讨论 |
| 6.3.1 转录组测序数据和花药发育相关的DEGs |
| 6.3.2 内源激素相关的DEGs |
| 6.3.3 转录因子相关的DEGs |
| 6.4 结论 |
| 第七章 西瓜细胞核雄性不育候选基因区段的预测与分析 |
| 7.1 材料与方法 |
| 7.1.1 试验材料 |
| 7.1.2 取样 |
| 7.1.3 文库建立和RNA-Seq分析 |
| 7.1.4 SNP标记检测 |
| 7.1.5 关联分析 |
| 7.1.6 候选区域基因的功能注释 |
| 7.2 结果与分析 |
| 7.2.1 SNP检测 |
| 7.2.2 BSR关联分析 |
| 7.2.3 候选区域内基因功能注释 |
| 7.3 讨论与结论 |
| 第八章 结论与创新点 |
| 8.1 结论 |
| 8.2 创新点 |
| 8.3 展望 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（3）两个辣椒雄性不育系败育机理及育性稳定特性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 雄性不育的定义和发现 |
| 1.2 辣椒雄性不育的来源 |
| 1.3 辣椒雄性不育的分类 |
| 1.4 辣椒雄性不育机理研究概况 |
| 1.4.1 植物学性状研究 |
| 1.4.2 细胞学观察 |
| 1.4.3 生理生化研究 |
| 1.4.4 辣椒雄性不育的利用 |
| 1.5 本研究的目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 试验材料的种植 |
| 2.2.2 辣椒不同育性材料形态指标的测定 |
| 2.2.3 辣椒不同育性材料花粉量的测定 |
| 2.2.4 辣椒不同育性材料花粉生活力的测定 |
| 2.2.5 辣椒不同育性材料细胞学观察 |
| 2.2.6 辣椒不同育性材料生理生化指标的测定 |
| 2.3 数据处理 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 辣椒不同育性材料形态学比较 |
| 3.2 辣椒不同育性材料花粉生活力的测定 |
| 3.3 辣椒不同育性材料花器官细胞学观察 |
| 3.3.1 花蕾的测量与分级 |
| 3.3.2 辣椒不同育性材料小孢子发育过程观察 |
| 3.4 辣椒不同育性材料生理生化指标的测定 |
| 3.4.1 小孢子发育时期可溶性糖含量 |
| 3.4.2 小孢子发育时期可溶性蛋白含量 |
| 3.4.3 小孢子发育时期游离脯氨酸含量 |
| 3.4.4 小孢子发育时期丙二醛含量 |
| 3.4.5 小孢子发育时期过氧化物酶活性 |
| 3.4.6 小孢子发育时期超氧化物歧化酶活性 |
| 3.5 不同播期不育材料的生理生化特性研究 |
| 3.5.1 小孢子发育时期可溶性糖含量 |
| 3.5.2 小孢子发育时期可溶性蛋白含量 |
| 3.5.3 小孢子发育时期游离脯氨酸含量 |
| 3.5.4 小孢子发育时期丙二醛含量 |
| 3.5.5 小孢子发育时期过氧化物酶活性 |
| 3.5.6 小孢子发育时期超氧化物歧化酶活性 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 辣椒雄性不育的细胞学研究 |
| 4.2 辣椒雄性不育的生理生化指标与不育的关系 |
| 4.3 影响辣椒育性的因素 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 图版说明 |
| 图版 |
| 作者简介 |
| 致谢 |
（4）咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 辣椒杂种优势育种概括及存在的问题 |
| 1.1.1 辣椒细胞质雄性不育育种及存在的问题 |
| 1.1.2 辣椒细胞核雄性不育育种及存在的问题 |
| 1.2 辣椒化学去雄育种及存在的问题 |
| 1.3 植物化学杀雄研究进展 |
| 1.3.1 化学杀雄剂的应用概括 |
| 1.3.2 化学杀雄剂的种类 |
| 1.4 化学杀雄剂引起植物不育的机理研究 |
| 1.4.1 细胞学研究 |
| 1.4.2 生理生化研究 |
| 1.5 研究的目的和意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 试验材料处理 |
| 2.2.2 辣椒花药的发育和败育时期确定 |
| 2.2.3 化学杀雄剂诱导辣椒雄性不育光学显微镜观察 |
| 2.2.4 化学杀雄剂诱导辣椒雄性不育透射电镜观察 |
| 2.2.5 辣椒花药RNA的提取和相关基因的表达分析 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 咪唑乙烟酸处理对辣椒花器官发育及叶片生长的影响 |
| 3.2 咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育的花器官形态特征观察 |
| 3.3 小孢子活力检测和花蕾不同发育时期确定 |
| 3.4 咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育的细胞学观察 |
| 3.5 咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育的超显微镜观察 |
| 3.6 咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育的分子机制研究 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 不同浓度咪唑乙烟酸处理对辣椒育性和其他农艺性状的影响 |
| 4.2 咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育的细胞学和分子机制研究 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）辣椒细胞质雄性不育相关基因的克隆及表达研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 引言 |
| 上篇 文献综述 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 植物雄性不育概述 |
| 2 辣椒雄性不育的来源 |
| 2.1 通过自然变异获取辣椒雄性不育系 |
| 2.2 通过引种和转育产生辣椒雄性不育系 |
| 2.3 人工诱变获得雄性不育株 |
| 2.4 通过种间杂交获取雄性不育株 |
| 2.5 通过基因工程获得雄性不育材料 |
| 3 辣椒雄性不育的遗传类型 |
| 3.1 细胞核雄性不育型(GMS) |
| 3.2 细胞质雄性不育型(CMS) |
| 3.3 核质互作不育型(G-CMS) |
| 4 辣椒雄性不育在各水平的表现 |
| 4.1 辣椒雄性不育在形态水平的表现 |
| 4.2 辣椒雄性不育的细胞学表现 |
| 4.3 辣椒雄性不育的生理生化水平 |
| 5 细胞质雄性不育的分子生物学研究 |
| 5.1 线粒体DNA与CMS |
| 5.2 线粒体蛋白与CMS |
| 5.3 叶绿体基因组与CMS |
| 5.4 核质互作与CMS |
| 6 辣椒细胞质雄性不育的研究 |
| 6.1 辣椒CMS分子生物学研究进展 |
| 6.2 辣椒雄性不育恢复基因的研究进展 |
| 7 辣椒雄性不育在生产中的应用 |
| 8 展望 |
| 参考文献 |
| 下篇 研究报告 |
| 第二章 辣椒细胞质雄性不育系及其保持系基因组DNA-SRAP分子标记研究 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 DNA提取 |
| 2.2 SRAP引物在不育系21A和保持系21B基因组DNA多态性 |
| 2.3 不育系21A和保持系21B基因组DNA特异片段筛选 |
| 2.4 SRAP差异片段的序列分析比对 |
| 2.5 SRAP标记转化为SCAR标记 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 辣椒细胞质雄性不育系及其保持系线粒体DNA-SRAP分子标记研究 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 mtDNA的提取 |
| 2.2 SRAP引物在不育系21A和保持系21B线粒体DNA多态性 |
| 2.3 不育系21A和保持系21B线粒体DNA特异片段筛选 |
| 2.4 mtDNA-SRAP差异片段序列的分析比对 |
| 2.5 SRAP标记转化为SCAR标记 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 辣椒细胞质雄性不育相关基因的表达分析 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 总RNA的提取 |
| 2.2 相对定量标准曲线的构建 |
| 2.3 CMS_(721)的qRT-PCR表达分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 创新之处 |
| 论文发表 |
| 致谢 |
（7）甜椒CMS育性相关基因的分子标记筛选与应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语表 |
| 引言 |
| 上篇 文献综述 |
| 第一章 植物雄性不育研究概况 |
| 1 雄性不育的概念 |
| 2 雄性不育的来源 |
| 2.1 自然突变 |
| 2.2 人工诱变 |
| 2.3 种间杂交 |
| 2.4 细胞工程和基因工程 |
| 3 雄性不育的分类 |
| 3.1 根据表型特征分类 |
| 3.1.1 结构性雄性不育 |
| 3.1.2 孢子发生性雄性不育 |
| 3.1.3 功能性雄性不育 |
| 3.1.4 部位不育 |
| 3.2 根据基因型差异分类 |
| 3.2.1 核雄性不育型 |
| 3.2.2 质雄性不育型 |
| 3.2.3 核质互作雄性不育型 |
| 4 CMS的分子生物学研究 |
| 4.1 叶绿体与CMS的关系 |
| 4.2 线粒体与CMS的关系 |
| 4.2.1 线粒体特异开放阅读框与雄性不育 |
| 4.2.2 线粒体能量代谢相关基因与雄性不育 |
| 4.3 恢复基因与CMS |
| 4.3.1 影响CMS相关基因转录本 |
| 4.3.2 影响CMS相关基因转录加工和编辑 |
| 4.3.3 影响转录本的翻译 |
| 4.3.4 改变线粒体DNA组成 |
| 5 CMS在生产上的应用 |
| 参考文献 |
| 第二章 分子标记在植物遗传育种中的应用 |
| 1 遗传标记的发展概况 |
| 1.1 形态标记 |
| 1.2 细胞标记 |
| 1.3 生化标记 |
| 1.4 分子标记 |
| 2 分子标记的种类 |
| 2.1 基于DNA-DNA杂交的分子标记 |
| 2.1.1 RFLP |
| 2.1.2 VNTR |
| 2.2 基于PCR的分子标记 |
| 2.2.1 随机引物PCR分子标记 |
| 2.2.2 特异引物PCR分子标记 |
| 2.3 基于PCR与限制性酶切的分子标记 |
| 2.3.1 AFLP |
| 2.3.2 CAPS |
| 2.4 基于DNA芯片技术的分子标记 |
| 3 分子标记在植物遗传育种中的应用 |
| 3.1 遗传多样性分析 |
| 3.2 构建遗传图谱 |
| 3.3 数量性状基因位点分子标记应用 |
| 3.4 质量性状基因的分子标记辅助选择 |
| 参考文献 |
| 下篇 研究报告 |
| 第三章 甜椒胞质雄性不育恢复系SRAP及SCAR标记分析 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 叶片基因组DNA的提取 |
| 1.5 基因池的构建 |
| 1.6 SRAP分析 |
| 1.6.1 SRAP扩增 |
| 1.6.2 扩增产物的电泳检测 |
| 1.7 特异条带的回收、纯化、克隆和测序 |
| 1.7.1 回收和纯化 |
| 1.7.2 克隆和测序 |
| 1.8 SCAR标记的转化 |
| 2 结果和分析 |
| 2.1 SRAP的PCR扩增分析 |
| 2.2 差异片段的测序及序列分析 |
| 2.3 SRAP标记转化为SCAR标记 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 甜椒恢复基因SCAR_(220)标记的应用 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要仪器和试剂 |
| 1.3 叶片基因组DNA的提取 |
| 1.4 SCAR分析所有甜辣椒材料 |
| 1.4.1 SCAR扩增 |
| 1.4.2 琼脂糖凝胶电泳检测 |
| 1.5 田间育性恢复鉴定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 基因组DNA的提取 |
| 2.2 SCAR_(220)在甜(辣)椒材料中的扩增 |
| 2.3 杂种一代的育性调查 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 甜椒细胞质雄性不育基因的SRAP标记 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 主要仪器和试剂 |
| 1.3 叶片基因组DNA的提取 |
| 1.4 SRAP分析 |
| 1.5 差异片段的回收、纯化、克隆和测序分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 基因组DNA的提取 |
| 2.2 SRAP特异片段的筛选 |
| 2.3 SRAP差异片段的测序及序列分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 创新之处 |
| 论文发表 |
| 致谢 |
（8）辣椒细胞核雄性不育育性相关基因分离克隆及其生物信息学分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 植物的雄性不育 |
| 1.1.1 植物雄性不育的来源 |
| 1.1.2 植物雄性不育的表型 |
| 1.1.3 植物雄性不育的类型 |
| 1.2 植物雄性不育分子机理的研究进展 |
| 1.2.1 核雄性不育的分子机理研究进展 |
| 1.2.2 植物细胞质雄性不育分子机理研究进展 |
| 1.3 辣椒雄性不育的研究进展 |
| 1.3.1 辣椒雄性不育机理的研究 |
| 1.3.2 辣椒雄性不育系的利用 |
| 1.4 CDNA-AFLP技术及其在雄性不育研究中的应用 |
| 1.4.1 CDNA-AFLP的技术特点 |
| 1.4.2 CDNA-AFLP技术在雄性不育研究中的应用 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 总RNA的提取与检测 |
| 2.2.2 CDNA的合成 |
| 2.2.3 CDNA-AFLP分析 |
| 2.2.4 差异条带的回收及二次扩增 |
| 2.2.5 PCR产物的纯化 |
| 2.2.6 CDNA差异片段的克隆 |
| 2.2.7 序列测定与分析 |
| 2.2.8 差异片段的RT-PCR验证 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 总RNA的纯度和质量检测 |
| 3.2 辣椒核雄性不育的CDNA-AFLP分析 |
| 3.2.1 CDNA-AFLP多态性分析 |
| 3.2.2 CDNA差异片段的回收及克隆 |
| 3.2.3 特异片段的测序与序列分析 |
| 3.3 RT-PCR验证 |
| 4 讨论 |
| 4.1 采样 |
| 4.2 cDNA-AFLP技术结果的可靠性 |
| 4.3 育性相关基因分析 |
| 4.3.1 富含甘氨酸蛋白与育性的关系 |
| 4.3.2 果胶甲酯酶与育性的关系 |
| 4.3.3 谷胱甘肽转移酶与与性的关系 |
| 4.4 CDNA-AFLP差异片段的研究展望 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（9）辣椒细胞质雄性不育系FS1030A小孢子发生细胞学观察和败育时期花药差异蛋白质组分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物雄性不育的研究概况 |
| 1.1.1 植物雄性不育特点及其应用价值 |
| 1.1.2 植物雄性不育系获得途径 |
| 1.1.3 植物雄性不育生理生化研究进展 |
| 1.1.4 植物雄性不育基因及其育性恢复机理分子生物学研究 |
| 1.1.5 植物雄性不育细胞学研究进展 |
| 1.2 辣椒雄性不育系研究 |
| 1.2.1 辣椒雄性不育类型 |
| 1.2.2 辣椒雄性不育机理研究进展 |
| 1.3 植物雄性不育差异蛋白质研究 |
| 1.3.1 蛋白质组学研究概况 |
| 1.3.2 雄性不育差异蛋白质组学研究进展 |
| 1.3.3 辣椒雄性不育差异蛋白质组学研究 |
| 1.4 本研究的目的和意义 |
| 第二章 辣椒细胞质雄性不育系 FS1030A 小孢子发生的细胞形态学观察 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 保持系 FS1030B 小孢子发生的透射电镜观察 |
| 2.2.2 不育系 FS1030A 小孢子发生的透射电镜观察 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 辣椒雄性不育材料 FS1030A 的败育时期及方式 |
| 2.3.2 辣椒材料 FS1030A 雄性不育与绒毡层的关系 |
| 图版说明 |
| 第三章 FS1030 保持系与不育系败育时期花药蛋白质组差异分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验设计 |
| 3.1.3 主要仪器 |
| 3.1.4 辣椒花药蛋白质制备 |
| 3.1.5 双向凝胶电泳 |
| 3.1.6 蛋白质肽谱制备 |
| 3.1.7 质谱分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 2 D-DIGE 电泳图图谱构建 |
| 3.2.2 差异蛋白质的 MELDI-TOF/TOF MS 分析和数据库检索 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（10）辣椒核雄性不育两用系创制及其不育机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 植物雄性不育 |
| 1.1.1 植物雄性不育的由来与起源 |
| 1.1.2 植物雄性不育类型划分与遗传机理 |
| 1.1.3 植物雄性不育分子机理 |
| 1.2 辣椒雄性不育研究 |
| 1.2.1 辣椒雄性不育类型 |
| 1.2.2 辣椒雄性不育花器官形态学研究 |
| 1.2.3 辣椒雄性不育的细胞学机理 |
| 1.2.4 辣椒雄性不育的生理生化机理 |
| 1.2.5 辣椒细胞核雄性不育基因研究 |
| 1.2.6 辣椒雄性不育的分子机理 |
| 1.2.7 雄性不育在辣椒育种中的应用 |
| 1.2.8 辣椒细胞核雄性不育与质核互作雄性不育的类型转换 |
| 1.3 本研究的目的和意义 |
| 第二章 辣椒雄性不育新种质创制及其遗传特性研究 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 辣椒雄性不育新种质 MS4 的创制过程 |
| 2.2.2 MS4 株系内成对杂交及自交结果分析 |
| 2.2.3 MS4 株系与自交系间成对杂交、自交及测交结果分析 |
| 2.2.4 MS4 雄性不育材料的遗传类型 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 雄性不育的产生途径 |
| 2.3.2 雄性不育的遗传规律 |
| 第三章 辣椒核雄性不育两用系选育及主要农艺性状分析 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 核雄性不育两用系 HW58AB 的选育程序 |
| 3.2.2 核雄性不育两用系 HW58AB 育性稳定性研究 |
| 3.2.3 核雄性不育两用系 HW58AB 主要农艺性状研究 |
| 3.2.4 核雄性不育性状转育研究 |
| 3.3 讨论 |
| 第四章 辣椒核雄性不育两用系小孢子发生的细胞学研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 辣椒花蕾外部形态与小孢子发育的关系 |
| 4.2.2 辣椒核雄性不育两用系可育株与不育株小孢子发育的细胞学特征 |
| 4.2.3 辣椒核雄性不育两用系不育株与可育株小孢子发育的电镜观察 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 小孢子败育的主要时期 |
| 4.3.2 小孢子败育的主要方式 |
| 4.3.3 绒毡层与雄性不育的关系 |
| 第五章 辣椒核雄性不育与内源激素变化的关系 |
| 5.1 材料和方法 |
| 5.1.1 材料 |
| 5.1.2 方法 |
| 5.1.3 数据处理 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 辣椒两用系中不育株和可育株内源激素含量变化分析 |
| 5.2.2 辣椒两用系中不育株和可育株内源激素平衡分析 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 植物内源激素变化与雄性不育 |
| 5.3.2 植物内源激素平衡与雄性不育 |
| 第六章 辣椒核雄性不育两用系不育株与可育株蕾期基因 cDNA-AFLP 分析 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 材料 |
| 6.1.2 方法 |
| 6.2 结果与分析 |
| 6.2.1 辣椒雄性不育株与可育株花蕾总 RNA 的质量检测 |
| 6.2.2 双链 cDNA 合成 |
| 6.2.3 酶切、连接及预扩增 |
| 6.2.4 选扩引物的筛选 |
| 6.2.5 差异表达条带的回收、二次扩增及阳性克隆 |
| 6.2.6 两用系中不育株与可育株分级花蕾中的基因表达差异 |
| 6.2.7 差异片段序列比对及功能分析 |
| 6.3 讨论 |
| 第七章 辣椒核雄性不育两用系育性相关差异片段时空表达分析 |
| 7.1 材料和方法 |
| 7.1.1 材料 |
| 7.1.2 方法 |
| 7.2 结果与分析 |
| 7.2.1 差异表达片段半定量 RT-PCR 分析 |
| 7.2.2 两用系中不育株和可育株不同发育时期花蕾过氧化物酶活性变化分析 |
| 7.2.3 两用系中不育株和可育株不同发育时期花蕾游离脯氨酸含量分析 |
| 7.3 讨论 |
| 第八章 结论 |
| 8.1 结论 |
| 8.1.1 辣椒雄性不育新种质创制及其遗传规律 |
| 8.1.2 辣椒核雄性不育两用系的选育 |
| 8.1.3 辣椒核雄性不育两用系小孢子败育的细胞学机理 |
| 8.1.4 辣椒核雄性不育与内源激素变化的关系 |
| 8.1.5 辣椒核雄性不育两用系不育株与可育株蕾期基因表达差异分析 |
| 8.1.6 辣椒核雄性不育两用系育性相关差异片段蕾期表达模式分析 |
| 8.2 创新点 |
| 8.3 工作展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、辣椒雄性不育两用系的特点及应用价值（论文参考文献）
- [1]辣椒雄性不育的选育及利用研究进展[J]. 张锐,尚伟,许旭明. 分子植物育种, 2020(18)
- [2]西瓜核雄性不育两用系Se18不育特性的生理生化与分子机制研究[D]. 王永琦. 西北农林科技大学, 2020
- [3]两个辣椒雄性不育系败育机理及育性稳定特性研究[D]. 侯杰. 吉林农业大学, 2017(05)
- [4]咪唑乙烟酸诱导辣椒雄性不育性研究[D]. 李超. 西北农林科技大学, 2016(09)
- [5]辣椒常用育种方法研究进展初探[J]. 靳艳革,岳振平,顾桂兰. 农业科技通讯, 2013(01)
- [6]辣椒细胞质雄性不育相关基因的克隆及表达研究[D]. 袁稳. 南京农业大学, 2012(01)
- [7]甜椒CMS育性相关基因的分子标记筛选与应用[D]. 吴国平. 南京农业大学, 2012(01)
- [8]辣椒细胞核雄性不育育性相关基因分离克隆及其生物信息学分析[D]. 杨高强. 内蒙古农业大学, 2012(07)
- [9]辣椒细胞质雄性不育系FS1030A小孢子发生细胞学观察和败育时期花药差异蛋白质组分析[D]. 张玲玲. 西北农林科技大学, 2012(03)
- [10]辣椒核雄性不育两用系创制及其不育机理研究[D]. 黄炜. 西北农林科技大学, 2012(06)