一、小型猪胃肠道外科手术模型简介（论文文献综述）
余发坤[1]（2021）在《“移形吻合术”联合5-FU治疗肝门部良性胆管狭窄及预防再狭窄的实验研究》文中研究指明目的:比较“移形吻合术”联合5-FU和单纯使用“移形吻合术”在肝门部胆管良性狭窄中的治疗效果,探讨“移形吻合术”联合5-FU治疗肝门部胆管良性狭窄及预防手术后再狭窄的安全性和有效性。方法:将30头雌性小型猪随机分为A、B、C 3组,其中A、B组为对照组,C组为实验组。建立肝门部良性胆管狭窄模型,待胆管狭窄形成后仅将A组小型猪狭窄段胆管分离出后关腹。B组小型猪在分离出狭窄段胆管后对其行“移形吻合术”治疗。C组在B组的基础上在“移形吻合术”完成后于吻合口周围放置中人氟安。观察术后各组小型猪的饮食情况、精神状态以及尿液颜色的变化,并检测手术完成后7天、15天、30天、60天、90天血常规及肝功能的变化。在所有手术完成3个月后处死所有的小型猪,提取每只小型猪狭窄段胆管组织,行病理学检查和PCR检测。结果:本实验自手术日起共观察90天,期间共有2头小型猪死亡,1头在手术后14天死于感染,1头在术后32天死于肝功能衰竭,其余小型猪均存活至研究终点。A组小型猪术后饮食情况、精神状态及尿液颜色与术前无明显差异,体重也逐渐下降。术后各时段里A组小型猪WBC计数与术前无显着差异（P>0.05）,RBC计数较术前降低（P<0.05）,与术前相比PLT计数在术后7天时降低（P<0.05）,而后又逐渐恢复至术前水平,肝功能检查各指标数值均大于术前,且进行性升高（P<0.05）。在术后5～8天的时间里,B、C两组的饮食量以及精神状态较术前逐渐恢复,尿液颜色也逐渐变淡,至手术后90天B、C组小型猪体重已恢复至模型制作前。B、C组术后血常规中WBC计数在术后15天时小于术前（P<0.05）,而后趋于平稳,RBC及PLT计数在术后7天时小于术前水平（P<0.05）,而后出现回升。肝功能检查指标数值较手术前均低,并逐渐下降（P<0.05）,自手后30天起C组小型猪的肝功能检查指标下降程度比B组明显（P<0.05）。病理学检查见C组小型猪狭窄段胆管上皮细胞炎性增生及胆管壁增厚程度较A、B组轻。PCR的结果显示C组小型猪狭窄段胆管内TGF-β1、PDGF和CTGF m RNA的表达水平比A组及B组小型猪的表达水平低（P<0.05）;而A组和B组小型猪间各项m RNA的表达水平无显着差异（P>0.05）。结论:1.“移形吻合术”联合5-FU在对肝门部胆管良性狭窄的治疗中是安全可行的。2.“移形吻合术”联合5-FU可以用来治疗肝门部胆管的良性狭窄,并能在一定程度上预防吻合口再狭窄的形成。3.“移形吻合术”联合5-FU对肝门部胆管良性狭窄的治疗效果要优于单纯运用“移形吻合术”。综上所述,在对肝门部胆管良性狭窄的治疗中,“移形吻合术”联合5-FU是一种安全有效的治疗方式,同时它在预防术后吻合口再狭窄也有一定的作用,值得我们进一步的研究。
高海欣[2]（2021）在《消化道梗阻下超声内镜引导胃肠吻合对代谢功能障碍相关脂肪性肝病的脂代谢的治疗作用及机制研究》文中指出目的:代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）是与胰岛素抵抗和遗传易感密切相关的以肝细胞大泡性脂肪变为病理特征的慢性代谢应激性肝脏疾病,疾病谱主要包括非酒精性单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）及其相关的肝硬化和肝细胞癌（HCC）[1]。随着肥胖的增加,代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）目前已成为发展为肝病的焦点问题。在全球,MAFLD发病率逐年升高,其中胰岛素抵抗是肥胖型MAFLD的第一步开始[2]。在2型糖尿病患者中,MAFLD的发病率为76%。消化道梗阻下超声内镜胃肠吻合是一种新的术式,在幽门进行闭合后,在超声内镜引导下行胃肠吻合,从而食物无法在十二指肠及近端空肠通过,达到食物的吸收减少,进一步缓解MAFLD中肝脏中酶学异常。由于其他的干预措施方式（包括运动、健康教育、生活方式干预）治疗肥胖具有疗效短,不易控制等特点。减重代谢手术目前可作为首选治疗措施。与其他治疗方式相比,具有稳定性及持续性长久等优势。从单纯限制食物的摄入和吸收到通过肠道菌群途径、表观遗传学途径,胆汁酸途径改善患者的代谢水平,减重代谢手术方式也得到了不断完善。目前,在世界范围内最广泛采用的包括三种:腹腔镜袖状胃切除术（Laparoscopic sleeve gastractomy,LSG）、腹腔镜Roux-en-Y胃旁路术或转流术（Laparoscopic Roux-en-y gastric bypass,LYRGB）、以及胆胰分流并十二指肠转位术（biliopancreatic diversion with duodenal switch,BPD-DS）[2]。腹腔镜下的手术虽然外表创伤性小,却都有将胃切掉,及解剖结构改变,不易恢复等特点,术后并发症较多。而消化道梗阻下超声内镜下胃肠吻合中制造消化道梗阻模型中可选择幽门放置可回收双球囊法,行超声内镜引导下胃肠吻合,待肝功能控制恢复好转后,择期行球囊及支架取出,从而完成解剖结构的恢复正常,且疾病的治愈作用。本研究拟对临床上行消化道梗阻的患者行超声内镜下胃肠吻合进行回顾性研究,观察其术后主要并发症,评估EUS-GE的安全有效性。再此基础上,通过造模,对MAFLD动物行幽门闭合及超声引导下胃肠吻合,探讨术后对肝功能缓解作用及对脂代谢的研究及可能的潜在机制。研究方法:本研究首先回访2018年1月-2020年10月期间于我院行内镜超声引导下胃肠吻合患者纳入研究,观察指标为行超声内镜下胃肠吻合的成功率,白细胞计数及术后生存时间,支架取出时间及支架移位率。并通过双锚锁定器对支架进行固定,评价超声内镜引导下双锚锁定器固定支架方法安全有效性,对EUS-GE术后并发症进行干预。通过造就MAFLD及消化道梗阻模型,行EUS-GE手术,术后记录巴马香猪的手术情况,术中及术后的并发症,正常饲喂3个月,并检测如下指标:（1）体重、进食量;（2）血清学指标:术日、术后4、8、12周采血,检测白蛋白,ALT,r-gt,甘油三酯,胆固醇水平;（3）术后12周处死动物,取肝脏标本,分别进行HE染色和油红O染色,在形态学方面判断其脂肪聚集情况;（4）Western Blot及qt-pcr方法检测肝脏脂肪生成的关键酶:脂肪酸合酶（fatty acid synthase,FAS）及甘油三酯分解的产物非酯化脂肪酸即游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）。免疫组化的方法检测乙酰辅酶A羧化酶（acetyl-Co A carboxylase,ACC）;评价超声内镜引导下胃肠吻合对代谢功能障碍相关脂肪性肝病的治疗效果及对血脂异常的缓解情况。术后留取实验动物标本,并检测如下指标:GLP-1,GIP,瘦素,脂联素,胰岛素及炎症因子,胆汁酸含量来探讨超声内镜引导下胃肠吻合对肥胖型代谢功能障碍相关脂肪性肝病脂代谢缓解的可能机制。结果:1、15例患者纳入研究,其中恶性病因12例,良性病因3例。恶性病因中,手术操作成功率为100%,临床缓解率100%。术后一过性白细胞升高2例,应用抗生素皆好转。术后11例平均生存时间2.7-4.5（月）。一例目前还健在。恶性病因中,支架未有取出病例。其中2例发生支架移位,并通过内镜下行支架套支架方式干预。良性病因中,手术操作成功率为100%。术后未有一过性白细胞升高。术后3例目前健在。同时,3例分别于术后6个月将支架取出。在支架置入过程中,未发现有支架移位情况。2、手术过程中,实验组及对照组均成功完成超声内镜下胃肠吻合,手术成功率为100%。实验组中,幽门环切时间平均为30.5±3.46min,支架置入时间平均为29.37±8.53min。支架固定时间为10.75±1.49min。其中在手术操作过程中,一例由于支架置入腹腔,后闭合胃内创面后,再次置入支架成功。其中近期不良反应中出现1例气腹。其余出血和穿孔未出现。远期不良反应中,8例动物中未发生支架梗阻,1例发生支架移位。体重平均下降为-1.39±3.12kg。对照组中,幽门环切时间平均为30.13±2.41min,支架置入时间平均为22.86±4.48min。未出现近期不良反应。远期不良反应中,8例动物中未发生支架梗阻,其中7例发生支架移位。体重平均下降为-0.55±4.47kg。实验组及对照组动物完成手术操作后,均可正常饮食。实验组尸检显示肠壁和胃壁之间完全粘连,锚及锁定器固定支架完整。对照组中,支架脱落,解剖中可观察到瘘道。3、整个实验期间三组的进食量均无明显差别,对照组体重呈明显上升趋势,手术组及药物组体重也是上升,但幅度明显没有对照组升高明显,两者具有统计学意义。4、相比于对照组,超声内镜下胃肠吻合及药物术后对肝功能中AST,r-GT均有显着改善作用。5、药物后动物有更低的血清甘油三酯和胆固醇,手术也有改善作用,但效果没有药物明显。6、HE染色及油红0染色均提示超声内镜引导下胃肠吻合术组及药物组后肝脏脂肪变的程度缓解。7、术后12周WB及PCR结果检测脂肪代谢关键酶提示超声内镜下胃肠吻合组肝脏FAS、ACC、FFAR表达均下降。8、术后胰岛素抵抗缓解。9、超声内镜下胃肠吻合术后动物血清中GLP-1、GIP水平在术后有升高趋势,药物组变化不明显。10、手术组瘦素术后第一个月下降明显,术后2,3个月变化不大。脂联素变化趋势不明显。11、手术组中炎症因子TNF-a、IL-6、IL-1在术后第一个月升高明显,在术后第2、3个月归于正常。结论:1、超声内镜引导下胃肠吻合是一项安全有效,创伤小的可以缓解治疗引起良性及恶性消化道梗阻的治疗术式,但术后患者出现支架移位情况,为超声内镜引导下胃肠吻合患者出现不良反应的主要原因[3]。2、双锚锁定器固定支架的方法可有效的防止支架移位,并且此操作是安全有效的,创伤小安全性较高。3、超声内镜引导下胃肠吻合对肝功能及血脂具有缓解作用。对血脂升高和肝脏脂肪变性具有改善作用。4、消化道梗阻状态下,超声内镜下胃肠吻合改善了胰岛素抵抗,与MAFLD肝功能酶学的好转及脂代谢异常缓解关系密切。5、胃肠道激素GLP-1及GIP的术后第一个月变化升高、及术后胆汁酸代谢的改变,可能是胰岛素敏感性恢复和脂质代谢好转的主要原因。6、EUS-GE应用于恶性疾病导致的消化道梗阻中,其未对代谢产生更明显的影响,并发症小且可控。对良性疾病,其效果较温和,并可根据旷置小肠长度来调控对代谢营养的吸收。
李杉[3]（2020）在《经胃自然腔道内镜手术（TG-NOTES）临床应用初探》文中认为目的:1)探讨TG-NOTES在诊断不明原因腹水中的临床价值;2)通过活体小型猪模型探讨TG-NOTES行胆囊探查术的胃部最佳进镜部位以及其安全性及可行性;3)通过动物实验探讨钛夹（南京微创ROCC-D-26-195-C）在TG-NOTES中的封闭效果及对于腹腔内脏器的影响。方法:1)回顾性分析我院2016年4月至2019年3月行TG-NOTES（32例）及腹腔镜术（32例）以诊断不明原因腹水患者的病历资料,对比分析患者确诊率、术后并发症、术后疼痛、住院时间、手术时间等数据,计量资料两组间比较采用t检验,计数资料采用X2检验（检验水准:α=0.05）;2)选取小型猪13只（体重20-30kg）,于其中选取6只分别以胃窦大弯侧、胃窦前壁小弯侧、胃体窦交界处小弯侧为入路（各2只）进入腹腔完成腹腔探查,记录探查范围,并确定探查胆囊及肝脏最佳进镜部位,剩余7只实验动物以最佳进镜部位进入腹腔,完成胆囊腔内探查、胆囊活检以及胆囊息肉切除术等操作。记录手术时间,计算胆囊探查成功率,实验动物手术相关并发症发生率以及死亡率,术后3月解剖实验动物观察腹腔内情况及胆囊愈合情况;3)选取小型猪12只（体重20-30kg）行TG-NOTES,分为胆囊探查组、肠修补组以及对照组3组,每组4只实验动物,术中使用钛夹封闭胆囊、肠壁及胃壁切口,并于肝脾表面留置钛夹,术后观察实验动物活动及进食状况,比较三组术后第一天活动时间、过渡至正常饮食时间,有无出血、穿孔等并发症及死亡情况,于术后3月解剖实验动物,观察腹腔内粘连情况,胃壁粘膜面,肠壁浆膜面以及胆囊壁的愈合情况,取钛夹周围组织与对照组正常组织对比HE染色结果。组间对比采用单因素方差分析（检验水准:α=0.05）。结果:1)两组确诊率分别为NOTES术84.4%,腹腔镜术93.8%,两组确诊率之间无统计学差异（P=1.44,P>0.05）。术后均无腹腔感染、胃壁/腹壁切口出血、穿孔、穿刺口/切口瘘等并发症发生。NOTES组手术时间明显短于腹腔镜组（P<0.05）,NOTES组术后腹痛评分低于腹腔镜组（P<0.05）,两组比较差异有统计学意义。两组平均住院时间及住院费用无统计学差异;2)三处胃壁入口均可较好显示腹腔内脏器,三种入路探查胆囊由易到难分别是:胃窦前壁小弯侧、胃体窦交界处小弯侧以及胃窦大弯侧,故认为胃窦前壁小弯侧是探查胆囊的最佳进镜部位。以胃窦前壁小弯侧为入口的9只实验动物胆囊探查术的成功率为77.78%（7/9）,探查失败的2例失败原因分别是胆囊位置较深以及腹腔内粘连重,平均手术时间为75.0±17.68min,术中成功使用活检钳及圈套器获取局部胆囊粘膜组织。13只实验动物中有11只术后存活,2例死亡,原因为腹腔充气过多引起腹压过高导致呼吸心跳抑制死亡,所有存活的实验动物术后均未发生腹腔出血、感染、穿孔等迟发性并发症,术后3月实验动物体重均较术前有所增长,体重平均增加2.50±1.41kg,解剖见腹腔内粘连不重,1例可于肝脏与腹壁间以及肠壁与腹壁间见粘连带,余未见明显粘连,仅钛夹放置部位及周边可见筋膜或纤维结缔组织附着于肝脏,易于分离,胆囊愈合良好;3)术中操作顺利,胆囊探查组、肠修补组较对照组术后第1天活动时间减少,术后过渡至正常饮食时间延长,差异有统计学意义（P<0.05）。术后均未无出血、穿孔、腹膜炎等表现,亦无实验动物死亡。术后3月解剖实验动物,肠修补组中1例可见腹腔内广泛粘连（术前已有腹腔粘连）,余腹腔内粘连不明显,病理结果提示胃壁、肠壁及胆囊均全层愈合,与正常组织对比可见,钛夹夹闭处胃壁粘膜腺体稍增生,胆囊壁有少许炎症反应,肝脏及肠管无明显变化,其中1例脾门处可见一直径约7cm囊性包块,病理结果考虑血管源性包块可能性大。结论:1)TG-NOTES腹腔探查术对不明原因腹水的诊断具有诊断率高、并发症少、创伤小等优势,是一种与腹腔镜探查术诊断效果相当,有效、安全、经济的诊断方法,值得临床推广。2)胃窦前壁小弯侧可作为TG-NOTES探查胆囊的最佳进镜部位,胆囊息肉切除术、胆囊粘膜活检术等操作均安全可行,内镜下保胆取石术的可行性得以初步验证。3)钛夹短期在腹腔内影响较小且封闭效果确切,在NOTES手术封闭脏器切口上具有重要作用。
陈华[4]（2020）在《我国小型猪的培育及利用现状》文中提出猪和人在解剖学、生理学上有极大的相似性。因此,猪作为实验动物已经被广泛应用于肿瘤、心血管病、糖尿病、外科、牙科、皮肤烧伤、血液病、遗传病、营养代谢病和新药安全性评价等生物医学研究的多个方面。但普通猪作为实验动物有明显的缺点,如体重较大、生长过快、实验操作不方便等。为了解决这一问题,我国从20世纪80年代末开始培育小型猪,本文主要介绍我国小型猪的主要品系、培育、开发利用的现状以及国内培育小型猪的优势。
王国鑫[5]（2020）在《内镜超声引导下胃肠吻合术的研究》文中认为第一部分:内镜超声引导下可回收穿刺锚牵拉法胃肠吻合动物实验研究目的:评价内镜超声引导下可回收穿刺锚牵拉（RPAT）胃肠吻合方法安全有效性。研究方法:12只巴马小型猪（15-20公斤）随机分为实验组和对照组。实验组6只行内镜超声引导下可回收锚牵拉（RPAT）胃肠吻合方法,对照组6只行超声内镜引导下直接法胃肠吻合（EUS-GE）方法。12只实验动物分别于胃-空肠之间置入全覆膜吻合式金属支架。四周后,将猪麻醉并通过先前产生的瘘管将标准胃镜推进肠道。在EUS-GE后四周,对猪进行安乐死。结果:手术过程中,内镜超声引导下可回收穿刺锚牵拉（RPAT）胃肠吻合方法中,肠管在超声内镜监视下内完成支架释放6例,成功放置支架6例,成功率100%（6/6）,手术时间平均为40.19±1.64min,没有不良事件发生。内镜超声引导下直接法胃肠吻合（EUS-GE）方法中,肠管在超声内镜监视下完成支架释放1例,在置入支架过程中,丢失超声视野下放置支架4例。成功率83%（5/6）,手术时间平均为60.19±2.64min,没有不良事件发生。在EUS-GE后4周,所有猪都表现出正常的进食行为并且没有感染迹象。内镜成像显示支架在EUS-GE后4周内没有脱落,支架在所有动物中是明显和稳定的,未见下移倾向。尸检显示肠壁和胃壁之间完全粘连。结论:可回收穿刺锚牵拉下的胃肠吻合术避免了穿刺过程中空肠端难以固定的难题,增加了手术成功率,缩短了手术时间。应用前景广阔。第二部分:内镜超声引导下幽门闭合胃肠吻合后动物体重变化目的:在行内镜超声引导下幽门闭合胃肠吻合后,由于旷置了十二指肠及部分空肠,前期实验观察动物体重略有下降,为此特评价内镜超声引导下行幽门闭合胃肠吻合术,对实验动物的体重影响。研究方法:16只巴马小型猪（15-20公斤）随机分为实验组和对照组。实验组8只行内镜超声引导下可回收锚牵拉（RPAT）胃肠吻合方法,对照组8只行正常饮食饲喂。实验组8只动物接受了幽门闭合后,行胃-空肠之间置入全覆膜吻合式金属支架。全覆膜的金属支架放置在胃和肠之间。四周后,将猪麻醉后胃镜观察幽门闭合情况,并通过先前产生的瘘管将标准胃镜推进肠道,明确支架通畅情况。术后每周观察实验动物体重,及抽血化验动物肝功能,血脂变化。在幽门完全闭合后10周,对猪进行安乐死。结果:8只巴马小型猪（15-20公斤）接受了幽门闭合后,行EUS-GE中成功进行,没有不良事件。8只巴马小型猪（15-20公斤）正常饮食饲养。所有猪都表现出正常的进食行为并且没有感染迹象。实验组内镜成像显示支架在EUS-GE后4周内没有脱落,术后2周,幽门闭合不完全,内镜勉强通过。术后12周,幽门闭合完全,内镜不能通过,食物只能从支架通过,且8只实验组动物体重较术前下降明显,对照组6只体重增加。8只实验组动物总蛋白与对照组变化差异不大,2组胆固醇变化没有统计学意义。结论:4周后,实验组动物幽门可以完全闭合,8只动物体重较术前下降明显,与对照组8只体重变化较大,具有统计学意义,内镜超声引导下行幽门闭合吻合术可以使体重下降。第三部分:内镜超声导下胃肠吻合的临床研究目的:评价内镜超声引导下可回收穿刺锚牵拉（RPAT）胃肠吻合术对引起上消化道梗阻等疾病的治疗效果,并分析该治疗的安全有效性。研究方法:将2017年6月至2018年12月于我院行内镜超声引导下胃肠吻合患者及内镜下十二指肠支架置入术患者纳入研究,观察指标为穿刺锚牵拉法下行胃肠吻合的操作时长,成功率,白细胞计数及再次干预率。经口胃肠吻合的治疗成功率,症状缓解率,术后并发症,平均支架留置时长,术后经口进食状态。支架移位情况。应用SPSS19.0软件,采用X2检验Fisher确切概率法及两独立样本秩和检验分析数据。结果:12例经内镜下胃-肠吻合手术平均操作时长40.19±1.64min,术后一过性发热2例,术后一过性白细胞升高2例,应用抗生素后皆好转。出血0例,严重腹腔感染0例,支架位置改变1例,死亡1例。术后随访患者支架留置时间最长可至6个月,术后并发症0例,再次干预1例,术后进食缓解率100%,良性术后生存时间,支架可维持6个月,直至取出。术后恶性病生存时间为2.7月。同期23例患者均成功行经内镜下十二指肠支架置入术。手术平均操作时长25±2.30 min,术后一过性发热3例,术后一过性白细胞升高3例,应用抗生素后皆好转。出血0例,严重腹腔感染0例,死亡0例。术后随访患者支架留置时间最长可至6个月,术后并发症0例,再次干预4例,术后进食缓解率100%,术后恶性病生存时间为3.9月。结论:内镜超声引导下穿刺锚牵拉法下行胃肠吻合是一项安全有效、微创无疤、操作简便,适用范围广的可以缓解治疗上消化道梗阻疾病的治疗效果,且手术操作过程安全,提高肿瘤晚期患者生存质量。
杨媛媛[6]（2019）在《3D打印技术应用于胰肠吻合装置的设计制造与动物实验》文中研究指明目的通过CT扫描的方法收集胰腺数据,结合生产方式、产品材料和临床用途设计一款新型胰肠吻合装置。采用3D打印方式制造,并对该新型装置进行性能检测和大动物体内实验,验证其可使用性和安全性,探讨胰肠吻合装置的临床应用价值。方法第一部分:收集2017年01月至2018年01月72例以胰头或壶腹周围肿物为诊断入院的病人资料,进行上腹部CT平扫+增强扫描。以门静脉左缘为参照,分别在横断面、冠状面和矢状面扫描图像上测量胰颈前后径、上下径和胰管直径。手术前使用计算机软件将胰腺和病灶进行三维重建,保存为stl.格式传入3D打印机进行打印,得到胰腺及病灶的立体模型。术中直接测量待吻合胰颈断面的上下径、前后径以及胰管直径,将胰腺和病灶3D打印模型进行术中比对,评估大体观相似性。以术中测量结果为参照标准,计算三维重建的准确性。运用软件进行胰肠吻合装置的构型设计作图,使用聚乳酸（PLA）作为胰肠吻合装置材料,对打印装置材料进行力学性能检测、表面微观结构观察、分子结构分析和物质鉴定、物理性质与温度关系检测以及结晶形态分析。第二部分:选取18例巴马小型猪作为新型胰肠吻合装置的大动物体内实验对象。一期术前行上腹部CT扫描获取影像资料,运用三维重建软件构建胰腺及其周围组织正常模型;人工构建胰管扩张动物模型;采集外周血作为正常指标参照。二期术前再次行胰腺CT扫描,根据胰颈、胰管测量数据3D打印个体化胰肠吻合装置;随机分为实验组和对照组各9例,分别采用胰肠吻合装置和手工缝合行胰肠吻合术;对比两组手术时间、胰肠吻合时间、术中出血量、术后并发症等资料。吻合术后4周,第三次手术前再次复查CT。开腹观察吻合口愈合情况,收集胰肠吻合口和外周血标本,对血液炎症指标进行检测,运用HE染色、免疫组化、ELISA、QPCR等方法对吻合口胰腺组织和外周血炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α进行检测,对比不同吻合方式对吻合口局部及全身炎症反应的影响差异,评估新型胰肠吻合装置的安全性和优势性。采用SPSS 22.0统计软件对数据进行统计分析。结果第一部分:根据胰肠吻合要求和PLA材料特性,3D打印生物可吸收胰肠吻合装置设计由胰管支架管、断面支撑盘和螺母三部分组成,尺寸依据72例病例统计资料,平均胰管直径为（2.09±1.32）mm,平均胰颈上下径为（21.12±2.33）mm,前后径为（14.96±1.98）mm。个性化吻合装置和胰腺模型成功完成三维重建和3D打印。术中对比待吻合胰颈,上下径符合率为92.6%,前后径符合率为99.36%,大体观高度相似,胰管支架管与主胰管尺寸相匹配;3D打印胰腺及病灶模型与切除标本对比,左右径符合率为98.53%,上下径符合率为98.78%。聚乳酸样品比硅胶具有更大的拉伸强度和杨氏模量;显微镜下正面观呈网格状规律排列,平面分布均匀,侧面观呈片层排列,排列均匀、致密,无空隙或杂质;聚乳酸3D打印装置和线材的平均熔化温度、分解温度、分解结束温度无显着性差异（P>0.05）,在平均温度为37℃的人体内状态稳定;胰肠吻合装置的红外光谱图与样本库中聚乳酸的特征谱图一致;PLA打印态样品和线材X射线衍射峰位特点一致,经过3D打印后没有对PLA的结构有显着性影响,但非晶态比例较参考文献样品略高。第二部分:一期胰管结扎术后4周再次行胰腺CT扫描,图像显示位于结扎线远端的主胰管扩张至1.5mm以上。术前CT图像测量胰颈上下径平均（15.2±2.2）mm;前后径平均（11.6±1.3）mm;胰管直径平均（2.5±0.5）mm。与术中实际测量结果对比,胰颈上下径和前后径的符合率平均为93.7±4.4%和93.5±4.6%,胰管直径符合率为92.6±3.4%,均无统计学差异（P>0.05）。实验组（吻合器组）和对照组（手工缝合组）总手术时间分别为（132.8±11.6）mi和（147.3±10.1）min,其中装置吻合时间平均为（6.0±1.2）min,手工吻合时间平均为（11.6±2.6）min,结果均有统计学差异（Ps<0.05）。在术中出血量、麻醉恢复时间、术后开始活动时间和进食时间上,实验组和对照组差异无统计学意义（P>0.05）。术后并发症方面,实验组1例肠梗阻,1例腹腔感染,无死亡病例,总并发症发生率为（22.2%）,对照组2例出现肠梗阻,其中1例死亡,1例出现生化漏,两组对比无统计学差异（P>0.05）。胰肠吻合术后两组胰肠吻合口均愈合良好,在CT影像、大体观、吻合口局部和全身性炎症反应方面,两组对比均无明显差异。三维重建模型与标本外观一致。结论薄层螺旋CT可提供清晰影像数据用于胰腺三维重建和个体化胰肠吻合装置数据采集。聚乳酸材料作为胰肠吻合装置的原材料,经过3D打印后其自身性能和产品功能上均能满足临床需求。胰颈结扎术是构建大动物胰管扩张模型的优良方法。使用聚乳酸材料制造胰肠吻合装置进行胰肠吻合术安全、可行,可以缩短胰肠吻合过程手术时间,简化手术操作,术后并发症发生率低,具有一定的临床应用前景。
吴凤东[7]（2019）在《DCD巴马小型猪肝脏常温机械灌注下劈离肝脏移植的实验研究》文中提出目的肝脏移植是治疗各种终末期肝病的根治性方法,近年来供肝短缺日益明显,劈离肝脏移植（Split liver transplantation,SLT）可将一个肝脏劈分给两个受者,提高了供肝利用率。体外劈离一般是在冷保存条件下进行,其缺陷是延长了冷缺血时间,增加了术后血管和胆管并发症及移植物功能不全的发生率。体内肝脏劈离缩短了缺血时间,但只能在循环稳定的脑死亡捐献（Donation after brain death,DBD）患者进行。目前心脏死亡器官捐献（Donation after circulatory death,DCD）肝脏所占比率越来越大,如果能够对DCD肝脏进行劈离肝移植则会进一步扩大供体来源。DCD患者的循环状况不适合体内劈离,体外劈离又会给经历较长时间热缺血损伤的DCD肝脏带来额外损伤。常温机械灌注（Normothermic machine perfusion,NMP）能够通过连续提供氧气、营养物质,维持细胞的生理机能及代谢,修复肝脏损伤。本研究拟构建简单、稳定、实用的NMP灌注保存系统,并探讨NMP对DCD猪肝SLT的保护作用。方法1.巴马小型猪肝脏解剖学研究:结合文献并通过对5只巴马小型猪腹部和肝脏进行解剖研究,观察肝脏各叶的大小,观察肝动脉、门静脉、胆道和肝静脉的解剖分布走行以及肝脏劈离面的选择,为肝脏劈离手术提供解剖学基础。2.猪原位无转流劈离肝移植的研究:选用健康巴马小型猪20只,分别按文献方法获取供肝和原位无转流肝脏移植（预实验组）,以及改进方法获取供肝和原位无转流肝脏移植（实验组）,比较两组术中血流动力学指标、术后生化、术后并发症和生存率,掌握猪原位无转流肝脏移植手术技巧及验证模型的稳定性;选用健康巴马小型猪10只分为供体组和受体组,按前面所述实验组方法获取供肝,供肝在冷保存过程中沿肝中裂劈离,注意保护门静脉右中叶支和右外侧叶胆管,以右半肝为移植物行原位无转流劈离肝移植,观察术中情况、术后化验、术后并发症和生存率,掌握劈离肝移植手术技巧。3.常温机械灌注DCD巴马小型猪劈离肝脏移植研究:选用健康巴马小型猪10只,随机选取5只作为灌注采血用,其余5只在供肝获取时建立功能性热缺血30分钟和无循环热缺血10分钟DCD模型,进行DCD肝脏体外NMP,观察NMP过程中门静脉和肝动脉灌注压、灌注液流量和胆汁分泌量变化,检测胆汁中碳酸氢盐和胆汁PH值,测量灌注液乳酸及ALT、AST变化,评估肝脏活力并改进灌注液组成、灌注通路设计和灌注模式;DCD猪肝脏常温机械灌注下劈离肝移植研究:巴马小型猪30只,其中10只作为采血用,其余20只分为供体组和受体组,每组10只。供体组均建立功能性热缺血30分钟和无循环热缺血10分钟DCD模型,受体组随机分为冷保存DCD肝脏劈离移植组（冷保存5小时）和NMP保存DCD肝脏劈离移植组（冷保存2小时后NMP 3小时）,每组5只,分别进行右半肝供肝原位无转流肝脏移植,比较两组术中血流动力学指标、术后生化、术后并发症和生存率。结果1.巴马小型猪肝脏解剖与人有一定区别,其固定韧带薄弱,肝动脉分支多,门静脉右中叶支起于门静脉左干起始段。胆管有多种变异,尾状叶和右外侧叶胆管绕行汇入左肝管约占2/3。下腔静脉与尾状叶间难以解剖分离,左半肝移植需重建替代下腔静脉的血管。肝中裂平面左右肝之间的交通支较少,在此平面进行劈离可将肝脏分为左右侧体积相近的两个半肝。2.采用改进方法获取供肝和原位无转流肝脏移植,有利于无肝期血液动力学稳定,术后出血、低体温发生率显着降低,预实验组7天存活率20%,实验组7天存活率80%。冷保存肝脏劈离过程中无门静脉右中叶支的损伤,无肝脏断面搭桥重建肝静脉,与全肝移植实验组对比,劈离肝移植术后ALT、AST均显着增高,生存率稍低（80%对60%）。3.通过在门静脉灌注通路添加压力缓冲装置,保证了灌注期间灌注压力的可控性,采用20分钟内逐渐升温升压的NMP灌注模式,DCD肝脏在体外灌注期间,血液动力学稳定,灌注液乳酸由灌注初期6.04±0.54mmol/L下降到结束时1.96±0.294mmol/L,NMP期间分泌胆汁逐渐增加,NMP结束前胆汁PH和碳酸氢盐浓度分别为7.59±0.04和32.98±1.04 mmol/L。与冷保存DCD肝脏劈离移植组比较,NMP保存DCD肝脏劈离移植组开放后循环更加稳定,其术后在3天生存率为60%,差异有显着意义。结论巴马小型猪有其特殊的解剖学特点,右半肝供肝移植宜选择肝中裂为劈离面,劈离时需注意防止损伤门静脉右中叶支和右外侧叶胆管;采用改进方法获取供肝和原位无转流肝脏移植的实验模型稳定,但是与全肝移植对比劈离肝移植仍然会对动物恢复造成显着的影响;在门静脉灌注通路增加压力缓冲装置可使灌注血液动力学更稳定,在灌注早期采用逐渐升温升压的NMP灌注模式,在NMP灌注后期进行肝脏劈离,可以修复肝脏并减少灌注机械性损伤。NMP期间通过对灌注液乳酸和分泌胆汁的检测,可以进行肝脏活力的评估。通过对比静止冷保存和NMP条件下DCD猪肝劈离肝移植,证明了NMP保存对DCD猪劈离肝移植的保护作用。
张凯[8]（2019）在《内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合及关闭吻合口后对胆囊病理生理改变的研究》文中研究指明内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合的动物实验目的:内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合对内镜医师来说是一项具有挑战性的技术,需要高水平的技术。内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合具有挑战性的一个非常重要的原因是胆囊很容易塌陷。为了解决这个问题,我们为内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合开发一种可回收的穿刺锚牵拉（RPAT）方法。我们使用猪模型评估并比较了内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合的RPAT方法与现有的内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合方法的成功率,安全性和结果;消化道-胆囊瘘管的形成是EUS引导下保胆取石术中内镜可以进入胆囊的关键。消化道-胆囊瘘管的闭合是EUS引导下保胆取石术结束的关键。消化道-胆囊瘘管的闭合之后的长期情况是本术式关注的重点。如果术后胆囊与消化道粘连很重,甚至持续与周围粘连严重,这一术式的意义和必要性就需要重新考量。反之,若术后胆囊与消化道以及周围组织粘连很轻甚至没有粘连,胆汁中即使出现小的结晶或沉淀,由于胆囊的的收缩功能良好,可能会把这些结晶或沉淀排出,避免形成结石;对于结石复发的患者,不论是再次行消化道与胆囊支架吻合术还是选择外科手术切除都不会产生很大影响,那么这个术式也将有着广阔的临床应用前景。因此,我们将进行内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合后胆囊-消化道瘘管形成及闭合的初步研究;胆囊炎及胆囊结石是目前临床上较为常见的疾病之一,在我国发病率逐年增加,影响人们的健康。本课题组进一步研究并报道了EUS引导下胆囊引流术及结石取出的手术方式,初步显示了此技术的可行性与安全性。EUS引导下胆囊与消化道暂时性支架吻合在建立胆囊和消化道之间的通道过程中,胆囊和消化道形成通路。消化道内部不是无菌环镜,细菌经通路进入胆囊,对胆囊内细菌微生态可能造成影响,而这些均可引发或加重胆囊炎和胆囊结石,因此有必要对行术后胆囊菌群评价及培养进行深入研究。方法:将16只巴马小型猪（15-20kg）随机分为实验组（n=8）和对照组（n=8）。可回收的穿刺锚牵拉方法在实验组中进行,并且在对照组中进行没有可回收穿刺锚的内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合。在实验组和对照组之间比较和分析手术不良事件,伤口愈合和内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合成功率;将巴马小型猪（15-20kg）采用可回收的穿刺锚牵拉方法进行消化道与胆囊暂时性支架吻合,观察消化道胆囊瘘管的形成情况。拔掉支架后,模拟胆囊取石,观察瘘管消化道侧的闭合情况,并进行解剖观察瘘管长期闭合后的情况;将未手术的巴马小型猪直接解剖的胆囊粘膜及胆汁为对照组。每只巴马小型猪支架置入术前采集的采集的胆汁及胆囊粘膜标本作为术前组,支架取出后不同时间采集的胆汁及胆囊粘膜标本作为术后组。选择胆囊功能良好的实验动物在EUS引导下穿刺并抽取胆囊胆汁,进行消化道与胆囊支架吻合,术后用内镜模拟胆囊取石,清理胆囊,并打入造影剂造影见胆囊管通畅后,然后将动物解剖取胆汁。将收集来的标本分组,进行如下实验:1、从胆囊粘膜中提取16SrDNA进行高通量测序,比较各组菌群的变化。2、从胆汁中提取16SrDNA进行高通量测序,比较各组菌群的变化。结果:所有内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合在实验组的8只动物中成功进行（8/8;100%）。然而,在对照组中,内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合仅在四头猪上成功进行（4/8;50%）;其余四头猪因胆囊塌陷导致支架释放不成功,进而导致内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合失败而死亡;在瘘管形成情况方面,形成瘘管比较坚实的时间为2-4周,并且初步探索瘘管的胆囊连接处为相对薄弱位置。在瘘管闭合方面,课题组初步通过术后的胃镜检查发现,在支架拔除术后24-48小时左右瘘管口就会闭合。术后的动物解剖发现,在支架拔除术后1个月实验动物解剖时发现胆囊与消化道形成片状粘连瘢痕,但我们在支架拔除术后4个月动物解剖发现胆囊-消化道之间行成极细的瘢痕带,支架拔除术后6个月的实验动物解剖室发现实验动物胆囊-消化道吻合处光滑无粘连;胆囊粘膜菌群基于Ion S5TMXL测序平台,利用单端测序（Single-End）的方法,构建小片段文库进行单端测序。通过对Reads剪切过滤,平均每样品测得78,102条reads,经过质控平均得到73,517条有效数据,质控有效率达94.24%。以97%的一致性（Identity）将序列聚类成为OTUs（Operational Taxonomic Units）,共得到7,057个OTUs,然后对OTUs序列与Silva132数据库进行物种注释。注释结果中,共有2,578（36.53%）个OTU注释到属水平。胆汁菌群通过对Reads剪切过滤,平均每样品测得77,458条reads,经过质控平均得到73,312条有效数据,质控有效率达94.66%。以97%的一致性（Identity）将序列聚类成为OTUs（Operational Taxonomic Units）,共得到5,542个OTUs,然后对OTUs序列与Silva132数据库进行物种注释。注释结果中,共有2,415（43.58%）个OTU注释到属水平。术前术后胆囊粘膜的菌群在门水平上,我们发现占据主导地位的主要包括变形杆菌（Proteobacteria）、黄粉杆菌（Tenericutes）、硬杆菌（Firmicutes）;在纲水平上主导的为γ-变形杆菌（Gammaproteobacteria）、Mollicutes、梭状芽孢杆菌（Clostridia）;在目水平上的优势物种为黄单胞菌属（Xanthomonadales）、支原体（Mycoplasmatales）、梭状芽孢杆菌（Clostridiales）;在科水平上的优势物种为黄单胞菌科（Xanthomonadaceae）、支原体科（Mycoplasmataceae）、脱硫弧菌科（Desulfovibrionaceae）;在属水平上的优势物种为寡养单胞菌（Stenotrophomonas）、支原体（Mycoplasma）、嗜胆菌属（Bilophila）;优势种为副嗜血杆菌（Haemophilusparasuis）、莫拉菌（Moraxella catarrhalis）。而胆汁的菌群在门水平上,我们发现占据主导地位的主要包括变形杆菌（Proteobacteria）、拟杆菌（Bacteroidetes）、硬杆菌（Firmicutes）;在纲水平上主导的为γ-变形杆菌（Gammaproteobacteria）、Bacteroidia、杆菌（Bacilli）;在目水平上的优势物种为肠杆菌类（Enterobacteriales）、几丁质噬菌体（Chitinophagales）、乳酸杆菌类（Lactobacillales）;在科水平上的优势物种为肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、几丁质噬菌体科（Chitinophagaceae）、脱硫弧菌科（Desulfovibrionaceae）;在属水平上的优势物种为肠杆菌科（Enterobacteriaceae）、定会杆菌（Dinghuibacter）、嗜双胞菌（Bilophila）;优势种为大肠杆菌（Escherichiacoli）、戊糖球菌（Pediococcuspentosaceus）、假单胞菌（Pseudomonashibiscicola）。结论:可回收的穿刺锚牵拉方法有助于提高内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合的成功率,并可减少胆囊塌陷。因此,我们相信这种方法可以在不久的将来应用于临床的内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合。此外,可回收的穿刺锚牵拉方法将提高内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合的安全性;内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合及关闭吻合口中,消化道-胆囊瘘管牢固形成时间为2-4周,闭合时间为24-48小时,瘘管闭合后长期可变细甚至消失;实验动物在内镜超声引导下消化道与胆囊支架吻合及拔除支架后,手术前后胆囊粘膜及胆汁菌群组成发生改变,而且随着时间的增加胆囊内菌群也在发生不断地变化,但是术前术后菌群相关的导致结石活性物质无增高趋势,因此该手术对胆囊结石复发的影响可能比较小。可回收穿刺锚牵拉法应用于内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合的临床研究目的:评价可回收穿刺锚牵拉法应用于内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合对胆囊息肉、结石等胆囊疾病的治疗效果,并评价分析该方法的安全有效性。通过观察不同方法的内镜超声引导下消化道与胆囊吻合术的各项临床指标,分析该方法的安全有效性。研究方法:将2014年6月至2019年1月于我院行内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合术的患者纳入研究。观察指标为:超声内镜引导下两种方法的吻合术操作时间的长短,吻合位置,吻合手术的成功率,术后的腹痛评分（采用视觉模拟评分法,VAS）、手术后是否有发热,有无其他术后相关的并发症发生。使用SPSS Statistics 23.0（SPSS,Inc,Chicago,Ill,USA）进行统计学分析。结果:本研究共纳入2014年6月至2019年1月期间在我院因胆囊结石、胆囊息肉等胆囊疾病行超声内镜引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合术的治疗45例患者。男性16例,女性29例。其中进行可回收穿刺锚牵拉（RPAT）法手术的14例患者作为实验组,其中男性4例,女性10例,未使用可回收穿刺锚牵拉（RPAT）法手术的31例患者作为对照组,其中男性12例,女性19例。实验组的技术成功率100%（14/14）,临床成功率100%（14/14）,而在对照组技术成功率87.1%（27/31）,临床成功率83.9%（26/31）。实验组发生术后发热7例,一过性白细胞升高9例,对照组发生术后发热13例,一过性白细胞升高18例。对照组术后出现并发症7例,其中腹腔感染1例,气腹2例,而实验组内均未出现。实验组术后使用抗生素天数及术后禁食时间均短于对照组（3.14d vs 4.43d,2.36d vs2.93d）。结论:综上所述,可回收穿刺锚牵拉法EUS引导下消化道与胆囊吻合术是一项安全有效、操作快捷简便,成功率高且不良事件发生率低。这种方法将来可以应用于临床的内镜超声引导下胆囊的引流。
吴延军[9]（2019）在《STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏转录组和蛋白质组差异分析》文中认为合理的动物模型对2型糖尿病（Type 2 Diabetes mellitus,T2DM）的研究至关重要。链脲佐菌素（Streptozotocin,STZ）对胰腺组织β细胞具有特异毒性作用,因此被广泛应用于糖尿病动物模型的制作。高脂高糖食物联合低剂量STZ诱导T2DM模型具有造模时间短,成模率高和造模成本低等特点,是目前应用最广泛的造模方法,但是人类T2DM的发生与STZ没有直接的关系,目前最理想的T2DM模型制作方法仍为高脂高糖自然食物诱导。本研究旨在通过构建高脂高糖食物联合低剂量STZ诱导和单纯高脂高糖食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型,分别进行模型猪肝脏组织转录水平和蛋白水平的差异分析,并完成差异候选基因在细胞表达水平和小鼠T2DM模型中的表达验证,为T2DM动物模型的合理应用提供科学的理论依据。主要试验结果如下:1、STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型构建选取22头20-22 kg雌性巴马小型猪用于T2DM模型制作。随机分为4组:第一组（n=4）用基础饲料饲喂10个月（Control,Ctrl）;第二组（n=10）高脂高糖饲料饲喂10个月（DM1HH）;第三组（n=4）先高脂高糖饲料饲喂6个月后按60 mg/kg耳缘静脉注射STZ,接着高脂高糖饲喂至10个月（DM2HS）;第四组（n=4）先基础日粮饲喂6个月后按60 mg/kg给予耳缘静脉注射STZ接着高脂高糖饲喂至10个月（DM3SH）。DM2HS组和DM3SH组小型猪全部达到T2DM标准,DM1HH组有4头小型猪造模成功（4/10）。其中,先高脂高糖饲喂后注射STZ（DM2HS）能够诱导出高血糖T2DM模型。组织病理分析发现长期高脂高糖饲喂组（DM1<sub>HH,DM2<sub>HS）肝脏发生严重的小泡性脂肪变;STZ处理组（DM2HS,DM3SH）小型猪胰腺组织受损严重。2、STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏转录组分析分别选取4组实验小型猪各3头用于肝脏转录组分析,同时达到|log2（Fold Change）|>1和校正p-value<0.05则被认定为差异表达基因,结果与DM1HH组相比,DM2HS组有17个差异表达基因,其中7个为上调基因,10个为下调基因;DM3SH组有30个差异表达基因,其中16个为上调基因,14个为下调基因。与DM1HH组相比,一共有4个共表达差异基因同时注释到DM2HS组和DM3SH组,分别为CYR61基因,RPL15基因,RGS1基因和一个未知非编码基因LOC102166695,其中CYR61基因,RPL15基因和RGS1基因均为下调表达基因。3、STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏蛋白质组分析分别选取T2DM模型组小型猪各3头用于肝脏蛋白组学分析,结果显示与高脂高糖自然食物诱导的DM1HH组相比,一共有50个共表达差异蛋白同时注释到DM2HS组和DM3SH组。差异蛋白所涉及的代谢通路涵盖了氨基酸代谢,碳水化合物代谢和化学药物致癌等途径。差异蛋白分析显示,STZ处理组中的UGT2B31和UGT1A62个UGT家族下调蛋白同时参与了氨基酸,碳水化合物和化学药物致癌等通路,初步确定UGT蛋白参与STZ在肝脏中的代谢。STRING数据库在线分析发现RPL家族有3个蛋白（14、15、35A）通过GMPR2 还原酶与 GPT2、ME3、AGXT、HACL1、RDH11、AKR1A1、CBR3 和 UGT2B31（ENSSSCG00000024213）存在互作关系。蛋白质组学和转录组学联合分析发现,STZ诱导的小型猪T2DM模型肝脏组织中RPL15基因在转录水平和蛋白水平均呈现下调表达模式,证明STZ在诱导糖尿病的发生过程中能够下调RPL15基因在肝脏中的表达,Western Blot试验验证了这一结果。4、候选基因RPL15的克隆和细胞水平的功能验证克隆广西巴马小型猪RPL15基因,发现RPL15基因具有高度的保守性,与NCBI公布的猪（Sus scrofa）的RPL15基因同源性高达99.8%,在CDS区第339位点发生G/A同义突变,未引起氨基酸序列的改变。通过在HEPG2肝脏细胞中分别进行干扰和过表达RPL15试验,初步确定RPM15基因与AGXT、RPL14、AKR1A1、GMPR2和UGT2B31存在稳定的互作关系。过表达RPL15可促进癌基因DLK1、HTA、MXR7和抑癌基因P53的表达,同时抑制抑癌基因PTEN的表达;干扰RPL15基因可促进抑癌基因PTEN、NDRG1的表达。5、候选基因RPL15在小鼠T2DM模型中的表达分析通过高脂高糖饲料联合低剂量STZ（60 mg/kg每天单次腹腔注射,连续注射3d）分别构建昆明小鼠T2DM模型。T2DM模型小鼠组织表达分析发现,RPK15基因在小鼠肌肉、肾脏和肝脏组织中表达较高。与单纯高脂高糖饲喂诱导的mHH组相比,高脂高糖饲喂联合低剂量STZ诱导的mHS组和mSH组小鼠心脏、肝脏、肌肉和肾脏中RPL15基因均呈现下调表达趋势。模型小鼠肝脏中RPL15基因在mHH组中的表达高于mHS组和mSH组,与巴马小型猪T2DM模型研究结果相同。综上所述,本研究成功构建STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型,完成了模型猪肝脏转录组和蛋白质组的差异分析,并获得肝脏转录水平和蛋白水平的差异表达基因,确定STZ在诱导T2DM的发生过程中下调肝脏中RPK15基因的表达。
黄高,文明波,畅庚云[10]（2017）在《手术干预式肝衰竭动物模型的研究现状》文中进行了进一步梳理肝衰竭是肝脏的各项功能绝对或相对不足导致机体代谢功能发生严重紊乱而出现的临床综合征。肝衰竭发生于许多严重的肝脏疾病过程中,预后不良。而临床常用治疗方法局限性较大,需不断对其发病机制、治疗方法等进行探索。但探索过程中离不开合适的动物模型,目前肝衰竭动物模型通过制作方式大致可分为手术干预式动物模型和非手术干预式动物模型。非手术干预式动物模型多采用肝损害药物等导致实验动物出现肝衰竭。该文主要讨论通过手术干预导致实验动物出现肝衰竭的动物模型。
二、小型猪胃肠道外科手术模型简介（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、小型猪胃肠道外科手术模型简介（论文提纲范文）
（1）“移形吻合术”联合5-FU治疗肝门部良性胆管狭窄及预防再狭窄的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照表 |
| 第1章 引言 |
| 第2章 材料及方法 |
| 2.1 实验动物及材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 观察指标 |
| 2.4 统计学处理 |
| 2.5 实时荧光定量PCR(Real-time PCR) |
| 第3章 结果 |
| 3.1 术后一般情况 |
| 3.2 大体解剖 |
| 3.3 实验室指标观察 |
| 3.4 病理切片结果 |
| 3.5 PCR检测结果 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 关于良性胆管狭窄模型的探讨 |
| 4.2 “移形吻合术”联合5-FU治疗方案的探讨 |
| 4.3 展望 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 良性胆管狭窄病因、发生机制及诊疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 |
（2）消化道梗阻下超声内镜引导胃肠吻合对代谢功能障碍相关脂肪性肝病的脂代谢的治疗作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分:评估消化道梗阻下超声内镜引导胃肠吻合术式的安全有效性 |
| 一(1)消化道梗阻下超声内镜引导胃肠吻合术式的临床回顾研究 |
| 1 前言 |
| 2 资料和方法 |
| 2.1 临床资料 |
| 2.2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 一(2)超声内镜引导下胃肠吻合双锚锁定器固定支架法动物实验研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.2 术前准备及麻醉方法 |
| 2.3 研究方法 |
| 2.4 术后处理及标本检测 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.6 数据处理和统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 术后观察指标 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分:消化道梗阻下超声内镜引导胃肠吻合对代谢功能障碍相关脂肪性肝病的治疗及对血脂异常的缓解 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验分组及方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 体重及进食情况 |
| 3.3 肝功能变化 |
| 3.4 肝脏组织学变化 |
| 3.5 脂肪生成关键酶及分解酶RNA表达结果如下表: |
| 3.6 western blot检测FAS及FFAR结果 |
| 3.7 免疫组化方法检测ACC结果 |
| 3.8 ELASA方法检测胰岛素抵抗结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分:消化道梗阻下超声内镜引导胃肠吻合对代谢功能障碍相关脂肪性肝病的脂代谢的机制研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验标本 |
| 2.2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 血液中胆汁酸结果 |
| 3.2 胃肠激素GIP及GLP-1变化情况 |
| 3.3 炎症因子结果 |
| 3.4 脂肪因子结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 本论文创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 减重代谢手术对肥胖型代谢功能障碍相关脂肪性肝病治疗的意义 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）经胃自然腔道内镜手术（TG-NOTES）临床应用初探（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 经胃自然腔道内镜手术(TG-NOTES)在诊断不明原因腹水中的价值 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 第三章 经胃自然腔道内镜手术(TG-NOTES)行胆囊探查术的可行性及安全性研究 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 结论 |
| 第四章 金属钛夹在经胃自然腔道内镜手术(TG-NOTES)中对于腹腔脏器的影响 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 经自然腔道内镜手术的现状和进展摘要 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（4）我国小型猪的培育及利用现状（论文提纲范文）
| 1 国内小型猪主要品系及培育 |
| 1.1 五指山小型猪 |
| 1.2 贵州小型香猪 |
| 1.3 广西巴马小型猪 |
| 1.4 藏猪 |
| 1.5 版纳微型猪 |
| 1.6 中国农大小型猪 |
| 1.7 剑白香猪 |
| 1.8 台湾小型猪品系 |
| 2 SPF小型猪的培育 |
| 3 小型猪的利用现状 |
| 3.1 用于心血管病的研究 |
| 3.2 用于糖尿病的研究 |
| 3.3 用于牙科的研究 |
| 3.4 用于皮肤烧伤的研究 |
| 3.5 用于消化系统疾病的研究 |
| 3.6 用于脏器移植的研究 |
| 3.7 用于药品安全性评价 |
| 4 总结 |
（5）内镜超声引导下胃肠吻合术的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 :内镜超声引导下可回收穿刺锚牵拉法胃肠吻合动物实验研究 |
| 1 前言 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 器械与材料 |
| 2.1.3 实验分组 |
| 2.2 术前准备及麻醉方法 |
| 2.3 手术操作 |
| 2.3.1 内镜超声引导下可回收穿刺锚牵拉法胃肠吻合 |
| 2.3.2 内镜超声引导下直接法胃肠吻合 |
| 2.4 观察指标 |
| 2.4.1 一般情况 |
| 2.4.2 术后复查 |
| 3 实验结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 :内镜超声引导下幽门闭合胃肠吻合后动物体重变化 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 器械与材料 |
| 2.1.3 研究分组 |
| 2.2 术前准备及麻醉方法 |
| 2.3 手术过程 |
| 2.4 术后观察 |
| 3 实验结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 第三部分 :内镜超声导下胃肠吻合的临床研究 |
| 1 前言 |
| 2 资料与方法 |
| 2.1 临床资料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 术前准备 |
| 2.2.2 设备 |
| 2.2.3 操作步骤 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）3D打印技术应用于胰肠吻合装置的设计制造与动物实验（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 3D打印技术应用于胰肠吻合装置的设计制造 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 3D打印胰肠吻合装置的动物实验 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 结论 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（7）DCD巴马小型猪肝脏常温机械灌注下劈离肝脏移植的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、巴马小型猪肝脏解剖学研究 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 麻醉及静脉动脉通路建立 |
| 1.1.3 手术方法 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 巴马小型猪肝脏大体解剖 |
| 1.2.2 巴马小型猪肝脏各叶重量及比率 |
| 1.2.3 巴马小型猪肝脏血管和胆道 |
| 1.3 讨论 |
| 二、巴马小型猪经典非转流肝脏移植研究 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验动物及分组 |
| 2.1.2 麻醉及静脉动脉通路建立 |
| 2.1.3 肝脏获取及修整 |
| 2.1.3.1 预实验组供肝获取及修整 |
| 2.1.3.2 实验组供肝获取及修整 |
| 2.1.4 受体手术 |
| 2.1.5 术后治疗方案 |
| 2.1.6 观察指标 |
| 2.1.7 统计分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 移植术后基本情况 |
| 2.2.2 术中血流动力学及体温改变 |
| 2.2.3 实验组术后肝功能改变 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 猪肝脏移植的困难 |
| 2.3.2 猪肝脏移植血液的准备及无肝期处理 |
| 2.3.3 猪肝脏移植供肝获取和移植技术的改进 |
| 2.3.4 猪肝脏移植的体温维持和术后管理 |
| 2.4 小结 |
| 三、巴马小型猪经典非转流劈离肝脏移植研究 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 实验动物及分组 |
| 3.1.2 手术方法 |
| 3.1.2.1 麻醉和供肝获取方法 |
| 3.1.2.2 供肝劈离及修整 |
| 3.1.2.3 受体肝脏劈离式移植手术(右半肝) |
| 3.1.3 术后治疗方案 |
| 3.1.4 观察指标 |
| 3.1.4.1 手术基本情况 |
| 3.1.4.2 受体术后监测指标 |
| 3.1.5 统计分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 移植术后基本情况 |
| 3.2.2 术后肝功能情况 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 劈离肝移植左、右半肝移植物的选择 |
| 3.3.2 血管和胆道的劈离 |
| 3.3.3 劈离肝移植的管理和并发症的防治 |
| 3.4 小结 |
| 四、巴马小型猪DCD肝脏常温机械灌注研究 |
| 4.1 对象和方法 |
| 4.1.1 常温机械灌注装置的主要设备及材料 |
| 4.1.2 实验药品 |
| 4.1.3 实验动物 |
| 4.1.4 DCD供肝获取 |
| 4.1.5 常温机械灌注灌注液配方 |
| 4.1.6 常温机械灌注管路运行及检测 |
| 4.1.7 灌注过程中标本收集 |
| 4.1.8 统计方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 灌注过程中血液动力学情况 |
| 4.2.2 常温灌注过程中灌注液酶学、乳酸,胆汁情况 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 DCD肝脏模型的建立 |
| 4.3.2 NMP灌注液成分 |
| 4.3.3 氧气浓度 |
| 4.3.4 灌注模式(灌注压力和灌注温度) |
| 4.4 不足 |
| 五、DCD巴马小型猪肝脏常温机械灌注下劈肝脏移植的研究 |
| 5.1 对象和方法 |
| 5.1.1 实验动物及分组 |
| 5.1.2 手术方法 |
| 5.1.2.1 冷保存组手术方法 |
| 5.1.2.2 NMP组手术方法 |
| 5.1.3 术后治疗方案 |
| 5.1.4 观察指标 |
| 5.1.4.1 手术基本情况 |
| 5.1.4.2 受体术后监测指标 |
| 5.1.5 统计分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 移植术后基本情况 |
| 5.2.2 生化检验情况 |
| 5.2.3 组织学改变 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 DCD肝脏在常温机械灌注下劈离的优势 |
| 5.3.2 DCD肝脏在常温机械灌注下劈离的时机 |
| 5.3.3 常温机械灌注下劈离需要注意情况 |
| 5.3.4 NMP对DCD劈离肝移植的保护作用 |
| 5.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 肝脏机械灌注保存进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（8）内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合及关闭吻合口后对胆囊病理生理改变的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 第一部分:可回收穿刺锚牵拉法应用于内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合的动物实验 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 器械与材料 |
| 2.2 麻醉方法 |
| 2.3 手术操作 |
| 2.4 标本检测 |
| 2.5 观察指标 |
| 2.5.1 一般情况 |
| 2.5.2 观察指标 |
| 2.6 数据处理和统计分析 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 一般情况 |
| 3.2 术后观察指标 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分:可回收穿刺锚牵拉法应用于内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合的临床回顾 |
| 1 前言 |
| 2 资料和方法 |
| 2.1 临床资料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 术前准备 |
| 2.2.2 设备 |
| 2.2.3 操作步骤 |
| 2.2.4 观察指标 |
| 2.2.5 数据分析 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分:内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合后胆囊-消化道瘘管形成及闭合和胆囊菌群的研究 |
| 三(1) 内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合后胆囊-消化道瘘管形成及闭合的研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 器械与材料 |
| 2.2 麻醉方法 |
| 2.3 手术操作 |
| 2.4 观察指标 |
| 2.4.1 观察及评估瘘管形成情况 |
| 2.4.2 观察及评估瘘管闭合情况 |
| 3 实验结果 |
| 4 分析与讨论 |
| 5 结论 |
| 三(2) 内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合及关闭吻合口后对胆囊菌群的影响的研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 试剂与材料 |
| 2.1.3 仪器设备 |
| 2.2 检测胆囊及胆汁菌群改变的实验方法 |
| 2.2.1 手术过程与胆汁标本的收集 |
| 2.2.2 胆囊粘膜菌群高通量测序方法 |
| 2.2.3 胆汁菌群高通量测序方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 动物手术过程及术后一般情况观察 |
| 3.2 胆囊粘膜高通量测序 |
| 3.2.1 胆囊粘膜样本DNA检测结果 |
| 3.2.2 OTU聚类和物种注释概况 |
| 3.2.3 样品复杂度分析(Alpha Diversity) |
| 3.2.4 物种注释 |
| 3.2.5 物种显着性差异分析 |
| 3.2.6 多样品比较分析(Beta Diversity) |
| 3.3 胆汁高通量测序 |
| 3.3.1 胆汁样本DNA质量检测结果 |
| 3.3.2 OTU聚类和物种注释概况 |
| 3.3.3 样品复杂度分析(Alpha Diversity) |
| 3.3.4 物种注释概况 |
| 3.3.5 物种显着性差异分析 |
| 3.3.6 多样品比较分析(Beta Diversity) |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本论文创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述一 内镜超声引导下吻合术的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 内镜超声引导下消化道-胆囊吻合术的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏转录组和蛋白质组差异分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文中关键缩略词中英文对照 |
| 第一章 综述 |
| 1 2型糖尿病简介 |
| 2 T2DM实验动物模型的研究进展 |
| 2.1 自发型T2DM动物模型的应用 |
| 2.2 诱导型T2DM动物模型的应用 |
| 3 STZ与T2DM动物模型 |
| 3.1 STZ的结构特点 |
| 3.2 STZ给药途径和应用剂量的研究 |
| 3.3 STZ的分解和代谢 |
| 3.4 STZ在动物模型中的实际应用 |
| 3.5 高脂高糖饮食联合低剂量STZ诱导T2DM动物模型的优点 |
| 4 肝脏与T2DM的关系 |
| 4.1 肝脏中的糖代谢 |
| 4.2 肝脏与胰岛素抵抗 |
| 5 转录组学和蛋白质组学技术在糖尿病研究领域的应用 |
| 5.1 转录组学在糖尿病研究中的应用 |
| 5.2 蛋白质组学在糖尿病研究中的应用 |
| 6 小型猪疾病模型的应用和发展 |
| 7 研究目的和意义 |
| 第二章 STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型构建及成模特点比较分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 动物日粮 |
| 1.3 试验耗材和试剂 |
| 1.4 试验仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 试验动物的饲养 |
| 2.2 血液生理生化指标的测定 |
| 2.3 静脉注射葡萄糖耐实验(IVGTT) |
| 2.4 胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的计算 |
| 2.5 病理切片制作 |
| 2.6 巴马小型猪T2DM模型标准 |
| 2.7 数据处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 体重测定 |
| 3.2 血清生理生化指标测定结果 |
| 3.3 静脉葡萄糖耐试验结果 |
| 3.4 HOMA-IR计算 |
| 3.5 病理试验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 本章小结 |
| 第三章 STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏转录组比较分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物样品 |
| 1.2 试验试剂 |
| 1.3 试验仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 转录组建库测序方法 |
| 2.2 转录组数据分析方法 |
| 2.3 转录差异基因表达验证 |
| 2.4 qRT-PCR数据分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 RNA提取和检测 |
| 3.2 样品测序数据统计 |
| 3.3 测序片段与参考基因组比对结果 |
| 3.4 样品RNA-Seq相关性分析 |
| 3.5 差异表达基因统计 |
| 3.6 GO分析差异基因功能 |
| 3.7 KEGG分析差异基因功能 |
| 3.8 差异基因表达验证 |
| 4 讨论 |
| 5 本章小结 |
| 第四章 STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏蛋白质组学比较分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物样品 |
| 1.2 试验试剂 |
| 1.3 试验仪器 |
| 2 方法 |
| 2.1 iTRAQ标记定量蛋白质组学技术流程 |
| 2.2 蛋白质组学数据分析方法 |
| 2.3 转录组学和蛋白质组学联合分析方法 |
| 2.4 Western Blot方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 iTRAQ标记试验结果 |
| 3.2 差异蛋白统计结果 |
| 3.3 差异蛋白聚类热图 |
| 3.4 差异蛋白GO分析 |
| 3.5 差异蛋白KEGG分析 |
| 3.6 差异蛋白网络互作(PPI)分析 |
| 3.7 转录组学和蛋白质组学联合分析结果 |
| 3.8 Western Blot验证RPL15基因的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 本章小结 |
| 第五章 候选基因RPL15的克隆和细胞水平的功能验证 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物样品 |
| 1.2 试验细胞株及质粒 |
| 1.3 试验试剂 |
| 1.4 试验仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 肝脏样品RNA的提取和cDNA的合成 |
| 2.2 RPL15基因引物设计与合成 |
| 2.3 RPL15基因克隆 |
| 2.4 RPL15基因序列分析 |
| 2.5 RPL15基因过表达载体构建 |
| 2.6 RPL15基因干扰载体构建 |
| 2.7 HEPG2细胞复苏与培养 |
| 2.8 HEPG2细胞转染 |
| 2.9 qRT-PCR检测RPL15互作基因的表达 |
| 2.10 qRT-PCR检测相关癌基因和抑癌基因的表达 |
| 2.11 数据处理和分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 广西巴马小型猪RPL15基因克隆 |
| 3.2 广西巴马小型猪RPL15基因序列分析 |
| 3.3 RPL15基因真核表达载体酶切验证 |
| 3.4 HEPG2肝脏细胞RPL15基因过表达结果 |
| 3.5 HEPG2肝脏细胞RPL15基因表达干扰结果 |
| 3.6 RPL15互作基因的表达验证 |
| 3.7 HEPG2肝脏细胞中癌基因和抑癌基因的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 本章小结 |
| 第六章 候选基因RPL15在小鼠T2DM模型中的表达分析 |
| 1 材料 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 动物日粮 |
| 1.3 试验耗材和试剂 |
| 1.4 试验仪器 |
| 2 试验方法 |
| 2.1 试验动物的饲养 |
| 2.2 空腹血糖检测 |
| 2.3 腹腔注射葡萄糖耐试验(IGTT) |
| 2.4 qRT-PCR检测小鼠RPL15基因组织表达 |
| 2.5 Western Blot验证小鼠肝脏RPL15基因的表达 |
| 2.6 数据分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 体重测定 |
| 3.2 空腹血糖(FBG)测定结果 |
| 3.3 腹腔注射葡萄糖耐试验(IGTT)结果 |
| 3.4 小鼠RPL15基因组织表达分析 |
| 3.5 Western Blot验证RPL15蛋白在肝脏的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 本章小结 |
| 全文总结与创新 |
| 1 总结 |
| 2 本研究的创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表论文情况 |
（10）手术干预式肝衰竭动物模型的研究现状（论文提纲范文）
| 1 单纯手术干预式肝衰竭模型 |
| 1.1 肝血供处理式肝衰竭模型 |
| 1.1.1 门静脉阻断 |
| 1.1.2 肝动脉阻断 |
| 1.1.3 胆总管阻断 |
| 1.2 肝切除动物模型 |
| 1.2.1 全肝切除模型 |
| 1.2.2 部分肝切除模型 |
| 1.3 其他单纯外科手术式肝衰竭模型 |
| 2 外科手术辅助式肝衰竭模型 |
| 3 制作模型的实验动物选择 |
| 3.1鼠类 |
| 3.2 兔类 |
| 3.3 犬类 |
| 3.4 猪类 |
| 3.5 非人灵长类 |
| 4 小结 |
四、小型猪胃肠道外科手术模型简介（论文参考文献）
- [1]“移形吻合术”联合5-FU治疗肝门部良性胆管狭窄及预防再狭窄的实验研究[D]. 余发坤. 大理大学, 2021(09)
- [2]消化道梗阻下超声内镜引导胃肠吻合对代谢功能障碍相关脂肪性肝病的脂代谢的治疗作用及机制研究[D]. 高海欣. 中国医科大学, 2021(02)
- [3]经胃自然腔道内镜手术（TG-NOTES）临床应用初探[D]. 李杉. 中国人民解放军陆军军医大学, 2020(01)
- [4]我国小型猪的培育及利用现状[J]. 陈华. 今日养猪业, 2020(03)
- [5]内镜超声引导下胃肠吻合术的研究[D]. 王国鑫. 中国医科大学, 2020(01)
- [6]3D打印技术应用于胰肠吻合装置的设计制造与动物实验[D]. 杨媛媛. 福建医科大学, 2019(07)
- [7]DCD巴马小型猪肝脏常温机械灌注下劈离肝脏移植的实验研究[D]. 吴凤东. 天津医科大学, 2019(02)
- [8]内镜超声引导下消化道与胆囊暂时性支架吻合及关闭吻合口后对胆囊病理生理改变的研究[D]. 张凯. 中国医科大学, 2019(01)
- [9]STZ和食物诱导的广西巴马小型猪T2DM模型肝脏转录组和蛋白质组差异分析[D]. 吴延军. 广西大学, 2019(06)
- [10]手术干预式肝衰竭动物模型的研究现状[J]. 黄高,文明波,畅庚云. 医学综述, 2017(22)