一、汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响（论文文献综述）
席苑[1]（2020）在《雾化吸入汉防己甲素治疗肺纤维化的药效及机制研究》文中指出目的比较雾化吸入及注射两种不同给药方式下,汉防己甲素对一次性气管滴注博来霉素导致的SD大鼠肺纤维化模型的干预作用;通过细胞和整体实验初步探究其可能的作用机制,为临床治疗肺纤维化安全合理用药提供参考,为药物的开发提供依据。方法1 雾化吸入汉防己甲素对博来霉素所致肺纤维化大鼠的药效学研究一次性气管滴注博来霉素（5 mg·kg-1）对SD大鼠进行造模,分别采用雾化吸入及注射的方式,连续给予汉防已甲素干预,分别在14天及28天处死动物,动态地进行肺脏形态的大体观察,计算肺系数,利用肺功能检测仪记录各组大鼠肺功能相关指标,左肺HE,MASSON染色,进行病理学观察,右肺通过ELISA法观察肺组织中HYP含量变化。2 汉防己甲素改善博来霉素所致肺纤维化大鼠的机制研究ELISA法检测各组大鼠肺组织中Col-I及FN含量,Western Blot法测定各组大鼠肺组织中TGF-β1,α-SMA及Vimentin含量,观察上述蛋白水平的变化。3 TGF-β1刺激对A549,MRC-5及PMVEC细胞中细胞外基质的影响CCK-8法筛选TGF-β1对三种细胞的安全浓度。连续刺激24h后,ELISA法检测细胞上清中Col-I及FN含量变化,Western Blot法测定细胞中α-SMA及Vimentin含量变化。4 汉防己甲素治疗肺纤维化的体外机制研究根据第三部分中所得数据,采用适宜浓度的TGF-β1与不同浓度的汉防己甲素共同刺激MRC-5细胞,CCK-8法筛选安全的给药浓度及给药时间,ELISA法检测细胞上清中Col-I及FN含量变化,Western Blot法测定细胞中α-SMA及Vimentin含量变化。流式细胞术观察对细胞凋亡的影响。结果1 汉防己甲素对博来霉素所致肺纤维化大鼠有一定的治疗作用气管滴注博来霉素会导致大鼠肺纤维化。模型组与假手术组比较,14天时:肺系数升高至11.14%（P<0.01）,呼吸频率为96.81,表现为明显加快（P<0.05）,气道阻力略有升高,无统计学差异,潮气量及动态肺顺应性分别降低为 0.82 mL 及 0.13 mL·（cm H2O）-1（P<0.01）,HYP 含量增加加至 0.15%（P<0.05）,病理可见,肺泡间隔增厚,炎症细胞浸润,纤维组织明显增生;28天时:肺系数依然显着高于假手术组,为9.09%（P<0.01）,但略低于14天组,肺功能进一步下降,各项指标与假手术组相比,均出现统计学差异,且潮气量、气道阻力及动态肺顺应性差异明显（P<0.01）,HYP含量进一步升高,显着高于假手术组的0.062%（P<0.01）,病理可见肺泡间隔重度增厚,炎症细胞大量浸润,纤维组织重度增生。与模型组比较,连续给予汉防己甲素雾化吸入14天,大鼠肺系数降低至7.79%（P<0.05）,大鼠动态肺顺应性升高至0.25 mL·（cm H2O）-1（P<0.05）,呼吸频率,气道阻力及潮气量等肺功能也略有改善,HYP含量略有降低,均无统计学差异,病理可见轻微炎症细胞浸润及轻微纤维组织增生;连续给予汉防己甲素注射14天,大鼠肺系数下降至7.44%（P<0.05）,各项肺功能指标略有改善,HYP含量略有降低,均无统计学差异,病理可见轻度炎症细胞浸润及轻度纤维组织增生;连续给予汉防己甲素雾化吸入28天,大鼠肺系数未出现进一步升高,与模型组有明显差异（P<0.05）,大鼠呼吸频率略有降低,肺顺应性及潮气量略有升高,无统计学差异,气道阻力下降为0.88 cm H2O·（s·mL）-1（P<0.05）,HYP含量为0.089%,表达被明显抑制（P<0.05）,病理可见轻微炎症细胞浸润及轻微纤维组织增生;连续给予汉防己甲素注射28天,大鼠肺系数略有增加,但仍低于模型组,二者无统计学差异,气道阻力明显下降,为0.89 cm H2O·（s·mL）-1（P<0.05）,呼吸频率,潮气量及动态肺顺应性略有改善,无统计学差异,病理可见中度炎症细胞浸润及中度纤维组织增生。不同给药方式之间比较:注射组给药剂量为30 mg·kg-1,雾化组有效剂量为0.22 mg·kg-1,仅为注射组的1/136。与雾化组比较:注射组大鼠体重略微偏低,肺系数,肺组织中HYP含量及动物肺功能各项指标均接近,上述指标与雾化组均无统计学差异;但注射组部分动物在实验后期出现腹部胀大,肠腔积液严重,便秘严重,站立不稳等不良反应,且实验28天HE切片可见注射组大鼠肺组织中炎症细胞细胞浸润,肺泡间隔增厚,与雾化组有明显差异（P<0.05）。2 汉防己甲素可以抑制肺纤维化大鼠肺组织中细胞外基质的表达一次性气管滴注博来霉素14天后,模型组与假手术组比较,大鼠肺组织中TGF-β1含量明显升高（P<0.05）,Col-I含量显着升高（P<0.01）,FN含量明显增加（P<0.05）,α-SMA水平明显提高（P<0.05）,Vimentin水平显着提高（P<0.01）;28天后,上述指标的分泌进一步被促进,均与假手术组有显着差异（P<0.01）。汉防己甲素可以抑制肺纤维化大鼠肺组织中相关细胞外基质水平的升高:与模型组比较,14天时对大鼠肺组织中Col-I,FN,α-SMA的含量略有抑制作用,能明显抑制TGF-β1及Vimentin水平（P<0.05）;28天时,能明显降低大鼠肺组织中TGF-β1,Col-I,FN含量（P<0.05）,显着抑制Vimentin水平（P<0.01）,对α-SMA的表达略打抑制,但无统计学差异。3 TGF-β1激促进A549,MRC-5及PMVEC细胞中细胞外基质的表达适宜浓度的TGF-β1连续刺激24 h,能够使A549,MRC-5,PMVEC细胞上清中Col-I含量显着升高（P<0.01）,细胞中α-SMA及Vimentin念量显着增加（P<0.01）;可以显着促进A549,MRC-5细胞中FN的表达（P<0.01）。4 汉防已甲素可以抑制TGF-β1刺激的MRC-5细胞的作用汉防已甲素与TGF-β1共刺激24 h,对MRC-5细胞的半数抑制浓度为14.07μM。汉防己甲素可以显着抑制TGF-β1刺激所导致的MRC-5细胞中Col-I,FN,α-SMA 及 Vimentin 的增加（P<0.01）。单纯使用TGF-β1刺激并不会使MRC-5细胞凋亡,凋亡率为1.93%,甚至低于空白组的2.27%,同时加入汉防己甲素共刺激,凋亡率为1 7.53%—43.8%,对细胞的促凋亡作用明显（P<0.01）。结论1 汉防己甲素能够缓解肺组织病变程度,改善肺纤维化大鼠肺功能,降低肺系数,减少HYP的分泌,且这种保护在肺纤维化形成初期也有一定作用。2 相对于注射给药,雾化吸入治疗与其药效基本一致,但雾化吸入给药的有效剂量为0.22 mg·kg-1,仅为注射组剂量的1/136,且雾化组动物状态,肺组织病变程度及部分肺功能指标优于注射组。3 汉防己甲素可能是通过减少肺组织中TGF-β1含量,促进活化的成纤维细胞凋亡等多种途径,抑制Col-I,FN等细胞外基质的堆积,从而实现对肺纤维化的防治作用。
吴丽娟[2]（2020）在《大黄?虫丸基于TGF-β1/Smad信号通路抑制矽肺纤维化的作用机制研究》文中研究指明研究目的矽肺是世界范围内最主要的职业病,尽管各国不断在改进预防矽肺的方法,但无论在发达国家还是在中低收入国家,每年仍然有大量的新发病例。二氧化硅（Si O2）在肺组织中的沉积是矽肺的主要致病原因。Si O2进入肺部后所引起的肺纤维化病变是不可逆的,患者因此而导致肺功能逐渐下降乃至衰竭。迄今国内外均没有针对矽肺纤维化特殊的治疗药物和措施。因此,研究矽肺的发病机制,进行中医药的相关探索,为治疗矽肺另辟蹊径非常重要。大黄?虫丸是《金匮要略》中的经典名方,我们的前期预实验表明,它对于小鼠矽肺纤维化有改善作用。本研究通过动物实验和细胞实验,由TGF-β1/Smad信号通路入手,从整体、细胞和分子水平揭示大黄?虫丸治疗矽肺纤维化的作用机制。研究方法第一部分:小鼠矽肺纤维化模型造模方案的确定将80只SPF级昆明种小鼠随机分为正常对照组、暴露气管注射组、气管插管组、鼻腔滴入组和静式染毒组,共5组,每组16只,其中正常对照组不做任何干预。第1-4组一次性造模后第40天,第5组连续造模40天,比较各组小鼠体重、肺脏系数、存活率、肺组织病理情况,综合确定实验造模方案。第二部分:大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠的作用机制研究小鼠共108只,其中90只用静式染毒法造模40天后随机分成模型对照组、汉防己甲素组、大黄?虫丸高、中、低剂量组5组,每组18只。不染毒小鼠18只为正常对照组。低、中、高剂量组按照临床大黄?虫丸成人等效剂量的1倍、1.5倍和3倍剂量灌胃给药,一日一次。汉防己甲素按照临床成人等效剂量一天一次灌胃给药;正常对照组和模型对照组每次灌胃等量生理盐水。分别在给药后14、21、28天每组各处死6只小鼠,计算肺脏系数,取血清检测TNF-α、IL-6、IL-1β、HYP的含量,并用HE、Masson染色观察病理改变,用Western-Blot法检测大黄?虫丸对TGF-β1/Smad通路相关蛋白（TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3、Smad7）表达的影响,用RT-PCR法检测大黄?虫丸对TGF-β1/Smad通路相关基因（TGF-β1m RNA、Smad2m RNA、Smad3m RNA、Smad7m RNA）表达的影响。第三部分:大黄?虫丸对Si O2诱导的矽肺纤维化体外细胞模型作用机制研究用Si O2诱导MH-S细胞构建矽肺纤维化细胞模型,提取大黄?虫丸大鼠含药血清,采用串联质谱法检测血清中主要药理成分,再用不同浓度的含药血清干预,观察细胞形态,用CCK8法检测细胞活性、Elisa法检测细胞上清TNF-α、IL-6、IL-1β的含量、Western-Blot法检测含药血清对TGF-β1/Smad通路相关蛋白（TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3、Smad7）表达的影响,通过免疫荧光染色法观察以上蛋白的表达。研究结果第一部分:将静式染毒法作为本实验的造模方法1 各组一般情况正常对照组一般情况正常。各造模组小鼠后期体重增长缓慢,明显低于正常对照组,皮毛稀疏缺乏光泽,污秽粘连。静式染毒组小鼠时有挠鼻现象,可见鼻尖、嘴唇暗紫。2各组存活率及肺脏系数比较正常对照组为100%,暴露气管注射组为62.5%、气管插管组为87.5%,鼻腔滴入组为93.8%,静式染毒组为100%,静式染毒组明显高于其余三组。各模型组小鼠肺脏系数与正常组相比,均具有显着性差异（P<0.01）。3各组肺组织病理结果肺组织HE染色结果:正常对照组肺泡结构正常。各造模组均可见部分肺泡腔萎陷,局部肺泡上皮细胞变性坏死,胞核固缩。其中,暴露气管注射组、气管插管组及静式染毒组肺间质不同程度的增厚,伴纤维组织增生和新生上皮细胞增生,炎细胞浸润,主要为圆形深染的淋巴细胞。Masson染色结果显示,正常对照组肺组织形态无明显改变。四个模型组小鼠肺泡结构破坏,肺泡间隔增宽,肺野内见大量密集的弥漫性蓝色胶原纤维增生,呈片状或束状分布。4本部分实验结论综上,暴露气管注射法、气管插管法、静式染毒法三种方式皆可以成功复制小鼠矽肺弥漫性纤维化模型,鼻腔滴入法相对成功率低,这可能是因为小鼠经鼻滴最终进入食道而未进入呼吸道所致。综合造模方法和真实疾病形成的拟合程度、成功率、存活率等相关因素,实验选取静式染毒法作为造模方法。第二部分:大黄?虫丸能够通过调控TGF-β1/Smad通路抑制小鼠矽肺模型的肺纤维化进程1大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠一般情况的影响结果造模期间,正常组小鼠一般情况状态良好。模型组小鼠精神逐渐萎靡,时有挠鼻现象,活动减少,体重增加不明显,皮毛稀疏缺乏光泽,污秽粘连,鼻尖、嘴唇较正常组偏暗,部分尾部可见散在紫色血丝。给药后大黄?虫丸高剂量组精神状态良好,接近正常组,中剂量组与模型组相比情况有改善,低剂量组总体情况不如高、中组,但优于模型组。2 大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠肺脏系数的影响结果肺脏系数:模型组显着高于正常组（P<0.01）;在给药14天后,可见大黄?虫丸高剂量组低于模型组,有统计学意义（P<0.05）;给药21天后,大黄?虫丸高、中剂量组显着低于模型组（P<0.01）。28天后,高、中、低组均显着低于模型组（P<0.01）。3 大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠肺组织病理染色的影响结果肺组织病理结果:HE染色:正常对照组肺泡形态结构正常;模型组组织充血,肺泡的萎陷、融合,上皮细胞变性坏死,胞核固缩。不同程度的肺泡间隔增厚,纤维组织增生或上皮细胞增生;以及局部淋巴细胞浸润。大黄?虫丸高剂量组肺组织形态结构改善明显,最接近正常组。Masson染色:正常对照组未见明显的蓝染胶原沉积;模型组可见弥漫性蓝染的胶原纤维,肺泡壁厚薄不一;大黄?虫丸治疗后,不同程度地减少了肺组织中胶原纤维沉积,其中以大黄?虫丸高剂量（1.170 g/kg）改变最为明显,蓝染颜色明显变浅,面积也明显减少。两种染色方法都说明大黄?虫丸高剂量组对肺组织炎症和纤维化有明显的改善作用。4 大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠细胞因子的影响结果模型组小鼠血清中HYP、TNF-α、IL-6、IL-1β含量均显着高于正常组（P<0.01）。14天时,大黄?虫丸高、中剂量组HYP、TNF-α、IL-6、IL-1β显着低于模型组（P<0.01）,低剂量组TNF-α、IL-6也显着低于模型组（P<0.01）。21天时,大黄?虫丸高剂量组HYP、TNF-α、IL-6、IL-1β显着低于模型组（P<0.01）;中剂量组HYP、IL-6、IL-1β均显着低于模型组（P<0.01）;低剂量组IL-1β的含量显着低于模型组（P<0.01）。28天时,大黄?虫丸高剂量组HYP、TNF-α、IL-6、IL-1β含量均显着低于模型组（P<0.01）,中剂量组的IL-1β也显着低于模型组（P<0.01）。5 大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠TGF-β1/Smad通路蛋白表达的影响结果模型组TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3蛋白含量与正常组相比显着增加（P<0.01）,Smad7显着降低（P<0.01）。14天时,大黄?虫丸高剂量组TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3的蛋白含量较模型组显着降低（P<0.01）,Smad7显着增加（P<0.01）。大黄?虫丸中剂量组Smad2较模型组显着降低（P<0.01）,α-SMA、Smad3较模型组降低,有统计学意义（P<0.05）;Smad7显着增加（P<0.01）。低剂量组Smad2蛋白含量较模型组显着降低（P<0.01）,Smad7显着增加（P<0.01）。21天时,除低剂量组的Smad2低于模型组,具有统计学意义外,其余大黄?虫丸高、中、低剂量组的TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3蛋白含量较模型组显着降低（P<0.01）,Smad7显着增加（P<0.01）。28天时,大黄?虫丸高剂量组TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3蛋白含量较模型组明显降低,Smad7明显增加,其中TGF-β1、Smad2与模型组的差异具有统计学意义（P<0.05）,其余三个指标差异均显着（P<0.01）。大黄?虫丸中、低剂量组Smad3的蛋白含量较模型组显着降低（P<0.01）,Smad7显着增加（P<0.01）。6 大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠TGF-β1/Smad通路基因表达水平的影响结果模型组Smad2m RNA在14天、21天,Smad3m RNA在14天表达水平高于正常组,具有统计学意义（P<0.05）;Smad7m RNA在21天表达水平低于正常组具有统计学意义（P<0.05）。其余各时间段模型组TGF-β1m RNA、Smad2m RNA、Smad3m RNA表达水平显着高于正常组（P<0.01）,Smad7m RNA表达水平均显着低于正常组（P<0.01）。14天时,大黄?虫丸高剂量组与模型组相比,Smad2m RNA、Smad3m RNA降低（P<0.05）,TGF-β1m RNA降低（P<0.01）,Smad7m RNA升高（P<0.01）。中、低剂量组TGF-β1m RNA较模型组显着降低（P<0.01）,Smad7m RNA显着升高（P<0.01）。中剂量Smad2m RNA较模型组降低,有统计学意义（P<0.05）。21天时,高剂量组TGF-β1m RNA、Smad3m RNA表达水平与模型组相比显着降低（P<0.01）,Smad2m RNA表达比模型组低（P<0.05）,Smad7m RNA表达比模型组高（P<0.05）。中、低剂量组TGF-β1m RNA、Smad3m RNA显着低于模型组（P<0.01）。28天时,大黄?虫丸高、中、低剂量组TGF-β1m RNA、Smad2m RNA、Smad3m RNA明显降低,与模型组相比均具有显着性差异（P<0.01）;Smad7m RNA的表达水平明显升高,同样与模型组相比具有显着性差异（P<0.01）。第三部分:大黄?虫丸含药血清能够通过调控TGF-β1/Smad通路抑制体外细胞的纤维化水平1大黄?虫丸含药血清对Si O2诱导的MH-S细胞活力的影响结果经过Si O2混悬液刺激细胞后,细胞活力明显下降（P<0.05）。大黄?虫丸不同浓度干预后,细胞活力均高于模型对照组,且呈浓度依赖性。2大黄?虫丸含药血清对Si O2诱导的MH-S细胞因子的影响结果模型对照组细胞上清TNF-α、IL-6、IL-1β的含量显着高于正常对照组（P<0.01）,大黄?虫丸含药血清15%组及含药血清10%组的IL-6含量显着低于正常对照组（P<0.01）,含药血清15%组的TNF-α及IL-1β含量低于模型组,有统计学意义（P<0.05）。含药血清10%组的TNF-α含量低于模型组,有统计学意义（P<0.05）。3大黄?虫丸含药血清对Si O2诱导的MH-S细胞系TGF-β1/Smad通路蛋白表达的影响结果（1）Western-Blot结果:模型对照组TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3蛋白表达显着高于正常对照组（P<0.01）,Smad7表达相反,模型对照组低于正常组,且具有统计学意义（P<0.05）。大黄?虫丸含药血清15%组的TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3蛋白表达显着低于模型对照组（P<0.01）,Smad7蛋白表达相反,高于模型组,有统计学意义（P<0.05）。含药血清10%组的TGF-β1、α-SMA、Smad2蛋白表达显着低于模型对照组（P<0.01）。含药血清5%组α-SMA蛋白表达显着低于模型对照组（P<0.01）,TGF-β1、Smad2的蛋白表达低于模型组,具有统计学意义（P<0.05）。（2）细胞免疫荧光结果:从细胞免疫荧光的结果可以看出,模型对照组TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3表达的平均光密度值（average optical,AO）,显着高于正常对照组（P<0.01）,Smad7表达的AO值低于正常对照组（P<0.01）。加入大黄?虫丸含药血清后,15%含药血清组的TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3的AO值显着低于模型对照组（P<0.01）,Smad7的AO值明显高于模型对照组（P<0.01）;10%含药血清组TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3的AO值显着低于模型对照组（P<0.01）,Smad7表达的AO值高于模型对照组,有统计学意义（P<0.05）;5%含药血清组α-SMA、Smad2的AO值显着低于模型对照组（P<0.01）,TGF-β1、Smad3的AO值低于模型对照组,有统计学意义（P<0.05）,Smad7表达的AO值显着高于模型对照组（P<0.01）。说明大黄?虫丸能够明显降低TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3的AO值,同时增强Smad7的AO值,尤其是15%含药血清组的效果更加明显,结论同Western-Blot相一致。研究结论1、通过造模实验研究,显示暴露气管注射法、气管插管法和静式染毒法三种方式皆可以成功复制小鼠矽肺纤维化模型,但是为了减少造模过程中创伤的影响,降低小鼠的死亡率,更加贴合和接近真实矽肺发生的条件,最终选择了静式染毒法作为本课题造模方法。2、从动物实验的肺系数、病理;血清HYP含量、血清TNF-α、IL-6、IL-1β含量;肺组织α-SMA、TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7蛋白表达;肺组织TGF-β1m RNA、Smad2m RNA、Smad3m RNA、Smad7m RNA表达,证实大黄?虫丸可通过调控TGF-β1/Smad通路抑制小鼠矽肺模型肺纤维化进程,且存在一定的剂量和时间依赖性。3、体外细胞实验用大黄?虫丸含药血清干预Si O2诱导的肺泡巨噬细胞MH-S细胞系,CCK8测试细胞活力,同样观察相关炎性因子含量,以及Western-Blot和免疫荧光法检测TGF-β1、α-SMA、Smad2、Smad3、Smad7蛋白的表达,结论同动物实验一致,证明大黄?虫丸在体外细胞水平也可以通过调控TGF-β1/Smad通路抑制肺纤维化,且存在浓度依赖性。
杨文星[3]（2020）在《康复新液联合积雪苷霜软膏治疗增生性瘢痕临床与实验研究》文中研究表明目的:通过观察康复新液联合积雪苷霜软膏治疗增生性瘢痕早期的临床疗效及兔耳增生性瘢痕实验研究,探讨康复新液对增生性瘢痕的治疗作用及机制初探。方法:临床研究:将符合病例纳入标准的60例增生性瘢痕患者,随机分为两组,每组30例。治疗组予康复新液联合积雪苷霜软膏外擦,2次/日;对照组只予积雪苷霜软膏外擦,2次/日,3个月为一个疗程。运用温哥华瘢痕评分量表（Vancouver scar scale,VSS）统计两组患者治疗前及治疗后第1个月、2个月、3个月各项症状积分,对临床疗效进行综合评价。实验研究:通过兔耳增生性瘢痕实验,对康复新液治疗增生性瘢痕的机制进行初探。结果:临床观察:1.各单项VSS评分组内比较,两组治疗在第2个月、第3个月均能改善各项评分（P<0.05）;组间比较,瘙痒、疼痛、厚度在第2个月治疗组优于对照组,柔软度、色泽在第3个月治疗组优于对照组（P<0.05）。血管分布两组治疗效果相当（P>0.05）。2.总VSS评分组内比较,两组治疗对增生性瘢痕均有效（P<0.05）;组间比较,治疗后第2个月、第3个月,治疗增生性瘢痕的效果治疗组优于对照组（P<0.05）。3.治疗后第3个月,治疗组与对照组临床疗效比较差异有统计学意义,治疗组效果优于对照组（P<0.05）。4.两组均未发生不良事件。兔耳增生性瘢痕实验:1.治疗28d后,康复新溶液各剂量组均能降低增生性瘢痕指数（与模型组相比P<0.05）;康复新液高剂量组与康瑞保阳性对照组相比,瘢痕增生指数下调明显（P<0.05）。2.HE染色显示模型组可见大量的成纤维细胞,胶原含量丰富,排列不规则,康复新液各剂量组成纤维细胞数量均减少,漩涡结节和胶原结节明显减少。3.免疫组化学检测显示:与空白组对比,模型组兔耳瘢痕组织成纤维细胞中SHH信号通路因子Shh、Patch、Smo及Gli-1蛋白明显表达;与模型组对比,康复新液各剂量组Shh、Patch、Smo及Gli-1蛋白表达均有不同程度的下调。结论:1.康复新液联合积雪苷霜软膏对增生性瘢痕早期治疗具有明显效果,而康复新液对增生性瘢痕瘙痒、疼痛、厚度、软硬度、色泽的缓解起增效作用,值得临床推广和使用。2.康复新液通过抑制Shh、Patch、Smo、Gli-1通路因子使SHH信号通路活性被下调,抑制成纤维细胞的过度增生,从而抑制兔耳增生性瘢痕的增生。
席苑,张海静,叶祖光,张广平[4]（2020）在《汉防己甲素现代药理作用研究进展》文中进行了进一步梳理汉防己,又称粉防己,能够祛风止痛,利水消肿,是一种治疗风湿痹痛的传统中药。生物碱在粉防己中具有重要的药效物质基础,汉防己甲素属于其中的双苄基异喹啉类生物碱成分,生物活性多样,可以从多个方面实现抗肿瘤的作用,临床上也验证了其对多种炎症因子的抑制作用,对肝纤维化、肾纤维化等多种纤维化类疾病也有较好的防治作用,并且在与多种药物联合用药时,能够体现出良好的协同作用。近年来,经过国内外学者不断深入的研究,还发现汉防己甲素对神经系统以及缺血再灌注损伤也有一定的保护作用,同时,作为一种钙离子拮抗剂,汉防己甲素能够有效阻断细胞内外钙离子的沉积。综上所述,汉防己甲素在临床上的应用前景十分广泛,该文通过对上述及其他已经报道的汉防己甲素的药理作用进行了归纳,总结其各个药理作用实现的可能机制,综述其目前的研究进展,希望能够较为全面地揭示出汉防己甲素可能的应用方向,为其能够更好地在临床上应用提供启示和思路。
倪瑶,吕文良,李娟梅,张婷婷[5]（2017）在《粉防己碱防治肝纤维化的作用机制研究》文中提出防己最早记载于《神农本草经》,并被列为下品。李时珍的《本草纲目》中记载,防己具有祛风止痛、利水消肿的作用。临床发现,中药饮片粉防己中的有效成分粉防己碱对肝纤维化的治疗有着良好的疗效,主要从抑制肝星状细胞的活性、抑制储脂细胞增殖、调节细胞周期、抑制细胞外基质的合成、抑制胶原合成及减少脂质过氧化损伤等方面达到治疗的目的。本文通过对粉防己碱及其配伍用药等治疗肝纤维化的机制进行综述,以期为进一步开发研究提供借鉴。
王畅[6]（2016）在《青川复合物对人增生性瘢痕成纤维细胞作用的TGF-β1/Smad蛋白信号传导通路机制研究》文中指出目的：创面愈合一般要经历炎症、增殖和重塑三个相互重叠的阶段,并伴随瘢痕（Scar）的产生而结束。增生性瘢痕（hypertrophic scar,HS）基本发生于创伤后1个月,是皮肤深度烧伤、严重创伤后致局部组织的异常修复,常伴瘙痒、局部麻木和感觉异常,影响美观,而且易导致各种肢体及功能障碍。目前瘢痕的发病机制尚不完全清楚,临床上治疗方法HS的方法较多,但疗效不确切。青川复合物是由中药有效提取成分川芎素（阿魏酸钠）、青藤碱按2：3比例配置构成。两种有效提取成分均有抗炎、镇痛等多种药理作用。近年发现川芎素还有抗肝、肺、肾组织纤维化的作用,青藤碱亦能显着抑制肾间质纤维化。此外,我们前期实验组通过家兔瘢痕动物模型,发现川芎素、青藤碱按2：3比例配置的复合物能有效抑制家兔瘢痕增生。本实验拟通过体外培养人瘢痕增生成纤维细胞（human hypertrophic scar fibroblast,HSFb）,研究青川复合物对HSFb的增殖、凋亡及胶原合成的影响以及对TGF-β1/Smad蛋白信号传导通路中多个相关信号蛋白分子含量的影响,以明确青川复合物对HSFb的生物学作用并从信号传导通路初步探讨其可能的作用机理,为临床应用青川复合物防治HS提供实验依据。方法：1.HSFb的鉴定及传代培养细胞购买于上海素尔生物科技有限公司。通过HE染色、免疫细胞化学染色等方法对细胞进行鉴定,证实该细胞为人瘢痕增生成纤维细胞。使用含10%胎牛血清的DMEM培养基,37℃,5%C02饱和湿度下培养及传代,本实验采用4-6传代细胞。2.实验分组及MTT法测定各药物组的LC砷、最佳有效时间设立空白对照组,川芎素组、青藤碱组、青川复合物组等3个药物实验组；MTT法测定各组药物对HSFb的LC50及最佳有效时间；设定各药物组的高、中、低3个有效剂量。3.MTT法测定对HSFb增殖的影响MTT法检测各组药物对细胞增殖的影响。4.对HSFb形态、凋亡及凋亡相关蛋白的影响电镜观察各组药物对细胞超微形态结构的影响；TUNEL法检测各组药物对细胞凋亡的影响；免疫组化检测各组药物对细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响。5.对HSFb胶原合成的影响Western blot法检测药物对Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成的影响。6.对TGF-β/Smad信号传导通路的影响Western blot法检测对TGF-β/Smads信号传导通路中的重要信号分子TGF-β i,p-Smad2/3,p-Smad4和p-Smad7蛋白的影响：检测比较TGF-β1, p-Smad2/3、 p-Smad4和p-Smad7等信号分子对HSFb增殖、凋亡及胶原合成的影响。结果：1.HE染色及免疫组化鉴定购买的细胞株为人增生性瘢痕成纤维细胞（HSFb）.2.川芎素、青藤碱及青川复合物的HSFb的LC50分别为0.3075mg/ml、1.1285 mg/ml、0.938mg/ml;通过MTT法检测到各药物组作用于细胞的最佳抑制时间为48h;川芎素组高、中、低剂量设定为：0.003mg/ml,0.03 mg/ml,0.3 mg/ml;青藤碱组高、中、低剂量设定为：0.01mg/ml,0.1mg/ml, lmg/ml;青川复合物组高、中、低剂量设定为：0.008 mg/ml,0.08 mg/ml,0.8mg/ml,3.通过MTT法显示除低浓度青川复合物组以外,其余各组药物均能不同程度地抑制细胞增殖。4.川芎素、青藤碱及青川复合物作用于HSFb后,可引起HSFb的超微结构改变,如细胞体积变小,外形不规则,细胞核染色质聚集或核仁增大,粗面内质网减少,胞浆内出现空泡或凋亡小体；TUNEL法检测提示除低浓度的青藤碱组以外,其余各药物组能诱导细胞凋亡率增加;免疫组化法检测显示,青藤碱（中、高）组、青川复合物（高）及川芎素（高）组能下降细胞Bcl-2蛋白表达；中、高浓度的各组药物均能上调Bax及Caspase-3蛋白,且Bax升高幅度随浓度增加而增强。5.川芎素、青藤碱及青川复合物作用于HSFb后,Western blot法检测显示除低浓度川芎素对Colα1 （Ⅲ）蛋白表达无抑制作用以外,其他各组药物均能不同程度地抑（?）Colα1（Ⅰ）、Colα1 （Ⅲ）蛋白表达。6. Western blot法检测显示：（1）川芎素（高、中）组、青藤碱（高）组及青川复合物（高）组对HSFb的TGF-β1表达有抑制作用；（2）川芎素（高、中）组、青藤碱（高）组及青川复合物（高、中）组能抑制HSFb的P-Smad2/3表达,且抑制强度随浓度增加而增强；（3）川芎素（高、中）组、青藤碱（高）组及青川复合物（高、中）组能抑制HSFb中p-Smad4的表达；（4）川芎素（高、中）组、青藤碱（高）组及青川复合物（高）组能上调HSFb中p-Smad7的表达。青川复合物（高）、川芎素（高、中）、青藤碱（高）组在抑制细胞TGF-β1表达的同时,能显着抑常HSFb的增殖、显着诱导细胞凋亡和显着抑制Colα 1（I）、Colα1 （Ⅲ）蛋白表达；青川复合物（高、中）、川芎素（高、中）、青藤碱（高）组在抑制P-Smad2/3、 P-Smad4表达的同时,均能抑制Colα1（Ⅰ）、Colα1 （Ⅲ）蛋白表达。青川复合物（高）、川芎素（高、中）、青藤碱（高）上调P-Smad7含量的同时,均能诱导细胞凋亡、抑制一Colα1（Ⅰ）、Colα1 （Ⅲ）蛋白表达。结论：1.青川复合物从中浓度即0.08mg/ml开始能有效抑制1SFb的增殖,抑制强度随浓度增加而增强；2.青川复合物能影响HSFb的超微形态结构并诱导细胞凋亡；青川复合物促使Bc1-2蛋白的表达减弱,Bax及Caspase-3蛋白的表达增强,可能是其致HSFb细胞凋亡发生的分子基础；3.青川复合物能影响HSFb的生物学功能,包括抑制细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的合成、减少TGF-β1蛋白的分泌；4.青川复合物可能通过抑制TGF-β1、p-Smad2/3、p-Smad4蛋白的表达,同时上调p-Smad7蛋白而阻碍TGF-β/Smad信号通路传导,进而发挥抑制HSFb的细胞增殖和胶原蛋白合成以及诱导细胞凋亡的作用。
欧阳云[7]（2014）在《青光安缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化TGF-β/Smad信号传导通路的影响》文中研究表明目的:观察青光安有效组份缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化过程中TGF-β/Smad信号传导通路的影响,探讨青光安有效组份缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化的效果及其作用机制,并初步判断青光安有效组份缓释剂的安全性。方法:通过前期研究的高通量中药筛选体系,提取4种青光安有效组份,并将4种青光安有效组份制成缓释药膜。将48只健康成年新西兰长耳白兔,采用随机数字法分为8组,每组6只。分别为:A组:空白组;B组:模型组;C组:MMC对照组;D组:有效组份1组;E组:有效组份2组;F组:有效组份3组;G组:有效组份4组;H组:安慰剂组。A组不做任何处理,将B、C、D、E、F、G、H七组实验动物兔眼行常规小梁切除+虹膜根部切除术;C组在术中联合应用MMC;D、E、F、G四组分别在结膜下植入相对应的青光安有效组份缓释药膜;H组在结膜下植入安慰剂缓释药膜。各组实验动物分别于术后测量眼压,观察滤过泡形态,检查术口愈合及眼部一般情况。用药观察4周后采用空气栓塞法处死各组兔子,剪取术眼滤过道巩膜组织,采用HE染色后观察滤过性手术区组织形态,采用Real-time PCR法和Western-blot法对滤过泡区域巩膜组织中TGF-β2、Smad3、Smad4和Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白的表达进行检测,并进行统计学分析。结果:术后C、E两组眼压回升缓慢,第4周时该两组眼压值与A、B、D、F、G、H组眼压值比较P<0.05,差异均有统计学意义。C组和E组术后都能维持有效滤过泡,B组滤过泡在术后两周内基本都变为无功能滤过泡或滤过泡消失,D、F、G、H组在术后第4周都有少量功能性滤过泡存在。HE染色见C、E两组滤过道轮廓清晰,纤维细胞及炎症细胞少,其他各手术组滤过道轮廓消失,被大量纤维细胞和炎症细胞填充;术后四周各组TGF-β2的mRNA和蛋白的表达量,B、C、D、E、F、G、H各组比较P>0.05,差异无明显统计学意义;Smad3、Smad4的mRNA和蛋白的表达量,C组与B、D、E、F、G、H各组比较P<0.05,差异有明显统计学意义,而B、D、E、F、G、H各组比较P>0.05,差异无明显统计学意义;Ⅰ型胶原蛋白的mRNA和蛋白的表达,C、E组与B、D、F、G、H各组比较P<0.05,差异有明显统计学意义,C、E组比较P>0.05,差异无明显统计学意义。结论:（1）验证了在进行青光眼滤过性手术后,滤过道的瘢痕化是导致滤过道堵塞,术后眼压回升,滤过泡失去功能,滤过性手术失败的重要原因;（2）MMC和青光安有效组份2都可以通过影响滤过道瘢痕化过程中TGF-β/Smad信号传导通路来抑制成纤维细胞增殖和Ⅰ型胶原蛋白的表达,而减少瘢痕组织的增生,具有明显的抑制抗青光眼术后滤过道瘢痕化的作用。（3）青光安有效组份2能够与TGF-β竞争性结合TGF-β受体,从而起到拮抗TGF-β的作用,使得TGF-β/Smad细胞信号传导通路的信号传导减弱,成纤维细胞合成分泌Collagen Ⅰ减少。（4）青光安有效组份2除了直接影响TGF-β/Smad细胞信号传导通路外,可能还能够通过影响炎症因子的生成,间接的减少炎症因子对手术区滤过道的影响,减少TGF-β的产生,从而影响TGF-β/Smad细胞信号传导通路。（5）通过实验我们观察到青光安有效组份2缓释剂局部给药的毒副作用小,安全性优于MMC。有望成为抗青光眼术后抑制滤过道瘢痕化,维持术后低眼压状态,提高手术成功率的一个新型的安全的药物。
赵庆利[8]（2009）在《蔡瑞康教授学术经验总结及瘢痕疙瘩辨体—辨病—辨证分析与中药外治研究》文中研究说明目的:总结归纳蔡瑞康教授诊治皮肤病的学术经验。对瘢痕疙瘩（Keloid,K）患者进行辨体、辨病、辨证分析。观察自制中药外治的临床疗效并探讨其作用机制。方法:应用《中医体质分类判定标准》对124例K患者进行中医体质类型研究。对154例K患者的总体及分型后临床资料进行分析。根据《血瘀证诊断标准》等对154例K患者进行血瘀证及兼证类型调查,测定43例K患者血液流变学指标,对5例K患者的不同分型皮损进行超声及皮肤镜检查。采用随机、对照临床试验方法观察自制中药软膏、酊剂外用治疗K疗效。对自制中药作用后的体外培养K成纤维细胞的形态、增殖活性、Ⅰ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶1（MMP-1）及血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达及细胞毒性进行检测。结果:①与正常人比较,K患者属湿热质、瘀血质、痰湿质、阴虚质、特禀质、气虚质的百分比增加;男性、女性、17～45岁患者属湿热质的百分比增加;男性、36～45岁患者属瘀血质、痰湿质、阴虚质、特禀质的百分比增加;17～25岁患者属痰湿质、阴虚质的百分比增加;与痤疮患者比较,与痤疮相关K患者属阴虚质的百分比增加（p＜0.05）。②K发病年龄11～30岁占81.17%,有家族史者占25.97%,皮损累及部位依次为胸、背、下颌、四肢、腹腰臀,主要诱因为痤疮（48.70%）、毛囊炎（35.71%）。87.50%胸背下颌多发型K由痤疮诱发,54.90%、23.53%胸部单发型K由毛囊炎、搔抓诱发,四肢多发型、混合型K与瘢痕体质有关,手术居胸外单发型K发病诱因的首位。③99.35%K患者属血瘀证,兼证类型依次为湿热证（61.44%）、气滞证（34.64%）、痰湿证（26.80%）、气虚证（1.31%）。与正常人比较,K患者中切变率30-S、5-S全血粘度值、全血低切还原粘度、红细胞聚集指数增高的病例数增加（p＜0.05）。K皮损内呈缺血或缺动脉血状态,浅部血管数目、分布及形态异常,依皮损分型不同而血流状态及浅部血管表现亦不同。④与积雪苷比较,自制中药软膏外用治疗K12周后,从靶皮损疗效评估、严重程度总评分、分级三种方式判定均差异有统计学意义（p＜0.05）。⑤在一定浓度下,自制中药提取物作用后K成纤维细胞形态发生改变,增殖活性降低,Ⅰ型胶原蛋白表达减低,MMP-1表达增高,VEGF表达呈双向性改变,乳酸脱氢酶（LDH）活性增高。结论:运用中医学及中西医结合理论与方法诊治皮肤病是蔡教授的学术特色。K发生与某些中医体质类型有关。K临床类型不同其发病原因亦不同。K存在着血行瘀滞以及血液流变性异常、皮损处微循环障碍。自制中药软膏治疗K疗效满意,该药从多方面影响着K成纤维细胞的生物性状。
赵庆利,蔡瑞康[9]（2007）在《中药治疗皮肤瘢痕增生的现代研究进展》文中指出
陶丹[10]（2005）在《汉防己甲素对兔PRK术后haze形成抑制作用的初步研究》文中研究说明目的:探讨汉防己甲素对兔 PRK 术后 haze 形成的抑制作用并初步探讨其机理,力图找到一种能替代皮质类固醇药物用于防治 haze 形成的新药。 方法:选用 60 只新西兰大耳白兔,随机分为汉防己甲素实验组（0.05%,0.1%,0.2%）,艾氟龙阳性对照组,生理盐水阴性对照组。于 PRK 术后 1w,2w,1m,2m,分别用裂隙灯显微镜观察并记录各组 haze 分级情况。光学显微镜和透射电子显微镜进行形态学观察。免疫组织化学法检测角膜基质纤维连接蛋白,III 型胶原的表达,并应用计算机图像分析系统进行定量分析。用 ELISA 法测定房水中的 TGF-β1 含量。 结果:1、PRK 术后裂隙灯显微镜观察,Tet 各浓度组 haze明显较 FML 组和生理盐水组减轻。 2、汉防己甲素各浓度组角膜基质纤维连接蛋白,III 型胶原表达减弱,均低于艾氟龙和生理盐水组,差异有显着性意义（P<0.01）。 3、PRK 术后 1w 兔房水中 TGF-β1 含量开始升高,于术后 2m 仍处于较高水平;汉防己甲素各浓度组房水 TGF-β1 含量均低于艾氟龙和生理盐水组,差异有显着性意义（P<0.01）。 结论:1、汉防己甲素对兔 PRK 术后 haze 形成有明显的抑制作用;2、汉防己甲素可能是通过减少细胞外基质――FN、Ⅲ型胶原的生成和下调 PRK 术后 TGF—β1 的表达而发挥其抑制作
二、汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响（论文提纲范文）
（1）雾化吸入汉防己甲素治疗肺纤维化的药效及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语名词对照表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 1 肺纤维化概述 |
| 2 汉防己甲素药理作用的研究进展 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 第一章 雾化吸入Tet对博来霉素所致肺纤维化大鼠的药效学研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二章 Tet对博来霉素所致肺纤维化大鼠的机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第三章 TGF-β_1对A549,MRC-5,PMVEC细胞的作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第四章 Tet治疗肺纤维化的体外机制研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）大黄?虫丸基于TGF-β1/Smad信号通路抑制矽肺纤维化的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词对照表 |
| 前言 |
| 1 矽肺流行病学 |
| 2 矽肺发病机制简述 |
| 3 TGF-β1/Smad信号通路及其在矽肺纤维化发病中的重要性 |
| 4 中医对矽肺的认识 |
| 5 大黄?虫丸的简述 |
| 6 本实验的研究思路和技术路线图 |
| 第一部分 :小鼠矽肺纤维化模型造模方案的确定 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 主要仪器与试剂 |
| 1.3 其他器材 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验前准备 |
| 2.2 四种造模方法 |
| 2.2.1 暴露气管注射法 |
| 2.2.2 气管插管法 |
| 2.2.3 鼻腔滴入法 |
| 2.2.4 静式染毒法 |
| 2.3 取材 |
| 2.4 数据统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 小鼠一般情况及肺组织形态学 |
| 3.2 小鼠存活率 |
| 3.3 体重及肺脏系数 |
| 3.4 小鼠肺组织HE和 Masson染色结果 |
| 4 第一部分实验结论 |
| 第二部分 :大黄?虫丸对矽肺纤维化小鼠的作用机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂和耗材 |
| 2 动物实验方法 |
| 2.1 动物模型制备及分组 |
| 2.2 大黄?虫丸药液制备 |
| 2.3 动物给药干预 |
| 2.4 动物标本采集及处理 |
| 2.5 Elisa法检测动物血清HYP、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量 |
| 2.6 小鼠肺组织病理切片及HE、Masson染色操作方法 |
| 2.7 Western-Blot操作方法 |
| 2.7.1 实验仪器 |
| 2.7.2 化学试剂 |
| 2.7.3 抗体 |
| 2.7.4 相关试剂的配制 |
| 2.7.5 具体实验步骤 |
| 2.7.6 实验结果 |
| 2.8 实时定量PCR操作方法 |
| 2.8.1 实验仪器 |
| 2.8.2 化学试剂及耗材 |
| 2.8.3 具体实验步骤 |
| 3 动物实验结果 |
| 3.1 小鼠一般情况 |
| 3.2 肺脏系数 |
| 3.3 小鼠肺组织病理结果 |
| 3.4 Elisa法检测HYP、TNF-α、IL-6、IL-1β结果 |
| 3.5 Western-Blot法检测TGF-β1/Smad通路相关蛋白的表达水平 |
| 3.6 RT-PCR法检测TGF-β1/Smad通路相关基因表达水平 |
| 4 动物实验小结 |
| 第三部分 :大黄?虫丸对SiO2诱导的矽肺纤维化细胞模型作用机制研究 |
| 1 实验方法 |
| 1.1 含药血清的制备 |
| 1.2 串联质谱法检测含药血清中三种主要指标成分 |
| 1.2.1 仪器与试剂 |
| 1.2.2 方法 |
| 1.2.2.1 样品制备 |
| 1.2.2.2 对照品溶液制备 |
| 1.2.2.3 分析条件 |
| 1.2.3 样品测定结果 |
| 1.2.4 讨论 |
| 1.3 细胞培养 |
| 1.3.1 实验材料 |
| 1.3.1.1 实验细胞 |
| 1.3.1.2 主要仪器 |
| 1.3.1.3 主要试剂和耗材 |
| 1.3.2 细胞复苏 |
| 1.3.3 细胞培养 |
| 1.3.4 细胞传代 |
| 1.3.5 细胞计数 |
| 1.3.6 细胞冻存 |
| 1.3.7 细胞模型建立 |
| 1.3.8 分组及给药 |
| 1.3.9 CCK8检测细胞活性 |
| 1.3.10 Elisa检测方法 |
| 1.3.11 Western-Blot操作方法 |
| 1.3.12 细胞免疫荧光操作方法 |
| 2 细胞实验结果 |
| 2.1 细胞一般情况 |
| 2.2 CCK8检测细胞活性 |
| 2.3 Elisa法检测细胞上清TNF-α、IL-6、IL-1β结果 |
| 2.4 Western-Blot检测TGF-β1/Smad通路相关蛋白的表达水平 |
| 2.5 细胞免疫荧光检测结果 |
| 3 细胞实验小结 |
| 第四部分 :总结与讨论 |
| 1 动物模型的评价 |
| 2 阳性药物的选择 |
| 3 各实验指标的结果分析 |
| 3.1 小鼠肺脏系数的分析 |
| 3.2 HYP、TNF-α、IL-6、IL-1β结果分析 |
| 3.3 TGF-β1/Smad通路相关蛋白及基因结果分析 |
| 3.4 大黄?虫丸治疗作用与时间、剂量的关系 |
| 4 中医对矽肺的辨证治疗 |
| 4.1 矽肺的中医病名 |
| 4.2 矽肺的中医病机分析 |
| 5 大黄?虫丸方解及作用机制讨论 |
| 第五部分 结论 |
| 第六部分 创新点 |
| 第七部分 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 大黄?虫丸的现代临床运用及治疗多脏器纤维化疾病的研究进展 |
| 1 大黄?虫丸的方源及古代文献研究 |
| 2 大黄?虫丸方义分析 |
| 3 大黄?虫丸现代临床运用范围 |
| 4 大黄?虫丸用于治疗脏器纤维化的研究进展 |
| 4.1 关于大黄?虫丸治疗肝纤维化的临床及实验研究 |
| 4.2 关于大黄?虫丸治疗肾纤维化的研究现状 |
| 4.3 关于大黄?虫丸治疗其他脏器纤维化的研究现状 |
| 5 总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附件:在读期间公开发表的学术论文、专着及科研成果 |
（3）康复新液联合积雪苷霜软膏治疗增生性瘢痕临床与实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 引言 |
| 临床疗效观察 |
| 1 研究对象 |
| 2 病例选择标准 |
| 3 研究方法 |
| 4 疗效指数 |
| 5 临床疗效判定标准 |
| 6 不良反应 |
| 7 统计学方法 |
| 兔耳增生性瘢痕实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 观察指标 |
| 4 统计学方法 |
| 研究结果 |
| 1 临床疗效观察结果 |
| 2 兔耳增生性瘢痕实验结果 |
| 讨论 |
| 1 中医学对该病的认识 |
| 2 西医对该病的认识 |
| 3 康复新液与增生性瘢痕 |
| 4 积雪苷与增生性瘢痕 |
| 5 结果分析 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 论文着作 |
| 致谢 |
（4）汉防己甲素现代药理作用研究进展（论文提纲范文）
| 1 抗肿瘤 |
| 1.1 细胞毒性 |
| 1.2 诱导凋亡 |
| 1.3 诱导自噬 |
| 1.4 抑制肿瘤细胞迁移和侵袭 |
| 1.5 细胞周期阻滞 |
| 1.6 逆转多重耐药性 |
| 2 防治多种纤维化疾病 |
| 2.1 抗肺纤维化 |
| 2.2 抗肝纤维化 |
| 2.3 其他纤维化疾病 |
| 3 抗炎 |
| 4 与其他药物的协同作用 |
| 5 其他 |
| 5.1 对缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 5.2 对神经系统的影响 |
| 5.3 其他 |
| 6 总结与展望 |
（5）粉防己碱防治肝纤维化的作用机制研究（论文提纲范文）
| 1 Tet单体抗肝纤维化研究 |
| 1.1 对细胞的作用研究 |
| 1.1.1 对肝星状细胞 (hepatic stellate cell, HSC) 活化作用的研究 |
| 1.1.2 对储脂细胞影响的研究 |
| 1.1.3 对细胞周期影响的研究 |
| 1.2 对细胞外基质、胶原蛋白、抗氧化作用的研究 |
| 1.2.1对细胞外基质合成的抑制作用研究 |
| 1.2.2 对胶原蛋白影响的研究 |
| 1.2.3 抗氧化作用研究 |
| 1.3 其他研究 |
| 2 Tet与他药配伍抗肝纤维化研究 |
| 3 汉防己复方制剂抗肝纤维化研究 |
| 4 结语与展望 |
（6）青川复合物对人增生性瘢痕成纤维细胞作用的TGF-β1/Smad蛋白信号传导通路机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词一览表 |
| 引言 |
| 文献回顾 |
| 1 增生性瘢痕形成的机理研究 |
| 2 增生性瘢痕的治疗进展 |
| 2.1 现代医学抗瘢痕治疗进展 |
| 2.2 中医药抗瘢痕治疗进展 |
| 实验研究 |
| 实验一 青川复合物对HSFb增殖、凋亡及胶原合成的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 实验二 青川复合物对HSFb的TGF-β/Smad信号转导通路的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 实验结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 研究总结 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 文献综述一 中药抗瘢痕增生作用实验研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 TGF-β/Smad信号转导与增生性瘢痕关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间主要研究成果 |
（7）青光安缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化TGF-β/Smad信号传导通路的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要设备和手术器械 |
| 1.3 主要药品和试剂 |
| 1.3.1 主要药品 |
| 1.3.2 主要试剂 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 青光眼滤过手术动物模型的建立 |
| 2.3 青光眼术后的常规检查 |
| 2.3.1 术后眼压的测量 |
| 2.3.2 滤过泡的形态 |
| 2.3.3 术眼伤口愈合情况及眼部一般情况 |
| 2.4 标本采集及处理 |
| 2.4.1 标本的采集与保存 |
| 2.4.2 石蜡切片的制作 |
| 2.5 滤过性手术区组织形态学检查 |
| 2.5.1 染色方法及步骤 |
| 2.5.2 光镜下观察 |
| 2.6 手术区组织Real-time PCR的测定 |
| 2.6.1 RNA的抽提 |
| 2.6.2 逆转录cDNA |
| 2.6.3 Real-time PCR扩增 |
| 2.7 手术区组织Western-blot的检测 |
| 3 统计学处理 |
| 第二部分 结果 |
| 1 青光眼术后的常规检查结果 |
| 1.1 眼压 |
| 1.2 术后滤过泡形态 |
| 1.3 术眼反应情况 |
| 2 滤过性手术术后标本的光镜观察 |
| 3 手术区TGF-β2、Smad3、Smad4及Collagen Ⅰ的蛋白表达 |
| 4 手术区TGF-β2、Smad3、Smad4及Collagen Ⅰ mRNA的表达 |
| 第三部分 分析与讨论 |
| 1 现代医学对青光眼术后滤过道瘢痕化的认识 |
| 2 中医学对青光眼的认识 |
| 3 导师对本病的认识 |
| 4 青光安缓释剂的分析 |
| 5 青光安有效组份对滤过道TGF-β/Smad信号通路的影响 |
| 6 问题与展望 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录1 |
| 附录2 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间主要研究成果及发表论文 |
（8）蔡瑞康教授学术经验总结及瘢痕疙瘩辨体—辨病—辨证分析与中药外治研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 正文 |
| 第一部分:蔡瑞康教授学术经验总结 |
| 一、运用中医学理论与方法诊治皮肤病的临床特色 |
| 1.局部整体结合 |
| 2.重视调理脾胃 |
| 3.从瘀论治顽疾 |
| 4.擅长取象比类 |
| 5.诠释经验名方 |
| 6.善用丹参甘草 |
| 二、运用中西医结合理念诊治皮肤病的临床特色 |
| 1.中西医并重,强调优势互补 |
| 2.中西医结合,避免生搬硬套 |
| 3.中西医渗透,初试“引中西用” |
| 4.辨病与辨证相结合 |
| 5.病证结合,遣方用药 |
| 第二部分:瘢痕疙瘩的中医体质研究 |
| 一、资料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 第三部分:瘢痕疙瘩发病的相关因素分析 |
| 一、资料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 第四部分:瘢痕疙瘩的血瘀证研究 |
| 一、资料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 第五部分:自制中药外用治疗瘢痕疙瘩临床疗效观察 |
| 一、资料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 第六部分:自制中药对瘢痕疙瘩成纤维细胞生物性状的影响 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（9）中药治疗皮肤瘢痕增生的现代研究进展（论文提纲范文）
| 1 中药对成纤维细胞的影响 |
| 1.1 中药对成纤维细胞形态及超微结构的影响 |
| 1.2 中药对成纤维细胞增殖及活力的影响 |
| 1.3 中药对成纤维细胞DNA合成的影响 |
| 1.4 中药对成纤维细胞的细胞周期及DNA相对含量的影响 |
| 1.5 中药对成纤维细胞凋亡的影响 |
| 1.6 中药对成纤维细胞的毒性作用 |
| 2 中药对胶原代谢的影响 |
| 3 中药对细胞因子的影响 |
| 4 中药对其他方面的影响 |
（10）汉防己甲素对兔PRK术后haze形成抑制作用的初步研究（论文提纲范文）
| 英文缩写词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 正文 汉防己甲素对兔 PRK 术后haze 形成抑制作用的初步研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述一 激光角膜热成形术的研究进展 |
| 综述二 汉防己甲素的药理作用及在眼科的应用 |
| 致谢 |
| 学习期间发表的论文 |
四、汉防己甲素对成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白合成的影响（论文参考文献）
- [1]雾化吸入汉防己甲素治疗肺纤维化的药效及机制研究[D]. 席苑. 中国中医科学院, 2020(01)
- [2]大黄?虫丸基于TGF-β1/Smad信号通路抑制矽肺纤维化的作用机制研究[D]. 吴丽娟. 成都中医药大学, 2020(02)
- [3]康复新液联合积雪苷霜软膏治疗增生性瘢痕临床与实验研究[D]. 杨文星. 云南中医药大学, 2020(01)
- [4]汉防己甲素现代药理作用研究进展[J]. 席苑,张海静,叶祖光,张广平. 中国中药杂志, 2020(01)
- [5]粉防己碱防治肝纤维化的作用机制研究[J]. 倪瑶,吕文良,李娟梅,张婷婷. 环球中医药, 2017(08)
- [6]青川复合物对人增生性瘢痕成纤维细胞作用的TGF-β1/Smad蛋白信号传导通路机制研究[D]. 王畅. 成都中医药大学, 2016(05)
- [7]青光安缓释剂对抗青光眼术后滤过道瘢痕化TGF-β/Smad信号传导通路的影响[D]. 欧阳云. 湖南中医药大学, 2014(01)
- [8]蔡瑞康教授学术经验总结及瘢痕疙瘩辨体—辨病—辨证分析与中药外治研究[D]. 赵庆利. 中国人民解放军军医进修学院, 2009(10)
- [9]中药治疗皮肤瘢痕增生的现代研究进展[J]. 赵庆利,蔡瑞康. 空军总医院学报, 2007(02)
- [10]汉防己甲素对兔PRK术后haze形成抑制作用的初步研究[D]. 陶丹. 重庆医科大学, 2005(05)