一、化疗对舌癌细胞增殖和细胞凋亡及Bcl-2表达的影响（论文文献综述）
文斌[1]（2021）在《塞来昔布调控microRNA200s调节大肠癌干性等指标的相关研究》文中研究表明目的:结直肠癌在临床上具有较高的发病率和死亡率,多项临床实验结果表明,长期服用塞来昔布能够有效抑制大肠癌的发生及疾病复发,但塞来昔布抑制大肠癌的机制仍未完全阐明。microRNA200家族在多种肿瘤的整个过程都起调节作用,且通过检测miR-200s的表达能够帮助判断疾病的发展及预后,临床实验结果表明miR-200s在大肠癌中下调,提示miR-200s可能参与调控大肠癌的发展。本研究旨在探讨塞来昔布通过调控人结肠癌细胞中microRNA200s来调节肿瘤干性蛋白的表达,并探讨塞来昔布通过影响EMT、自噬、凋亡等相关蛋白的表达来抑制大肠癌的发展。方法:本实验主要包括两个部分。1.第一部分通过大肠癌细胞实验检测塞来昔布调控miR-200s对肿瘤干性蛋白表达的影响。（1）塞来昔布作用人结肠癌细胞HT29和SW480后,CCK8检测癌细胞的增殖能力。（2）塞来昔布作用HT29、SW480细胞48h,通过qRT-PCR技术检测microRNA200（miR-200）家族成员的表达水平。（3）在HT29、SW480细胞中过表达miR-200b,qRT-PCR技术验证转染效率;Western blot检测癌细胞中Oct4、CD133、Lgr5、Sox2、CD44、Nanog等干性蛋白的表达。同时,抑制miR-200b后,通过qRT-PCR技术验证其抑制效果,Western blot检测癌细胞中干性相关蛋白的表达。并在抑制miR-200b后加入塞来昔布,qRT-PCR技术检测miR-200b的表达,Western blot技术检测癌细胞中干性相关蛋白的表达。2.第二部分关于塞来昔布干预或过表达miR-200b对大肠癌细胞EMT、自噬、凋亡、程序性细胞死亡配体1等相关蛋白表达的影响。（1）检测塞来昔布对HT29、SW480细胞EMT相关蛋白的调节;在癌细胞中过表达或抑制miR-200b后,检测转染细胞中EMT相关蛋白的表达。（2）塞来昔布干预HT29、SW480细胞后,流式检测各组癌细胞中活性氧（Reactive oxygen species,ROS）含量。（3）检测塞来昔布对HT29、SW480细胞自噬相关蛋白的调节;在癌细胞中过表达miR-200b后,检测自噬相关蛋白的表达。（4）检测塞来昔布对HT29、SW480细胞凋亡相关蛋白表达的调节;在癌细胞中过表达或抑制miR-200b后,检测凋亡相关蛋白的表达。（5）流式检测塞来昔布对HT29、SW480细胞凋亡的影响（Annexin V-FITC/PI原理）。（6）检测塞来昔布对HT29、SW480细胞程序性细胞死亡配体1（Programmed death-ligand 1,PD-L1）蛋白表达的调节;在癌细胞中过表达miR-200b后,检测PD-L1蛋白的表达。（7）检测36周造模大鼠大肠组织中EMT和凋亡相关蛋白的表达。结果:1.第一部分:（1）CCK8结果显示:随着塞来昔布干预剂量和时间的延长,其明显抑制HT29和SW480细胞的增殖（p<0.05）。（2）q PCR实验结果显示:塞来昔布分别促进HT29和SW480细胞中miR-200s、miR-200b/200c/141的表达（p<0.05）。（3）q PCR结果表明miR-200b的表达增加（p<0.05）,且过表达miR-200b组癌细胞中的Oct4、CD133、Lgr5、Sox2、Nanog、CD44等干性蛋白表达比对照组的表达低（p<0.05）;q PCR实验结果显示:在HT29和SW480细胞中抑制miR-200b后,其表达水平明显下调（p<0.01）,且肿瘤干性相关蛋白较对照组表达上升（p<0.01）;与对照组比较,抑制miR-200b后,接着加入塞来昔布组的miR-200b的表达增加,其癌细胞中肿瘤干性相关蛋白的表达降低,且此组较单加塞来昔布组的干性相关蛋白表达增加（p<0.05）。2.第二部分:（1）与未干预的癌细胞组相比,塞来昔布作用HT29和SW480细胞后,上皮表型标志蛋白E-钙粘的表达增加,间质表型标志蛋白N-钙粘的表达降低（p<0.05）;同对照组相比,过表达miR-200b后,E-钙粘蛋白表达增加,Vimentin和Snail蛋白的表达降低（p<0.05）;同对照组相比,抑制miR-200b后,E-钙粘蛋白表达降低,Vimentin蛋白表达增加（p<0.05）。（2）塞来昔布干预HT29和SW480细胞较对照组明显增加ROS水平（p<0.05）。（3）与对照组比较,塞来昔布干预HT29和SW480细胞后,癌细胞中自噬蛋白LC3Ⅱ和P62蛋白的表达明显增加（p<0.05）;癌细胞中过表达miR-200b后,促进了LC3Ⅱ蛋白的表达,而抑制了P62蛋白的表达（p<0.05）。（4）与未干预组比较,塞来昔布干预HT29、SW480细胞后,促凋亡蛋白Bax和细胞色素C的表达增加,抗凋亡蛋白Bcl2的表达降低（p<0.05）;过表达miR-200b后,增加了促凋亡蛋白Bax和Caspase-9的表达,降低了Bcl2蛋白的表达（p<0.05）;抑制miR-200b后,Bax蛋白的表达低于对照组,抗凋亡蛋白Bcl2蛋白的表达高于对照组（p<0.01）。（5）塞来昔布分别作用HT29、SW480细胞48h后,显着增加癌细胞的凋亡率（p<0.05）。（6）塞来昔布可抑制HT29、SW480细胞PD-L1蛋白的表达（p<0.05）;过表达miR-200b后,也降低了PD-L1蛋白的表达（p<0.05）。（7）塞来昔布干预36周较模型组大鼠组织显着抑制波形蛋白和N-钙粘蛋白的表达,增加E-钙粘蛋白水平（p<0.01）;塞来昔布干预36周较模型组大鼠组织增加Bax的表达,降低Bcl2的表达（p<0.05）。结论:塞来昔布通过调控miR-200b调节大肠癌细胞肿瘤干性指标。同时,塞来昔布干预或过表达miR-200b可调控大肠癌细胞EMT、自噬、凋亡和免疫逃逸等相关蛋白的表达。
李华[2]（2021）在《川芎嗪对结肠癌细胞的抑瘤效应及改变线粒体活性氧代谢介导凋亡通路的机制研究》文中提出背景结肠癌是消化道中常见的恶性肿瘤之一,在我国,其发病率及死亡率呈逐年上升趋势,多数患者就诊时已属于中晚期。针对晚期及复发患者,化疗是主要的治疗手段,但化疗药物存在较强的毒副反应以及药物耐药的出现严重影响结肠癌患者的治疗效果及预后。因此,亟待寻找新型的抗肿瘤药物为结肠癌患者提供新的治疗手段。传统中药是抗癌药物的宝库,川芎嗪是从川芎中提取的一种生物碱单体,川芎嗪作为川芎的主要活性成分,多项研究证实川芎嗪可对肝癌、胃癌、前列腺癌、宫颈癌和乳腺癌等多种肿瘤具有良好的抗肿瘤作用。然而,关于川芎嗪是否能抑制结肠癌细胞生长及其作用机制的研究较少。目的探讨川芎嗪对结肠癌的抗肿瘤作用,并探讨其抗结肠癌的作用机制。川芎嗪对不同结肠癌细胞的杀伤作用分析;明确川芎嗪抗结肠癌细胞增殖以及促进结肠癌细胞凋亡的作用;进一步探讨川穹嗪改变线粒体活性氧代谢介导结肠癌细胞凋亡通路的调控机制;在结肠癌荷瘤小鼠中验证川芎嗪的抗肿瘤效果。方法采用结晶紫染色法观察川芎嗪对结肠癌细胞的杀伤作用;采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）法检测细胞增殖率,观察川芎嗪作用的浓度依赖性和时间依赖性并计算IC50;通过流式细胞术检测细胞凋亡率及对细胞周期的影响;运用Annexin-V/PI双染的方法检测细胞凋亡的类型和比例;细胞内活性氧含量用DCFH-DA探针来检测;用活性氧抑制剂（NAC）和Caspase泛抑制剂（Z-VAD-FMK）联合川芎嗪作用于结肠癌细胞,观察清除活性氧及阻断凋亡相关靶蛋白后对结肠癌细胞凋亡的影响;建立结肠癌荷瘤动物模型,通过检测肿瘤组织中丙二醛和分析移植肿瘤内活性氧含量,采用Caspase 3和Caspase 9活性检测试剂盒检测移植肿瘤内Caspase 3和Caspase 9蛋白含量。结果1.川芎嗪对6种结肠癌细胞均有杀伤效果,并且随着川芎嗪药物浓度升高,结肠癌细胞存活量逐渐减少,杀伤效果在HCT116和SW480两株细胞中最为敏感。HCT116和SW480两种细胞系的IC50最低;2.随着川芎嗪浓度的增加和作用时间的延长,显微镜下细胞数减少。与对照组相比,3.川芎嗪浓度达到600μg/ml时,HCT116和SW480细胞数目显着减少,细胞收缩和圆,分裂和漂浮。随着川芎嗪浓度的增加和作用时间的延长,HCT116和SW480细胞的增殖活性逐渐降低;4.随着川芎嗪浓度的增加,G1期的细胞比例逐渐增多,S期的细胞比例逐渐减少。与对照组相比,在600μg/ml以上浓度的川芎嗪作用下,细胞周期中S期的比例与对照组相比差异有统计学意义;5.随着川芎嗪浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加,呈浓度依赖性。600μg/ml处理组细胞凋亡率具有统计学意义。SW480细胞中以早期凋亡增加（annexin+/pi-,右下象限）增加为着,HCT116细胞呈现晚期凋亡（annexin+/pi+,右上象限）增加为着;6.与DMSO对照组相比,川芎嗪组的HCT116和SW480细胞数目显着减少,细胞收缩变圆、破碎并漂浮。川芎嗪+NAC和川芎嗪+Z-VAD-FMK组与川芎嗪组相比,细胞数目明显增多。川芎嗪组相比DMSO对照组细胞凋亡率明显升高,川芎嗪+NAC和川芎嗪+Z-VAD-FMK组与川芎嗪组相比,两组凋亡率显着降低。NAC组细胞存活率高于Z-VAD-FMK 组;7.川芎嗪组活性氧含量明显增加,与DMSO组相比有显着性差异。川芎嗪+NAC组与川芎嗪处理组相比,活性氧含量显着下降。川芎嗪+Z-VAD-FMK组活性氧含量与川芎嗪处理组在SW480结肠癌细胞中无明显变化。在HCT116结肠癌细胞中川芎嗪+Z-VAD-FMK组与川芎嗪处理组相比活性氧含量有所下降;8.川芎嗪组与对照组相比,Caspase 3,9和PARP均发生明显的剪切活化,蛋白表达明显增高。川芎嗪+Z-VAD-FMK组和川芎嗪+NAC组,与川芎嗪组相比,Caspase 3,9和PARP这种活化可以被Z-VAD-FMK和NAC显着抑制;川芎嗪+NAC组Caspase 3,9和PARP表达与川芎嗪+Z-VAD-FMK组相比,表达抑制更为显着,蛋白表达降低;9.动物实验中,高浓度川芎嗪组移植瘤生长明显抑制,且呈浓度依赖性,移植瘤的重量分布为:1.62±0.48 g（浓度 0 mg/kg）、0.92±0.21 g（浓度 50 mg/kg）和 0.58±0.19 g（浓度100 mg/kg）,差异有显着性和浓度依赖性;10.川芎嗪高浓度组（100 mg/kg）的动物模型移植肿瘤中的丙二醛和Caspase3,9蛋白含量显着高于低浓度组（50 mg/kg）和对照组（0 mg/kg）,具有显着统计学差异,且有浓度依赖性。结论1.川芎嗪对结肠癌细胞有明显的抑制增殖、促进凋亡作用,并呈现时间与浓度依赖性;2.结肠癌细胞在川芎嗪作用下能够将凋亡细胞增殖阻止在G1期,进而抑制细胞周期S期的合成,从而抑制细胞增殖;3.川芎嗪诱导结肠癌细胞凋亡与产生大量活性氧从而激活Caspase依赖性细胞凋亡通路密切相关,活性氧抑制剂可以更有效抑制川芎嗪诱导的细胞凋亡;4.川芎嗪诱导结肠癌细胞内活性氧含量增高在Caspase依赖性凋亡通路的上游发挥诱导细胞凋亡的调控作用;5.川芎嗪在结肠癌裸鼠移植瘤中能显着抑制肿瘤增殖,增加裸鼠体内的活性氧和Caspase3,9的含量并诱导肿瘤细胞凋亡。
刘映坤[3]（2021）在《葫芦素B通过调控LncRNA H19的表达诱导舌鳞癌细胞凋亡》文中研究说明实验背景及目的:舌鳞状细胞癌（TSCC）是头颈部最常见的恶性肿瘤类型之一,可早期出现局部浸润和隐匿性淋巴结转移,复发率高。尽管在早期诊断、手术方式、化疗和放疗方面取得了很大的进步,但大多数TSCC患者的预后并不理想。临床中最常使用的手术治疗虽能提高患者的生存率,但对患者正常的口腔功能及颜面部的影响较大。使用化疗药物可在不影响面容的前提下显着缩小肿瘤范围,但现有的化疗药物适用范围有限且副作用较大,患者常常不能耐受,长期使用会产生耐药现象。因此寻找安全有效的抗癌药物迫在眉睫。葫芦素B（Cucurbitacin B,Cu B）作为一种四环三萜类化合物,广泛存在于葫芦科植物中。已有多项研究证实它可在体内外对多种癌症细胞产生抗肿瘤作用,主要包括抑制增殖,促进凋亡,抵抗转移,逆转多药耐药等。近年来葫芦素B通过调控非编码RNA发挥抗肿瘤作用得到广泛关注,但在舌鳞癌细胞中研究还不够深入。LncRNA H19作为最早发现的长链非编码RNA,与舌鳞癌的关系尤为密切。本研究通过探究葫芦素B对舌鳞癌细胞SCC9及CAL27细胞增殖、周期、凋亡、迁移的影响,明确葫芦素B对舌鳞癌细胞的抗肿瘤作用,并初步探索其诱导凋亡的作用机制。实验方法:1.通过CCK8法检测使用不同浓度葫芦素B处理24 h对舌鳞癌细胞SCC9、CAL27增殖的影响。明确最佳处理浓度后,使用该浓度的葫芦素B分别处理SCC9、CAL27细胞24 h、48 h、72 h检测细胞增殖的情况。2.用葫芦素B处理SCC9细胞24 h后,Annexin V-FITC/PI法染色后流式细胞仪检测细胞凋亡情况,PI法染色后流式细胞仪检测细胞周期分布情况,划痕实验检测细胞迁移愈合情况。3.选取10例舌鳞癌患者新鲜组织标本,通过qPCR检测人舌鳞癌和癌旁组织LncRNA H19、miR675-5P的表达差异。4.通过qPCR检测葫芦素B处理SCC9细胞24 h后LncRNA H19、miR675-5P表达情况。5.利用细胞转染技术将si-H19转染进舌鳞癌SCC9细胞中,构建敲低LncRNA H19的舌鳞癌SCC9细胞系。6.在舌鳞癌细胞SCC9中敲低LncRNA H19,用Annexin V-FITC/PI法染色,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。7.在分别敲低LncRNA H19及葫芦素B处理后,免疫印迹法检测舌鳞癌细胞SCC9凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。实验结果:1.在SCC9、CAL27细胞中,用梯度浓度的葫芦素B处理后,两种细胞都受到了不同程度抑制,具有浓度依赖性。随着作用时间的增长,抑制作用增强,具有时间依赖性。2.经葫芦素B处理后SCC9细胞周期阻滞于G2/M期,细胞凋亡显着增加,在24h、48h后的细胞迁移率低于对照组。3.与癌旁组织相比,LncRNA H19与miR675-5P在人舌癌组织中表达增高。4.经葫芦素B处理后miR675-5P与LncRNA H19表达均下调。5.成功构建敲低lncRNA H19的舌鳞癌SCC9细胞。6.敲低LncRNA H19后SCC9细胞凋亡率升高。7.经葫芦素B处理后SCC9细胞内Bax表达升高,Bcl-2表达显着下调;敲低LncRNA H19后SCC9细胞出现Bax表达升高,Bcl-2表达显着下调。结论:1.葫芦素B可抑制舌鳞癌细胞SCC9及CAL27增殖,诱导SCC9细胞凋亡,抑制迁移,将细胞周期阻滞于G2/M期。2.LncRNA H19、miR675-5p在人舌癌组织中过表达。3.葫芦素B通过下调LncRNA H19调控Bax及Bc L-2蛋白表达诱导SCC9细胞凋亡。
薛丹风[4]（2021）在《白花丹素通过诱导活性氧生成调控JNK、AKT/mTOR信号通路增加舌鳞状细胞癌对顺铂的化疗敏感性》文中研究说明背景:舌鳞状细胞癌（舌鳞癌）是口腔癌中最常见的上皮源性恶性肿瘤。顺铂是晚期舌鳞癌患者的首选化疗药物,但常因化疗耐药而导致疗效不佳。近年来,随着对肿瘤化疗耐药机制研究的不断深入,细胞内活性氧水平被认为是影响化疗药物发挥细胞毒性的关键因素。而舌鳞癌细胞内活性氧水平与其顺铂耐药的关系,尚未见报道。近年来,植物化学物质和传统化疗药物的组合疗法逐渐被应用于克服癌症的多药耐药,且疗效显着。白花丹素是从植物白花丹根中提取出的萘醌类植物化学物质。我们的前期研究已经证明,白花丹素在舌鳞癌中发挥显着的抗癌活性,且能够诱导细胞内活性氧生成。然而,白花丹素是否能通过调控细胞内活性氧生成发挥其细胞毒性,进而影响舌鳞癌对顺铂的化疗耐药性及其潜在作用机制尚不明确。目的:本研究的主要目的是:探索舌鳞癌细胞内活性氧水平与顺铂化疗耐药的关系;探索白花丹素是否通过诱导细胞内活性氧生成发挥其细胞毒性并影响舌鳞癌对顺铂的化疗敏感性及机制。方法:本课题采用人舌鳞癌CAL27细胞株和顺铂耐药CAL27/CDDP细胞株进行相关实验研究;CCK-8细胞活性检测试剂盒用于检测细胞活性;CM-H2DCFDA活性氧检测试剂盒、Mito SOX Red线粒体活性氧检测探针用于检测细胞内活性氧水平;克隆形成实验检测细胞增殖;DAPI细胞核染色试剂盒、流式细胞术检测细胞凋亡;Cyto-ID自噬检测试剂盒、Lyso Tracker自噬溶酶体检测探针、透射电子显微镜用于检测细胞自噬;Western Blotting用于检测凋亡、自噬及信号通路相关蛋白的表达水平;裸鼠异体移植瘤模型实验用于体内检测白花丹素和顺铂对肿瘤的抑制作用及对机体的毒副作用。结果:本研究主要发现:1.下调舌鳞癌细胞内活性氧水平,降低了顺铂的细胞毒性。2.白花丹素通过诱导细胞内活性氧产生,抑制舌鳞癌细胞活性和增殖;通过诱导活性氧生成,激活JNK、抑制AKT/m TOR信号通路诱导舌鳞癌细胞的凋亡与自噬;3.白花丹素和顺铂联合作用通过诱导舌鳞癌细胞内活性氧产生,激活JNK、抑制AKT/m TOR信号通路发挥协同抗癌作用。4.白花丹素和顺铂联合作用在裸鼠异体移植瘤模型中发挥协同抗癌作用,且对机体未产生明显的毒副作用。结论:综上所述,我们的研究表明,细胞内活性水平下调是舌鳞癌产生顺铂耐药的关键因素之一;白花丹素能通过上调细胞内活性氧水平发挥其细胞毒性作用;白花丹素和顺铂联合作用能通过上调舌鳞癌细胞内活性氧,激活JNK、抑制AKT/m TOR信号通路发挥协同抗癌作用;联合作用在裸鼠异体移植瘤模型中发挥协同抗癌作用,且未产生明显的毒副作用。
于越[5]（2021）在《双氢青蒿素通过诱导铁死亡抑制舌癌细胞Tca8113增殖的体外实验研究》文中认为目的探究双氢青蒿素（dihydroartemisinin,DHA）对舌癌细胞增殖能力的影响,并对其初步机制进行探讨,明确铁死亡是否介导了双氢青蒿素对舌癌细胞增殖抑制作用。为舌癌的治疗寻找一种低毒高效的治疗策略,改善舌癌患者的临床预后。方法体外培养人舌鳞癌Tca8113细胞株,分别进行以下实验:1、应用CCK-8试剂检测双氢青蒿素对舌癌细胞株Tca8113增殖的影响;2、应用TUNEL凋亡试剂盒检测双氢青蒿素对舌癌细胞株Tca8113凋亡的影响;3、使用PGSK探针检测细胞内铁离子的含量;4、利用荧光探针染色和流式细胞术分析细胞内活性氧（Reactive oxygen species,ROS）和脂质过氧化物（Lipid Peroxidation,LPO）水平的变化;5、谷胱甘肽测定试剂盒检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）含量的变化;6、利用Westernblot检测铁相关因子谷胱甘肽过氧化酶4（Recombinant Glutathione Peroxidase 4,Gpx4）的变化;7、观察铁死亡小分子抑制剂能否逆转双氢青蒿素对舌癌细胞增殖和凋亡水平的影响。结果1、不同浓度、不同作用时间的DHA对舌癌细胞Tca8113细胞的增殖能力有显着的抑制作用,且呈剂量依赖性;对其凋亡有促进作用,且呈剂量依赖性;2、不同浓度的DHA对Tca8113细胞的亚铁离子的含量有明显的影响;3、DHA浓度会显着增加Tca8113细胞亚铁离子含量;4、随药物浓度的增加Tca8113细胞内DCF的荧光值也随之增加,表明细胞内的活性氧（ROS）的积累能被DHA能显着激活;5、Tca8113细胞在35μmol/L浓度下诱导ROS升高。Tca8113细胞在35μmol/L浓度下诱导脂质过氧化物升高,DHA能够抑制细胞内GSH含量下降;6、DHA能够抑制细胞铁死亡相关蛋白分子GPX4的表达;7、铁死亡抑制剂Ferrostatin-1能够部分逆转DHA对舌癌细胞的增殖抑制和凋亡促进的作用,并且能够回补细胞内GSH含量及GPX4蛋白表达水平。结论1、双氢青蒿素能够显着抑制舌癌细胞的增殖能力、促进凋亡:2、双氢青蒿素对舌癌增殖和凋亡的调控作用主要是通过抑制细胞铁死亡。
李硕[6]（2021）在《柚皮素对舌鳞癌Tca8113细胞体外增殖、凋亡和迁移作用的影响》文中提出目的探究柚皮素对舌鳞癌Tca8113细胞体外增殖、凋亡和迁移作用的影响及其相关通路。方法分别用0、20、40、60、80、100μmol/L浓度的柚皮素处理舌鳞癌Tca8113细胞24、48、72h,通过MTT法检测柚皮素抑制舌鳞癌Tca8113细胞增殖作用效果,并观察和计算其半数抑制浓度;用药24h后,Annexin V-FITC/PI双染法检测0、20、40、80μmol/L浓度柚皮素对舌鳞癌Tca8113细胞凋亡的影响;Hoechst33342染色法观察0、20、40、80μmol/L浓度柚皮素处理24h后舌鳞癌Tca8113细胞凋亡形态;平板克隆实验观察0、20、40、80μmol/L浓度柚皮素处理24h后舌鳞癌Tca8113细胞克隆率;Western blot分别检测0、20、40、80μmol/L浓度柚皮素处理24h后细胞中p53、p21、Bcl-2、Bax、Caspase9、Caspase3蛋白表达的变化;细胞划痕实验检测0、20、40、80μmol/L浓度柚皮素处理24h后舌鳞癌Tca8113细胞迁移能力的变化。结果MTT结果显示,浓度为0-100μmol/L、作用时间为24、48、72h时,经柚皮素作用后的舌鳞癌Tca8113细胞的抑制率显着提升,并呈现一定浓度和时间依赖性,说明柚皮素能够抑制舌鳞癌Tca8113细胞活性。当柚皮素浓度为0-80μmol/L,作用时间为24h时,Annexin V-FITC/PI实验结果显示,柚皮素能够促进舌鳞癌Tca8113细胞凋亡;Hoechst33342染色法结果显示,伴随柚皮素浓度升高,舌鳞癌Tca8113细胞出现不同程度的细胞深染及细胞核皱缩;平板克隆实验结果显示,柚皮素能够能够降低舌鳞癌Tca8113细胞克隆形成能力;Western blot实验结果显示柚皮素能够强化p53、p21、Bax、Caspase9、Caspase3,并弱化Bcl-2的表达,;细胞划痕实验结果显示,柚皮素能够降低舌鳞癌Tca8113细胞的迁移率,上述结果均伴随浓度升高而增强作用效果。结论在一定浓度范围内,柚皮素能够显着抑制舌鳞癌Tca8113细胞的增殖且诱导其凋亡,并呈现一定的浓度和时间依赖性,其抑制作用可能与p53-p21通路Caspase级联反应相关;同时柚皮素能够显着降低舌鳞癌Tca8113细胞的迁移率,并呈现浓度依赖性。
孙兴雅[7]（2021）在《蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡和自噬的影响》文中研究指明目的探讨蛇床子素（OST）对人舌鳞癌Tca8113细胞在凋亡和自噬方面的作用及可能的机制,为蛇床子素应用于临床提供实验基础和科学依据。方法体外培养Tca8113细胞,将细胞加入浓度为(0、20、40、80、120、160、200μmol·L-1)OST并用四甲基偶氮唑盐（MTT）实验检测OST对细胞的增殖抑制作用,确定半数抑制率（IC50）;克隆形成实验检测蛇床子素对Tca8113细胞克隆形成能力的影响;通过Hoechst33342染色法和Annexin V-FITC/PI双染检测蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞24h凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、自噬相关蛋白LC3、P62以及通路相关蛋白m TOR、p-m TOR、AMPK、p-AMPK的表达情况。结果1、蛇床子素可以明显抑制Tca-8113细胞增殖,且药物对细胞的抑制呈浓度依赖性,蛇床子素24h对舌鳞癌Tca8113细胞的增殖抑制率（IC50）为154.1μmol·L-1（N=5,`X±S）。2、克隆形成实验显示,作用1周后,与对照组克隆形成能力（99.00±1.00）%比较,在40、80、120和160μmol·L-1OST作用于细胞后,克隆形成能力随药物浓度增大显着下降,分别为（92.30±2.72）%、（67.93±3.26）%、（27.67±5.86）%和（1.33±1.53）%,且差异具有统计学意义（P<0.05）。3、Hoechst33342染色结果显示,对照组Tca8113细胞核形态完整,在荧光显微镜下发出微弱的蓝光,荧光分布均匀;经OST处理后,细胞核固缩明显,染色质皱缩,胞核碎裂,随OST浓度的增大亮而致密的蓝色荧光越明显。4、流式细胞术结果显示,24h后,对照组凋亡率（3.87±1.00）%,在40、80、120和160μmol·L-1OST作用于细胞后,凋亡率分别为（11.23±5.01）%、（16.23±6.61）%、（29.47±6.70）%和（46.30±3.87）%,随药物浓度增大凋亡率逐渐增加且差异具有统计学意义（P<0.05）。5、Western blot结果显示,蛇床子素能上调Bax和Cleaved Caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达。同时增加LC3B、P62和p-AMPK的表达,降低LC3Ⅰ、p-m TOR的表达（P<0.05）。结论蛇床子素能抑制人舌鳞癌Tca8113细胞增殖,促进细胞凋亡,并可能通过AMPK/m TOR通路诱导细胞自噬。
马曌磊[8]（2021）在《MET激酶抑制剂BMS-777607对舌鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及相关机制研究》文中进行了进一步梳理目的探讨MET激酶抑制剂BMS-777607对舌鳞癌细胞CAL27细胞增殖、凋亡和迁移的影响,并探讨其相关机制。方法将不同浓度的MET激酶抑制剂BMS-777607分别作用于舌鳞癌细胞CAL27细胞,通过MTT法、克隆形成实验及Ed U细胞成像实验检测BMS-777607对舌鳞癌细胞增殖的影响;通过Heochst33342染色观察BMS-777607对舌鳞癌细胞凋亡情况的影响;通过JC-1染色检测BMS-777607对舌鳞癌细胞线粒体膜电位的影响;通过划痕实验、Transwell实验检测BMS-777607对舌鳞癌细胞迁移能力的影响;通过Western blot检测BMS-777607对舌鳞癌细胞中增殖蛋白AKT、p-AKT,凋亡相关蛋白Bcl-2、Cleaved caspase-3、Bax、Parp表达的影响。结果MTT结果显示,实验组细胞增殖率随药物浓度增大而降低（P<0.01）。克隆形成实验结果显示,与对照组相比,实验组细胞生长缓慢,10μmol/L组几乎处于静止期,未见明显克隆团;实验组细胞增殖率随药物浓度增大而降低（P<0.01）。Ed U细胞成像实验显示实验组细胞在绿光激发下细胞核数量明显减少,细胞增殖率随药物浓度增大而降低（P<0.01）。Hoechst33342染色结果显示对照组细胞形态规则,胞核完整,染色均匀;5μmol/L组出现多数细胞核高亮度荧光染色,不同程度固缩、碎裂;10μmol/L组大部分细胞细胞核呈高亮荧光染色,固缩、碎裂更明显。JC-1结果显示对照组细胞线粒体膜电位呈较强红色荧光,实验组细胞线粒体膜电位呈绿色荧光,绿色荧光随药物浓度的增加而增强。划痕实验结果显示,实验组与对照组相比,细胞迁移率随药物浓度增大而降低,迁移率和作用时间呈正相关（P<0.01）。Transwell迁移实验显示,实验组比对照组穿过Transwell小室的细胞数目减少,迁移率随药物浓度增大而减少（P<0.01）。Western检测结果显示,与对照组相比,实验组Bcl-2、p-AKT的蛋白表达水平显着降低,Cleaved caspase-3、Bax、Parp的蛋白表达水平显着升高,且呈浓度依赖性（P<0.01）;AKT表达水平无显着性变化（P>0.05）。结论BMS-777607作为MET激酶抑制剂,可抑制舌鳞癌细胞CAL27细胞的增殖、迁移且促进其凋亡,其机制可能与PI3K/AKT通路以及线粒体途径通路有关。
姜翀[9]（2020）在《CAY10526对舌鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞周期的影响》文中提出研究背景口腔鳞状细胞癌（Oral Squamous Cell Carcinoma,OSCC）是临床上常见的恶性肿瘤之一。OSCC的发病率呈逐年上升的趋势,OSCC多采用以手术为主的综合治疗,对患者的面容破坏较大,严重影响了患者的生存质量。因此对于OSCC的化学预防和治疗成为新的研究热点。前列腺素E2（Prostaglandin E2,PGE2）是一种促炎介质,属于生物活性脂类家族。大量研究发现PGE2在不同肿瘤中的表达上调,并且PGE2能够促进肿瘤的发生发展,包括促进肿瘤细胞增殖,耐受凋亡信号,血管生成增加,侵袭和转移能力的增强以及逃避宿主免疫应答。它主要由环氧化酶（cyclooxygenase,COX）和膜结合型前列腺素E合成酶1（membrane-bound PGE2 synthase-1,mPGES-1）产生。COX-2在许多癌症中被作靶向进行研究,其中包括口腔鳞癌、乳腺癌、前列腺癌等。近年来经过大量研究证实,长期服用COX-2抑制剂等非甾体抗炎药对胃肠道和心血管系统有很严重的副作用,因此激发我们探索下游mPGES-1及其相关作用机制。但目前,mPGES-1在口腔癌发生发展过程中的作用鲜有报道。因此,为进一步探究mPGES-1在口腔癌发生发展中的作用,本研究选用不同浓度梯度mPGES-1抑制剂CAY10526作用舌癌细胞株CAL27,并探讨其对生物学特性的影响。研究目的1.明确mPGES-1在口腔癌中的表达情况。2.探究mPGES-1抑制剂CAY10526对舌癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。3.探究mPGES-1抑制剂CAY10526对舌癌细胞细胞凋亡和细胞周期的影响。材料与方法1.利用TCGA数据库检测mPGES-1在正常组织及肿瘤中的表达情况。采用免疫组织化染色法检测口腔癌及癌旁组织中mPGES-1的表达情况,运用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）和 Western Blot检测舌癌细胞株CAL27和SCC-15 中mPGES-1的表达。2.应用CCK-8检测mPGES抑制剂CAY1056对舌癌细胞增殖能力的影响,运用划痕实验、Transwell迁移侵袭实验检测CAY1056对舌癌细胞迁移和侵袭能力的影响。3.应用流式细胞分选法检测CAY1056对舌癌细胞凋亡和细胞周期的影响,同时采用Western Blot检测凋亡、周期相关蛋白的表达。结 果1.TCGA数据库分析得到,mPGES-1在头颈鳞癌中差异表达,且表达升高。口腔鳞癌组织中mPGES-1的表达高于癌旁组织。通过qRT-PCR结果显示,舌癌细胞株CAL27中mPGES-1的表达量高于舌癌细胞株SCC-15,Western Blot结果与qRT-PCR结果一致。2.CAY10526能抑制舌癌细胞的增殖,且50μM组CAY10526处理细胞后,细胞的增殖能力明显减弱;CAY10526能抑制舌癌细胞迁移,且50μM组CAY10526效果最显着,迁移细胞数为37.00±7.81个,显着低于对照组150.3±2.96个;CAY10526能抑制舌癌细胞侵袭,且50μM组CAY10526效果最显着,侵袭细胞数为30.33±7.31个,显着低于对照组110.00±5.13个。3.CAY10526能促进舌癌细胞的凋亡,且50μM组CAY10526效果最显着,凋亡率为（16.90±0.45）%,低于对照组（4.34±0.29）%;CAY10526改变细胞周期,使细胞阻滞在G1期,50μM组CAY10526阻滞效果最显着,G1期细胞百分比为（92.11±0.83）%,显着高于对照组（44.24±0.36）%。结 论1.mPGES-1在舌癌中高表达。2.mPGES-1抑制剂CAY10526能抑制舌癌细胞的增殖、迁移和侵袭。3.mPGES-1抑制剂CAY10526通过下调BCL-2的表达,上调BAX的表达促进舌癌细胞的凋亡,通过下调Cyclin D1和CDK4的表达,阻滞细胞位于G1期。
李亚[10]（2020）在《新加良附方调控miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路抑制胃癌的机制研究》文中指出我国是胃癌大国,中西医结合治疗是我国胃癌综合治疗的独特模式。临床实践证实采用新加良附方（高良姜、香附、穿山龙）联合化疗针对进展期胃癌较单纯化疗具有更高的临床缓解率和更优的生活质量。机制研究发现新加良附方抗胃癌作用与调控凋亡相关基因表达有关,但其上游调控机制尚未明确。基于前期基础,本研究拟从microRNA角度,深入探讨新加良附方及穿山龙主要成分薯蓣皂苷元对miR-34a/SIRT1/p53通路及miR-34a凋亡相关靶基因的调控作用和对凋亡信号通路的激活作用,明确新加良附方及薯蓣皂苷元的作用机制,为新加良附方治疗胃癌提供基础研究依据。目的通过体内外实验明确新加良附方及成分薯蓣皂苷元对人胃癌细胞功能的抑制作用,基于miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路,明确新加良附方及薯蓣皂苷元抗胃癌作用机制。方法1.新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞功能作用及机制研究①新加良附方及薯蓣皂苷元抑制人胃癌细胞功能实验:CCK-8实验检测新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞增殖的作用,流式细胞术检测新加良附方及薯蓣皂苷元对胃癌细胞周期及凋亡的调控作用,划痕实验检测新加良附方抑制胃癌细胞迁移作用;②新加良附方、薯蓣皂苷元调控miR-34a作用:qPCR检测正常胃黏膜上皮细胞及胃癌细胞miR-34a表达,慢病毒感染构建过表达mi R-34a的胃癌HGC-27细胞,CCK-8方法检测过表达miR-34a胃癌HGC-27细胞增殖功能,划痕实验检测过表达mi R-34a胃癌细胞迁移能力,并通过qPCR方法检测新加良附方、薯蓣皂苷元对miR-34a基因水平影响;③新加良附方、薯蓣皂苷元调控miR-34a抗胃癌作用机制研究:qPCR方法检测过表达miR-34a后HGC-27细胞miR-34a/SIRTl/p53通路及miR-34a靶基因表达水平,qPCR方法检测新加良附方、薯蓣皂苷元对miR-34a/SIRT1/p53通路、miR-34a靶基因及Caspase凋亡通路的作用,Western blot检测新加良附方、薯蓣皂苷元对Caspase凋亡通路作用。2.新加良附方及薯蓣皂苷元对裸鼠胃癌移植瘤抑制作用及机制研究BSP方法检测胃癌细胞miR-34a甲基化水平,并构建HGC-27胃癌细胞荷瘤小鼠模型,设正常对照组、模型组、新加良附方中剂量组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组、5-Aza-CdR组、中剂量联合组及高剂量联合组,药物干预18天,观察裸鼠一般状态;测量移植瘤长短径,计算瘤体积和抑瘤率,观察裸鼠生存期;qPCR方法检测miR-34a表达情况;Western blot方法检测miR-34a/SIRT1/p53相关蛋白表达及Caspase凋亡通路情况。结果1.新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞功能作用及机制研究新加良附方抑制人胃癌细胞功能实验:新加良附方呈浓度及时间依赖性地抑制HGC-27、MGC80-3及AGS细胞增殖;新加良附方提高G1期HGC-27细胞,降低G2期细胞;新加良附方可诱导HGC-27及MGC80-3细胞凋亡,其中诱导HGC-27细胞凋亡作用显着;与对照组比较,新加良附方组除24h 4mg/mL浓度外,其余各组均可抑制胃癌HGC-27细胞迁移功能,作用呈时间及浓度依赖性;新加良附方可显着抑制MGC80-3细胞迁移功能,作用呈时间依赖性,差异有统计学意义;各浓度新加良附方24h及48h均可抑制AGS细胞迁移;薯蓣皂苷元抑制人胃癌细胞功能实验:薯蓣皂苷元呈时间及浓度依赖性地抑制胃癌HGC-27、MGC80-3及AGS细胞增殖作用,差异有统计学意义;薯蓣皂苷元干预后胃癌细胞周期无明显改变;薯蓣皂苷元可诱导HGC-27及MGC80-3细胞凋亡,其中诱导HGC-27细胞凋亡作用显着;新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a作用:HGC-27、MGC80-3及AGS细胞中miR-34a相对表达量显着低于正常细胞GES-1,p<0.05;与阴性对照组相比较,过表达miR-34a后,HGC-27细胞增殖能力受到显着抑制,并可显着抑制其迁移能力;新加良附方及薯蓣皂苷元干预后,HGC-27及AGS细胞miR-34a表达水平升高,p<0.01;新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a抗胃癌作用机制研究:过表达miR-34a显着上调p53并下调SIRT1表达水平,可提高Bax及Caspase-3 mRNA表达水平,降低Bcl-2及Survivin的mRNA表达水平;新加良附方及薯蓣皂苷元干预可提高p53表达,降低SIRT1表达水平,并可上调Bax及Caspase-3的mRNA表达水平,降低Bcl-2及Survivin的mRNA表达水平,p<0.01,差异有统计学意义;Z-VAD-FMK可降低新加良附方及薯蓣皂苷元诱导的HGC-27细胞凋亡;新加良附方作用后可降低Caspase-9、Caspase-3前体水平,升高活化Caspase-3的表达水平;2.新加良附方及薯蓣皂苷元对裸鼠胃癌移植瘤抑制作用及机制研究胃癌细胞HGC-27在miR-34a各位点甲基化水平均较高,选取HGC-27细胞构建胃癌荷瘤小鼠模型,药物干预后观察到新加良附方中剂量组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组及中剂量联合组、高剂量联合组裸鼠状态较好,反应灵敏,活动及饮食、饮水量正常,5-Aza-CdR组裸鼠一般状态较差。5-Aza-CdR组裸鼠体重于实验给药第8天后逐渐下降,第11天其体重低于新加良附方高剂量组,差异有统计学意义,第15天,其体重低于模型组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组及高剂量联合组,p<0.05,第18天,其体重低于其余各组,p<0.05,差异有统计学意义。5-Aza-CdR组抑瘤率为32.08%,与模型组比较,p>0.05,差异无统计学意义,中剂量联合组抑瘤率为35.00%,高剂量联合组抑瘤率为37.18%,与模型组相比较,p<0.05,差异有统计学意义。模型组平均生存时间为46.33±10.50天,新加良附方中剂量组、新加良附方高剂量组、薯蓣皂苷元组、中剂量联合组及高剂量联合组裸鼠均未出现死亡现象,平均生存时间为57.00±0.00天,具有延长荷瘤裸鼠生存时间的趋势,5-Aza-CdR组裸鼠平均生存时间为40.33±7.37天,生存时间较模型组短。除新加良附方中剂量组外,其余各治疗组均可提高胃癌miR-34a表达,以联合组作用最为显着;新加良附方中剂量、高剂量、薯蓣皂苷元及高剂量联合组均可显着增加p53蛋白的表达,且药物干预各组均可显着抑制SIRT1 蛋白的表达,可降低 Bcl-2、Survivin 表达,并提高 Bax、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9 及 Caspase-3 底物 Cleaved PARP 蛋白的表达。结论1.miR-34a表达水平异常与胃癌发生密切相关;2.新加良附方可抑制胃癌细胞增殖及迁移、调节细胞周期、诱导凋亡,其成分薯蓣皂苷元可抑制胃癌细胞增殖,并诱导胃癌细胞凋亡,机制可能与调控miR-34a/SIRT1/p53通路、miR-34a凋亡相关靶基因及激活Caspase凋亡通路相关;3.新加良附方联合5-Aza-CdR可抑制胃癌裸鼠移植瘤生长,并可改善裸鼠一般状态,有维持体重、延长其生存时间的趋势,机制可能与调控miR-34a/SIRT1/p53通路、miR-34a凋亡相关靶蛋白及Caspase凋亡信号通路相关。
二、化疗对舌癌细胞增殖和细胞凋亡及Bcl-2表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、化疗对舌癌细胞增殖和细胞凋亡及Bcl-2表达的影响（论文提纲范文）
（1）塞来昔布调控microRNA200s调节大肠癌干性等指标的相关研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 塞来昔布通过多种机制调控肿瘤的发展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（2）川芎嗪对结肠癌细胞的抑瘤效应及改变线粒体活性氧代谢介导凋亡通路的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 文献研究 |
| 第一章 中医对结直肠癌病因病机及治疗的认识 |
| 1. 引言 |
| 2. 病症名称的历史沿革 |
| 3. 结直肠癌病因病机 |
| 4. 结直肠癌中医证候研究现状 |
| 5. 结直肠癌中医药治疗 |
| 6. 单味中药及其主要成分治疗结直肠癌的实验研究 |
| 7. 展望 |
| 参考文献 |
| 第二章 川芎研究概述 |
| 1. 引言 |
| 2. 川芎的历史沿革 |
| 3. 川芎的功效与应用 |
| 4. 川芎主要有效成分川芎嗪的药理作用及临床外科应用 |
| 5. 展望 |
| 参考文献 |
| 第三章 川芎嗪在消化系统肿瘤中的抗癌机制研究进展 |
| 1. 引言 |
| 2. 抑制肿瘤细胞增殖 |
| 3. 促进肿瘤细胞凋亡和自噬 |
| 4. 诱导肿瘤细胞活性氧的生成 |
| 5. 抑制肿瘤细胞侵袭与转移 |
| 6. 抑制肿瘤组织血管生成 |
| 7. 逆转肿瘤细胞多药耐药 |
| 8. 展望 |
| 参考文献 |
| 第四章 活性氧信号通路与肿瘤的研究进展 |
| 1. 引言 |
| 2. ROS的来源与调节 |
| 2.1 ROS的来源 |
| 2.2 ROS的调节 |
| 3. ROS相关信号通路 |
| 3.1 ROS促进细胞增殖 |
| 3.2 DNA损伤和遗传不稳定 |
| 3.3 适应性 |
| 3.4 细胞死亡 |
| 3.5 自噬 |
| 3.6 抗药性 |
| 4. ROS在肿瘤治疗中的作用 |
| 4.1 诱导肿瘤细胞死亡 |
| 4.2 抑制肿瘤细胞增殖 |
| 5. 展望 |
| 参考文献 |
| 第二部分 川芎嗪对结肠癌细胞增殖及凋亡的影响 |
| 引言 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要试剂配制 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 细胞形态学实验 |
| 2.3 结晶紫染色测定细胞活性 |
| 2.4 CCK-8法检测细胞增殖 |
| 2.5 细胞周期检测 |
| 2.6 Annexin V/PI凋亡检测 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3. 实验结果 |
| 3.1 TMP显着抑制结肠癌细胞增殖 |
| 3.2 TMP对结肠癌细胞的抑制作用具有浓度和时间依赖性 |
| 3.3 TMP通过抑制结肠癌细胞周期S期合成抑制细胞增殖 |
| 3.4 TMP诱导结肠癌细胞发生凋亡 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 活性氧对川芎嗪诱导的结肠癌细胞凋亡的调控机制研究 |
| 引言 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要试剂配制 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 DCFH-DA探针细胞内ROS检测 |
| 2.2 蛋白印迹实验（Western blot) |
| 2.3 统计学分析 |
| 3. 结果 |
| 3.1 TMP通过促进细胞内ROS产生来诱导结肠癌细胞发生凋亡 |
| 3.2 使用DCFH-DA探针检测结肠癌细胞内ROS的变化情况 |
| 3.3 TMP通过ROS介导结肠癌细胞发生线粒体途径凋亡 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 川芎嗪在裸鼠移植肿瘤中诱导凋亡作用 |
| 引言 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 主要材料 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 裸鼠移植肿瘤模型 |
| 2.2 丙二醛(MDA)检测 |
| 2.3 Caspase 3和Caspase 9蛋白活性检测 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3. 结果 |
| 3.1 TMP在裸鼠移植肿瘤中具有抑制肿瘤增殖的效果 |
| 3.2 TMP增加裸鼠移植肿瘤内ROS积累并诱导凋亡 |
| 4. 讨论 |
| 5. 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 总结与展望 |
| 附录 |
| 攻读博士期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（3）葫芦素B通过调控LncRNA H19的表达诱导舌鳞癌细胞凋亡（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第1章 舌鳞癌研究进展 |
| 1.1 舌鳞癌的易感因素及流行病学研究 |
| 1.2 舌鳞癌诊断及治疗 |
| 第2章 葫芦素B研究进展 |
| 2.1 葫芦素B结构 |
| 2.2 葫芦素B的药理作用 |
| 2.2.1 葫芦素B的保肝作用 |
| 2.2.2 葫芦素B的抗炎作用 |
| 2.2.3 葫芦素B对心血管疾病的影响 |
| 2.2.4 葫芦素B的抗肿瘤作用 |
| 第3章 LNCRNA H19 研究进展 |
| 3.1 LNCRNA概述 |
| 3.2 LNCRNAH19 与肿瘤的关系 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第1章 葫芦素B对舌鳞癌细胞增殖、凋亡、周期及迁移的影响 |
| 1.1 材料与方法 |
| 1.1.1 材料 |
| 1.1.2 方法 |
| 1.2 实验结果 |
| 1.2.1 葫芦素B对舌鳞癌细胞增殖的影响 |
| 1.2.2 葫芦素B对舌鳞癌细胞周期的影响 |
| 1.2.3 葫芦素B对舌鳞癌细胞凋亡的影响 |
| 1.2.4 葫芦素B对舌鳞癌细胞迁移的影响 |
| 第2章 葫芦素B诱导舌鳞癌凋亡的机制研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.2.1 LncRNA H19 在舌癌和癌旁组织中表达量的检测 |
| 2.2.2 葫芦素B对 LncRNA H19 表达的影响 |
| 2.2.3 构建敲低LncRNA H19 的舌鳞癌SCC9 细胞 |
| 2.2.4 敲低LncRNA H19 对舌鳞癌SCC9 凋亡的影响 |
| 第3章 讨论 |
| 第4章 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（4）白花丹素通过诱导活性氧生成调控JNK、AKT/mTOR信号通路增加舌鳞状细胞癌对顺铂的化疗敏感性（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 引言 |
| 第2章 舌鳞癌细胞内ROS水平调控顺铂细胞毒性的作用与机制 |
| 2.1 背景 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 下调舌鳞癌细胞内ROS水平,降低了顺铂对细胞活性的抑制作用 |
| 2.3.2 上调CAL27/CDDP细胞内ROS水平,增加了顺铂诱导的细胞凋亡 |
| 2.3.3 上调CAL27/CDDP细胞内ROS水平,增加了顺铂诱导的细胞自噬 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论 |
| 第3章 白花丹素通过调控舌鳞癌细胞内ROS水平,发挥细胞毒性的作用与机制 |
| 3.1 背景 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 白花丹素抑制CAL27和CAL27/CDDP细胞活性并诱导细胞内ROS生成 |
| 3.3.2 白花丹素通过诱导ROS生成抑制CAL27和CAL27/CDDP细胞活性和增殖 |
| 3.3.3 白花丹素诱导CAL27和CAL27/CDDP细胞凋亡 |
| 3.3.4 白花丹素诱导CAL27和CAL27/CDDP细胞自噬 |
| 3.3.5 白花丹素通过诱导ROS生成,调控JNK、AKT/mTOR信号通路诱导舌鳞癌细胞凋亡与自噬 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 第4章 白花丹素与顺铂联合作用发挥协同抗癌的作用与机制 |
| 4.1 背景 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 白花丹素联合顺铂作用发挥协同抑制舌鳞癌细胞活性作用 |
| 4.3.2 白花丹素增加了顺铂对舌鳞癌细胞的凋亡诱导作用 |
| 4.3.3 白花丹素增加了顺铂对舌鳞癌细胞的自噬诱导作用 |
| 4.3.4 白花丹素联合顺铂作用通过生成ROS,激活JNK、抑制AKT/m TOR信号通路诱导舌鳞癌细胞自噬与凋亡 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 结论 |
| 第5章 裸鼠异种移植瘤模型体内验证白花丹素与顺铂的协同抗癌作用 |
| 5.1 背景 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 实验材料 |
| 5.2.2 实验方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 结论 |
| 第6章 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 ROS 在癌症化疗耐药中的作用和意义 |
| 参考文献 |
（5）双氢青蒿素通过诱导铁死亡抑制舌癌细胞Tca8113增殖的体外实验研究（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述 DHA抗肿瘤分子生物学机制研究进展 |
| 参考文献 |
| 二、在学期间科研成绩 |
| 三、致谢 |
| 四、个人简介 |
（6）柚皮素对舌鳞癌Tca8113细胞体外增殖、凋亡和迁移作用的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述 柚皮素抗肿瘤的相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 二、在学期间科研成绩 |
| 三、致谢 |
| 四、个人简介 |
（7）蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡和自噬的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述 蛇床子素抗肿瘤作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 二、在学期间科研成绩 |
| 三、致谢 |
| 四、个人简介 |
（8）MET激酶抑制剂BMS-777607对舌鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及相关机制研究（论文提纲范文）
| 中文论着摘要 |
| 英文论着摘要 |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 一、文献综述MET 激酶抑制剂 BMS-777607 的相关研究进展 |
| 参考文献 |
| 二、在学期间科研成绩 |
| 三、致谢 |
| 四、个人简介 |
| 五、附图 |
（9）CAY10526对舌鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞周期的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一章 mPGES-1在口腔鳞癌中的表达情况 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第二章 mPGES-1抑制剂CAY10526对舌鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 第三章 mPGES-1抑制剂CAY10526对舌鳞癌细胞凋亡和细胞周期的影响 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 英文缩写词 |
| 临床病例 |
| 病例一 |
| 病例二 |
| 病例三 |
| 病例四 |
| 病例五 |
| 成果 |
| 发表文章 |
| 参与会议 |
| 教学实践 |
| 获得奖项 |
| 致谢 |
（10）新加良附方调控miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路抑制胃癌的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 中药抗胃癌基础研究现状与进展 |
| 1 中药有效成分基础研究 |
| 2 单味中药基础研究 |
| 3 复方基础研究 |
| 4 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 胃癌相关miRNA研究现状与展望 |
| 1 miRNA在胃癌发生发展中的作用研究 |
| 2 miRNA在胃癌诊断治疗中的作用研究 |
| 3 思考与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 新加良附方及薯蓣皂苷元抑制胃癌细胞功能作用及机制研究 |
| (一) 新加良附方抑制人胃癌细胞功能实验 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| (二) 薯蓣皂苷元抑制人胃癌细胞功能实验 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| (三) 新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a作用 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| (四) 新加良附方及薯蓣皂苷元调控miR-34a抗胃癌作用机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 新加良附方及薯蓣皂苷元对裸鼠胃癌移植瘤抑制作用及机制研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
四、化疗对舌癌细胞增殖和细胞凋亡及Bcl-2表达的影响（论文参考文献）
- [1]塞来昔布调控microRNA200s调节大肠癌干性等指标的相关研究[D]. 文斌. 遵义医科大学, 2021(01)
- [2]川芎嗪对结肠癌细胞的抑瘤效应及改变线粒体活性氧代谢介导凋亡通路的机制研究[D]. 李华. 南京中医药大学, 2021(01)
- [3]葫芦素B通过调控LncRNA H19的表达诱导舌鳞癌细胞凋亡[D]. 刘映坤. 吉林大学, 2021(01)
- [4]白花丹素通过诱导活性氧生成调控JNK、AKT/mTOR信号通路增加舌鳞状细胞癌对顺铂的化疗敏感性[D]. 薛丹风. 南昌大学, 2021(01)
- [5]双氢青蒿素通过诱导铁死亡抑制舌癌细胞Tca8113增殖的体外实验研究[D]. 于越. 锦州医科大学, 2021(01)
- [6]柚皮素对舌鳞癌Tca8113细胞体外增殖、凋亡和迁移作用的影响[D]. 李硕. 锦州医科大学, 2021(01)
- [7]蛇床子素对人舌鳞癌Tca8113细胞凋亡和自噬的影响[D]. 孙兴雅. 锦州医科大学, 2021(01)
- [8]MET激酶抑制剂BMS-777607对舌鳞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及相关机制研究[D]. 马曌磊. 锦州医科大学, 2021(01)
- [9]CAY10526对舌鳞状细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡和细胞周期的影响[D]. 姜翀. 南方医科大学, 2020(01)
- [10]新加良附方调控miR-34a/SIRT1/p53及Caspase凋亡通路抑制胃癌的机制研究[D]. 李亚. 北京中医药大学, 2020(04)