一、大鼠电击死心脑肺及皮肤超微结构的改变（论文文献综述）
任梅荣[1]（2021）在《基于Wnt/β-catenin通路探讨左归丸对先天肾虚仔鼠免疫功能的影响及其机制研究》文中研究说明目的研究先天肾虚影响免疫功能的理论机制;采用复合应激法,复制仔鼠先天肾虚模型,基于Wnt/β-catenin信号通路,从胸腺角度研究补肾填精代表方之一的左归丸对仔鼠免疫功能的影响及其作用机制。方法1.理论研究:阐明先天肾虚的病因病机及表现,探讨先天肾虚影响免疫功能的理论机制,探求先天肾虚的治疗方法。2.动物实验:3月龄SPF级SD发情期大鼠60只,雌雄SD大鼠按照2:1的比例每晚合笼制备30只孕鼠,将孕鼠随机分为正常组、模型组、胸腺肽组（0.003g/kg）、左归丸高剂量组（800g/L）和左归丸低剂量组（200g/L）,每组6只。正常组不造模给予生理盐水灌胃;模型组造模给予生理盐水灌胃;胸腺肽组造模给予胸腺肽胶囊溶液灌胃;左归丸高剂量组和左归丸低剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃。采用复合应激法刺激孕鼠,直至仔鼠出生。提取新生仔鼠出生当天胸腺和脾脏,计算仔鼠的胸腺指数和脾脏指数,运用流式细胞学技术检测仔鼠胸腺和脾脏内T细胞的分型,运用RT-PCR和Western Blot技术检测Wnt4、β-catenin、Foxn1基因和蛋白在仔鼠胸腺组织内的表达。用SPSS 22.0对所得数据进行统计学分析,结果用均数加减标准差（x±s）表示,组间比较采用单因素方差分析。3.细胞实验:培养SD仔鼠胸腺上皮细胞（TECs）,通过广谱细胞角蛋白（PCK）免疫荧光染色进行细胞类型的鉴定。CCK-8法测定左归丸含药血清和Wnt4抑制剂（ICG-001）对细胞增值率的影响,Western Blot检测不同ICG-001浓度的抑制效果,两者结合判断左归丸含药血清和ICG-001的最佳实验浓度。将分离培养的TECs分为:对照组、补肾组、Wnt抑制剂对照组、Wnt抑制补肾组。处理24小时后,运用RT-PCR和Western Blot技术检测Wnt4、β-catenin、Foxn1基因和蛋白的表达,运用Elisa技术检测胸腺素β4（TMSβ4）与胸腺素α1（Tα1）的含量。结果1.先天肾虚为母代肾虚影响子代而致,先天肾虚正气衰弱,以虚为主,表现出肾相应生理功能的障碍和人体免疫紊乱。2.先天肾虚存在人体的阴阳、气血津液、五脏功能的失调,进而影响人体的免疫功能。2.动物实验:与正常组比较,模型组仔鼠胸腺指数和脾脏指数下降（P<0.05）;与模型组比较,胸腺肽组、左归丸高剂量组仔鼠胸腺指数和脾脏升高（P<0.05）。流式细胞检测显示:与正常组比较,模型组仔鼠胸腺内SP细胞数上升（P<0.05）,模型组仔鼠胸腺内CD4+/CD8+上升（P<0.05）,脾脏内CD4+/CD8+下降（P<0.05）;与模型组比较,胸腺肽组、左归丸高剂量组和左归丸低剂量组胸腺内SP细胞数下降（P<0.05）,胸腺内CD4+/CD8+下降（P<0.05）,脾脏内CD4+/CD8+上升（P<0.05）。RT-PCR和Western Blot检测显示:与正常组比较,模型组仔鼠胸腺内Wnt4、β-catenin、Foxn1基因和蛋白的表达减少（P<0.05）;与模型组比较,胸腺肽组、左归丸高剂量组和左归丸低剂量组胸腺内Wnt4、β-catenin、Foxn1基因和蛋白的表达增加（P<0.05）。3.细胞实验:PCK免疫荧光染色确定纯化的细胞为TECs。CCK-8检测显示:25μM浓度以下的抑制剂ICG-001和10%,20%的左归丸含药血清不影响细胞增值率,Western Blot检测显示:25μM浓度以上的抑制剂ICG-001可以抑制TECs内Wnt4的表达。结合两者选取25μM的ICG-001和20%的左归丸含药血清作为实验的药物浓度。Elisa结果显示:与对照组比较,Wnt抑制剂对照组内TMSβ4和Tα1的含量减少（P<0.05）,补肾组内TMSβ4和Tα1的含量增加（P<0.05）;Wnt抑制对照组比较,Wnt抑制补肾组内TMSβ4和Tα1的含量增加（P<0.05）。RT-PCR和Western Blot检测结果显示:与对照组比较,Wnt抑制剂对照组内Wnt4、β-catenin、Foxn1基因和蛋白的含量减少（P<0.05）,补肾组内Wnt4、β-catenin、Foxn1基因和蛋白的含量增加（P<0.05）;与抑制剂对照组比较,Wnt抑制剂补肾组内Wnt4、β-catenin、Foxn1基因和蛋白的含量增加（P<0.05）结论1.先天肾虚存在机体的阴阳、气血津液、五脏功能异常,进而影响机体的免疫状态。通过母代补肾填精法预防子代先天肾虚,或是治疗先天肾虚的新方法之一。2.复合应激法能够成功复制先天肾虚模型。3.胸腺内Wnt/β-catenin信号通路表达异常影响T细胞分化发育和迁徙,这可能是先天肾虚仔鼠免疫紊乱的机制之一。4.左归丸能够通过激活胸腺内Wnt/β-catenin信号通路,增加Foxn1的表达,促进TECs分泌胸腺肽,调控T细胞分化发育和迁徙,这可能是补肾填精法改善先天肾虚免疫紊乱状态的作用机制之一。
王雪[2]（2019）在《运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响》文中研究表明目的:观察运动预处理对老龄大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及心肌Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响,探讨其相关机制。方法:将48只雄性SD老龄大鼠随机分成对照组、模型组、运动预处理+模型组、运动预处理+对照组,每组12只。采用Langendorff离体灌流系统建立大鼠离体心肌缺血/再灌注（ischemia/reperfusion,I/R）模型。本实验检测的指标:全程监测并记录平衡灌注末期与再灌注末期各实验组心率与左心室发展压等心功能相关指标;再灌注结束后,选用TTC染色法测量大鼠心肌梗死面积;利用透射电镜观察老龄大鼠心肌细胞超微结构和自噬体的形成;采用Western Blot法检测老龄大鼠心肌内Beclin 1、Atg5蛋白表达含量。结果:1.各组大鼠心功能变化:与模型组比较,对照组、运动+对照组、运动+模型组的心功能指标均升高,差异有统计学意义（P<0.05）;与对照组比较,运动+对照组心功能指标升高,差异有统计学意义（P<0.05）;2、各组大鼠心肌梗死面积:与模型组相比,运动+模型组心肌梗死面积减小,差异有统计学意义（P<0.05）;对照组与运动+对照组不存在心肌梗死区域。3、各组大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的变化:对照组与运动+对照组在透射电镜下的心肌纤维排列均整齐且紧密,心肌细胞形态正常,细胞核膜完整,基本未见自噬体,运动+对照组较对照组的线粒体嵴数量更丰富;模型组出现明显的自噬体,心肌纤维束排列疏松紊乱,心肌细胞线粒体肿胀,嵴密度降低,很难见完整的细胞器结构;运动+模型组的心肌细胞超微结构较模型组明显改善,电镜下可观察到肌原纤维排列整齐,肌小节完整,线粒体形态和结构基本正常,视野内有少量自噬体出现。4、各组大鼠心肌Beclin 1、Atg-5蛋白表达含量:与模型组比较,对照组Beclin1、Atg-5蛋白表达明显降低,差异有显着统计学意义（P<0.01）,运动+模型组Beclin1、Atg-5蛋白表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）;对照组心肌内Beclin 1、Atg-5蛋白表达处于基础水平,与对照组比较,运动+对照组Beclin 1、Atg-5蛋白增加,差异有统计学意义（P<0.05）;结论:1.运动预处理可改善老龄大鼠心脏功能,减小心肌梗死面积,发挥心脏保护作用。2.运动预处理可通过调节老龄大鼠心肌细胞中Beclin 1、Atg-5蛋白表达,降低心肌细胞过度自噬,减轻心肌缺血/再灌注损伤。
田沛[3]（2019）在《不同温度水疗干预对大鼠慢性应激损伤的防护效应及机制》文中指出应激与人类健康密切相关,适度的应激可调动防御机制对机体有利,但持续过高强度的慢性应激会在生理、心理和行为等方面对机体产生不良影响,甚至引起多种应激性疾病。研究表明,持续较高强度的应激负荷可造成机体损伤,影响个体健康、降低工作效率、导致疲劳;甚至会诱发多种疾病,发生猝死等极端事件。研究表明,75%90%的人类疾病和应激有关。心血管是应激所致损伤的首要靶器官,多种应激动物模型（如噪声、电击、束缚、湿热和力竭游泳等）均证实,应激可引起心肌损伤和血管内皮功能障碍,引发或加重心血管疾病。飞行人员作为一个特殊群体,长期应对航空特殊环境（噪声、振动、加速度、缺氧等）和特殊情况（雷暴、大风等特殊气象,空中发动机故障等特殊事件）所造成的各种心理生理应激。飞行人员所面临的应激因素更加复杂、刺激强度更加强大、危害程度更加严重。飞行人员虽然经过层层严格健康选拔,但心血管病还是时有发生,且心血管病后果严重,减少飞行寿命,甚至危及飞行安全。调查发现,我国军事飞行员高血压患病率在2.59.8%,而高血压前期人数比例却高达38.1%。然而,目前关于飞行应激损伤机制和防护措施研究还相对比较滞后,尚远远不能满足航空事业飞速发展的现实需要,特别是国内对应激损伤干预手段还主要以精神心理卫生干预为主、药物治疗为辅,非药物措施十分缺乏,因此寻找一种安全、无创、简单、快速、有效,具有防应激、抗疲劳作用的措施办法显得更加迫切和重要。水疗法（Hydrotherapy）作为一种传统康复疗法具有无创、安全、高效等特点,主要利用水对人体产生的温度、机械和化学刺激,达到治疗和预防疾病的目的。当前水疗在运动医学和康复医学领域发展迅速。临床实践表明,水疗对高血压、类风湿性关节炎、脑瘫等多种疾病以及亚健康的预防和康复具有明显有益效果,同时也被应用于高水平运动员运动后疲劳和损伤的恢复。可能主要与水的温热效应促进血液循环、调控细胞代谢、诱导热休克蛋白的合成与释放、降低氧化应激反应等有关。然而,国内外对于不同温度水疗干预是否能够缓解慢性应激及其造成的心血管损伤尚未见报道。我国关于水疗的应用虽然具有悠久历史,但长期以来水疗在现代医学和军事医学中的作用未被充分认识和应用,国内外虽有研究观察了水疗后人体生理生化指标的改变,仍缺乏系统性的基础理论研究,针对水疗的生物学效应和机制尚未完全阐明。因此,本研究拟通过构建慢性应激大鼠动物模型,观察不同温度水疗干预对慢性应激损伤尤其是心血管损伤的影响,探寻最优的抗慢性应激损伤水疗干预方案,并研究其机制。实验目的1.观察热水浴、冷水浴、常温水浴和冷热交替水浴4种不同温度水疗干预方案对大鼠慢性应激损伤的防护效果。2.研究特定水疗干预方案的在慢性应激所致心血管损伤中的保护效应及机制。实验方法1.建立慢性应激动物模型:选取8周龄成年雄性SD大鼠,采用噪声复合足底电击刺激诱导大鼠应激模型,电流强度35 m A,随机间隔220 s,持续电击12 s,随机电击结束当天夜间继续给予持续噪声（2002000 Hz,80100 d B）,每天电击4小时（上下午各1次,每次2小时）,噪声刺激4小时,共持续28天。2.水疗干预方案:每天下午大鼠电击刺激结束,自由饮食休息1小时后给于水疗干预处理,水疗在特制塑料圆筒（直径20 cm,高60 cm）中进行,水深1025 cm,时间10 min。水温根据具体实验分组方案分别设定,其中热水浴（Hot water immersion,HWI）水温3840℃;冷水浴（Cold water immersion,CWI）水温1315℃;常温水浴（Thermoneutral water immersion,TWI）水温3436℃;冷热交替水浴（Contrast water therapy,CWT）的热水温3840℃,冷水温1315℃,热水2 min后换入冷水1 min,交替循环3次,共10 min。3.血压测量:隔天于电击结束后2 h使用智能无创血压计测量各组大鼠的尾动脉收缩压（SBP）和舒张压（DBP）,每隔4天测量1次,每只大鼠测量5次取平均值。4.血清激素和炎症因子等测定:采用ELISA法测定血清中应激激素皮质醇（Cor）、血管紧张素Ⅱ（Ang II）、去甲肾上腺素（NE）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）含量,应激28天后采用30 g/L戊巴比妥钠按50 mg/kg腹腔注射麻醉,取腔静脉血,离心,检测血清Cor、Ang II、NE、TNF-α、CK和LDH含量。5.测定肠系膜血管收缩和舒张功能:使用微血管灌流仪（DMT）对大鼠肠系膜微动脉进行功能检测。血管初始预负荷设置为2 m N,稳定1 h,随后用60 mmol/L KCl溶液作用血管2次,选取收缩幅度相差<10%,且张力大于l m N的血管。血管功能测定时,采用浓度累加法,分别加入血管舒张和收缩试剂。最后,根据舒张程度和数值,评定血管舒张和内皮功能;根据收缩程度和数值,评定血管平滑肌收缩功能。6.免疫荧光染色:石蜡切片脱蜡,蒸馏水和PBST漂洗,正常血清封闭液室温封闭20 min,滴加LC3II一抗工作液。湿盒内37℃恒温箱内孵育1小时,PBST漂洗,滴加二抗工作液,湿盒内37℃恒温箱内孵育20 min,PBST漂洗后滴加荧光素工作液,湿盒内37℃恒温箱内孵育30 min,避光保存,PBST充分漂洗,滴加2050μl DAPI,充分漂洗后用封片剂进行封片。倒置荧光显微镜观察,采集图像。7.透射电镜及线粒体数目测算:将新鲜心肌组织切成1 mm3的组织块,置于30ml/L戊二醛磷酸缓冲液中,4℃避光固定。梯度乙醇脱水和丙酮浸5 min,Epon812包埋,制成超薄切片,在透射电镜下观察心肌线粒体超微结构并测算数目。8.Western blotting检测蛋白水平:采用RIPA提取大鼠左心室和腹主动脉血管组织蛋白,BCA法进行蛋白定量。将蛋白样品（每孔5-10μL）行SDS-PAGE电泳后转移至PVDF膜。在50 g/L脱脂牛奶中室温封闭1 h,加入相应一抗（1:1000）4℃孵育过夜,洗去多余一抗后加入相应二抗,37℃孵育1 h,洗去多余二抗后使用ECL-Plus试剂盒进行化学发光检测,β-actin为各组内参对照。用成像软件系统（aplegen Omega Lum C）进行条带光密度值分析。9.行为学实验:旷场实验和高架十字迷宫实验均在安静的环境下进行,分别将大鼠放入旷场反应箱内底面中心/高架十字迷宫中心,同时开启摄像并计时,旷场实验和高架十字迷宫实验均观察5 min后停止摄像。10.采用Graph Pad Prism version 8.0统计软件进行统计学分析。实验结果表示为平均数±标准差,P<0.05为差异有统计学意义。实验结果1.噪声复合足底电击28天能够成功构建大鼠慢性应激损伤模型。与对照组大鼠相比,应激组大鼠存在明显应激反应和心血管损伤,主要表现为体重显着降低（P<0.01）、血糖明显升高（P<0.05）、血压明显升高（P<0.05）,血清Cor、NE、Ang II、TNF-α、ADMA浓度和CK、LDH水平升高（P<0.05）;血清中NO含量降低（P<0.05）;心肌组织自噬相关蛋白LC3II/I、p62、Beclin1表达增加（P<0.05）,线粒体数量减少并呈现结构紊乱。此外,旷场实验和高架十字迷宫实验结果表明大鼠自发活动行为及探索行为明显减少,焦虑增加。2.不同温度水疗干预对大鼠慢性应激的效应各不相同,长期热水浴干预改善慢性应激的效果最佳。与应激组大鼠相比,每天仅10分钟的热水浴干预,就能显着降低大鼠全身的慢性应激反应,减缓应激大鼠的体重下降,加速应激后血糖水平的恢复,逆转应激大鼠的血压升高（P<0.05）,降低应激大鼠焦虑水平,改善应激大鼠自发活动和探索行为（P<0.05）。此外,冷热交替水浴也可逆转应激大鼠的血压升高,但起效较晚,直到干预末期（24天）才出现血压降低（P<0.05）。而其他温度水疗干预对应激大鼠体重、血压、血糖和行为学等均无明显影响（P>0.05）。3.热水浴能有效改善慢性应激大鼠血管内皮功能。与应激组大鼠相比,热水浴组大鼠内皮依赖的血管舒张显着改善,血清NO水平升高（P<0.05）、ADMA浓度下降（P<0.05）,血管组织e NOS磷酸化水平、DDAH1表达水平增加（P<0.05）。在培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中每天10分钟40℃孵育能较好模拟热水浴对血管内皮的效应,体现为温热孵育使应激激素处理后HUVECs分泌NO增加,ADMA浓度下降,DDAH1表达增加,使用si DDAH1可特异性阻断DDAH1表达,从而增加ADMA浓度,降低NO分泌水平。4.热水浴能有效减轻慢性应激大鼠心肌损伤。与应激组大鼠相比,热水浴组大鼠CK、LDH水平降低,p62和Beclin1表达水平减少（P<0.05）,心肌线粒体结构损伤亦有所逆转。结论1.本研究首次发现,长期热水浴较冷水浴、常温水浴和冷热交替水浴等其他温度水浴能有效减轻大鼠慢性应激状态。2.热水浴降低慢性应激诱发的血压升高,其机制与热水浴增加内皮DDAH1表达、降低内源性e NOS抑制物ADMA生成,从而增加内皮NO生物利用度有关。3.热水浴调控应激所致心肌细胞自噬紊乱和促进心肌线粒体结构恢复,减轻慢性应激性心肌损伤。热水浴可望作为缓解慢性应激、预防应激性高血压和心肌损伤的有效防护手段。
贾文睿[4]（2017）在《针刺对应激性高血压前期大鼠心脏基因表达谱的影响》文中提出高血压作为最常见的慢性病,是心脑血管疾病最主要的独立危险因素,在全球范围内广泛存在并严重危害着人类健康。高血压的发病机制与环境因素密切相关,长期的应激刺激可导致高血压疾病的发生。动物或人长期处于应激状态下会出现心率增快、血压升高等心血管功能亢进的反应,并能逐渐发展为应激性高血压。伴随现代社会生活压力的增加,长期从事精神紧张工作人群的应激性高血压患病率显着升高。临床上高血压的发生大多会经历一个从正常血压（120 mmHg/80 mmHg）向一期高血压（≥140 mmHg/90 mmHg）发展的缓慢过程,即高血压前期阶段。美国高血压预防、诊断、评价与治疗联合委员会的第7次报告中首次正式提出了"高血压前期"的概念,是指收缩压在120-139 mmHg之间和或舒张压在80-89mmHg之间的阶段。大量流行病学证据表明,高血压前期在某些国家的发生比例高达30%-50%。应激性高血压的发病过程经历了一个从生理向病理演变的高血压前期阶段,即应激性高血压前期（stress-induced prehypertension,SIPH）。高血压前期常合并传统心血管疾病危险因素,并且与心血管疾病的发病密切相关。有研究指出在SIPH阶段出现了亚临床靶器官的损害以及相应基因和蛋白表达的改变。因此对SIPH及时进行预防性干预,将能有效遏制高血压的发生,并可保护靶器官、降低心脑血管疾病的发病率。而针刺作为一种替代药物的治疗方法,具有便捷、安全、少不良反应等突出优势,已用于治疗包括高血压在内的多种心血管疾病。高血压是一种受大量基因调控的多基因疾病,心脏是高血压病最容易累及的靶器官,针刺可通过调控特定基因的表达从而起到降压和心脏保护作用。本课题组既往研究发现SIPH模型大鼠出现血管内皮功能异常、心肌损害等现象,针刺可有效调控SIPH模型大鼠的血压,对血管内皮因子一氧化氮、乙酰胆碱、神经肽Y等均有影响,对血管内皮功能具有保护作用。本实验采用基因芯片技术观察针刺对SIPH大鼠心脏基因表达谱的影响,以探究针刺对SIPH的降压以及心脏保护作用机制。研究目的:探究针刺对SIPH大鼠心脏基因表达谱的影响效应,寻找针刺调控SIPH的干预靶点,以揭示针刺对SIPH的降压以及心脏保护作用机制。研究方法:实验一:针刺对SIPH大鼠血压及心肌组织形态学的影响将36只雄性Wistar大鼠随机分为空白组,模型组和模型+针刺组,每组各12只。运用足底电击结合噪声的复合刺激方法对模型组与模型+针刺组大鼠进行为期11天的造模,制备SIPH大鼠模型,并在造模过程中对模型+针刺组进行针刺干预。分别在造模前1天以及造模第3、5、7、9、11天测量大鼠收缩压（Systolic pressure,SP）,并于造模结束后第二天进行取材,运用HE染色法观察各组大鼠心肌组织形态学变化。实验二:针刺对SIPH大鼠心肌基因表达谱的影响采用Rat Gene 2.0 Array技术观察三组大鼠心肌基因表达谱的改变,以（P<0.05,Fold Changes>1.5 or Fold Changes<-1.5）为标准筛选差异表达基因。运用GO功能富集分析以及KEGG通路富集分析对致病相关差异基因以及针刺治疗后的反应基因进行相关生物学功能与通路分析,以期揭示针刺调控SIPH的干预效应机制,为高血压病的防治提供科学依据。实验三:针刺对S1PH大鼠心肌组织中HbA1c、Igfbp-3、Pik3ca、Car4 mRNA表达的调控通过检索 National Center for Biotechnology Information（NCBI）数据库以及查阅文献资料,从三个组的共同差异表达基因中筛选出与SIPH发病及针刺治疗均密切相关的基因HbA1c、Igfbp-3、Pik3ca、Car4作为关键基因,运用荧光定量PCR技术（quantitative real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）对其 mRNA 表达量进行验证。通过观察造模后及针刺治疗后SIPH大鼠心肌HbA1c、Igfbp-3、Pik3ca、Car4 mRNA的表达变化,探讨针刺改善SIPH的分子生物学机制。研究结果:实验一:血压结果显示从造模开始直至造模第11天结束,模型组大鼠SP持续升高并一直保持在高血压前期水平,与空白组大鼠SP相比,均具有极显着性差异（all,P<0.01）。造模过程中,大鼠出现了明显的体征及行为学改变,出现情绪紧张、易激惹、眼睛充血外凸等现象。造模结束时模型大鼠出现心肌细胞排列紊乱、松散,细胞核变大或溶解等一系列组织病理学改变。提示造模成功。与模型组相比,模型+针刺组大鼠SP在针刺第5、第7天明显降低,有极显着性差异（all,P<0.01）,针刺第9、第11天,有显着性差异（all,P<0.05）。说明针刺太冲、曲池穴对SIPH有明显的降压作用。模型+针刺组大鼠的大部分心肌细胞结构正常,部分细胞核形态发生改变,损伤程度轻于模型组大鼠,说明针刺可改善高血压靶器官心脏的损害,具有心保护作用。实验二:基因芯片结果显示,模型组与空白组相比有192个差异表达基因,其中126个下调,66个上调;模型+针刺组与模型组相比,有169个差异表达基因,其中39个下调,130个上调。有49个基因是三个组的共同差异表达基因,其在模型制备以及针刺干预后均发生显着的表达差异,通过检索NCBI数据库以及查阅大量文献,从中筛选出与SIPH发病及针刺治疗均密切相关的基因HbA1c、Igfbp-3、Pik3ca、Car4,把它们作为关键基因。GO功能富集分析结果显示模型组与空白组的差异表达基因主要功能是节律过程（rhythmic process）、生理节律（Circadian rhythm）、平移伸长（translational elongation）、核糖体（ribosome）等,模型+针刺组与模型组的差异表达基因主要功能是胞质核糖体（cytosolic ribosome）、核糖体亚基单位（ribosomal subunit）、翻译延伸等（translational elongation）、胞质成分（cytosolic part）。KEGG 通路分析显示有 6 条通路既是与模型组VS空白组差异表达基因相关的通路,同时也是与模型+针刺组VS模型组差异表达基因相关的通路。其中rno03010:Ribosome是富集度最高的通路,与SIPH的发病及针刺治疗SIPH均密切相关。通过检索GenomeNet、KEGG PATHWAY Database数据库以及查阅文献资料,发现rno04115:p53信号通路与高血压及心脏病的发病密切相关。由此推测rno03010:Ribosome与rno04115:p53信号通路是针刺调控SIPH的关键通路。实验三:与空白组相比,模型组基因HbA1c、Car4的表达均显着升高（P<0.01）,Igfbp-3、Pik3ca的表达显着下降（P<0.01,P<0.05）。与模型组相比,模型+针刺组HbA1c、Car4的表达显着下降（P<0.01,P<0.05）,Igfbp-3、Pik3ca的表达显着升高（P<0.01,P<0.05）。PCR结果与芯片结果相一致。提示:针刺调节SIPH大鼠血压的机制可能与调控高血压相关基因HbA1c、Igfbp-3、Pik3ca和Car4的表达有关。结论:1.针刺太冲、曲池穴对SIPH大鼠具有明显的降压效应并且对大鼠心肌损伤具有一定程度的保护作用。2.针刺太冲、曲池穴可对SIPH大鼠心肌基因表达谱产生影响。3.SIPH大鼠心肌关键基因HbA1c、Igfbp-3、Pik3ca、Car4的mRNA异常表达可能是SIPH发病的重要分子生物学机制,而针刺太冲、曲池穴降压及心保护作用可能是通过调控关键基因的表达及其信号转导通路实现。
管磊剑[5]（2017）在《孕期纳米氧化铝经鼻暴露对子代海马CA1区突触结构及学习记忆行为的影响》文中研究表明纳米氧化铝（Aluminum Oxide Nanoparticles,Al2O3-NPs）是生产最多应用广泛的纳米材料,大量Al2O3-NPs进入空气,被吸入人体内,这需要重新评价经鼻Al2O3-NPs暴露的毒性,特别是孕期Al2O3-NPs经鼻暴露引起的毒性危害。首先,我们建立孕期Al2O3-NPs经鼻暴露SD大鼠和C57BL/6小鼠模型,孕鼠随机分为3 组（ddH2O,Al2O3-NPs,AlCl3（0.7mg Al/kg和 1.4mg Al/kg））,整个孕期每天鼻腔滴注直至子鼠出生停止染毒。分别在子代SD大鼠Pl、P21天处死并收集脏器,利用ICP-MS分析检测子鼠血清、P1、P21脏器中总铝含量;SD大鼠海马区 real-time PCR、Western Blot 检测突触相关（NR2B、PSD-95、SNAP25）mRNA、蛋白表达水平:P21 SD大鼠经心脏灌注固定后,分离海马CA1区制备TEM样本,观测CA1区突触结构变化。C57BL/6小鼠P35进行学习记忆实验（跳台实验、避暗实验、水迷宫实验）,完成后处死并收集脏器,Western Blot分析突触相关蛋白（NR2B、PSD-95、SNAP25）表达水平。ICP-MS分析检测SD大鼠血清中总铝含量发现,P1 SD大鼠血清中Al203-NPs组血清总铝含量显着高于对照组、AlCl3组。而P21 SD大鼠血清,各组间无显着性差异。P1 SD大鼠肝、肺、脾、肾、脑,Al203-NPs组脏器总铝含量均显着高于对照组、AlCl3组。P21 SD大鼠肝、肺、脾、肾、下丘脑、海马区、大脑皮层,Al2O3-NPs组脏器总铝含量均显着高于对照组、AlCl3组。real-time PCR结果显示,子代SD大鼠海马区突触相关基因NR2B、PSD-95、SNAP25的表达水平在各组间无显着性差异。子代SD大鼠海马区突触相关蛋白NR2B、PSD-95的表达水平在各组间存在显着性差异,而SNAP25表达水平未出现显着。分析TEM照片发现,各组间突触计数、突触后致密物厚度均存在显着性差异,而突触活性区长度各组间无显着性差异。C57BL/6小鼠行为学结果显示,各组间小鼠错误次数未出现显着性差异。C57BL/6小鼠海马区突触相关蛋白NR2B、PSD-95的表达水平在各组间存在显着性差异,而SNAP25表达水平未出现显着。因此我们认为孕期Al203-NPs经鼻暴露可改变子代海马CA1区突触微结构,引起海马区NR2B/PSD-95蛋白表达水平改变,但并未导致子代出现行为学改变。第一部分孕期纳米氧化铝经鼻暴露引起子代海马区铝蓄积目的采用孕期SD大鼠模型鼻腔滴注纳米氧化铝,观察子代铝蓄积情况。方法分别运用TEM和DLS法对纳米氧化铝进行表征实验。雌雄SD大鼠各21只,交配怀孕后孕鼠单独饲养,随机分为3组（ddH2O,Al2O3-NPs,AlCl3（0.7mg Al/kg体重））,整个孕期每天鼻腔滴注直至子鼠出生。分别在子代P1、P21天处死并收集脏器,利用ICP-MS分析检测子鼠血清、P1、P21脏器中总铝含量。结果通过TEM和纳米粒径及电位分析仪对Al203-NPs大小进行表征,TEM结果显示,Al2O3-NPs分散均匀,平均粒径为36.7±12.4nm。动态光散色法结果显示,Al2O3-NPs在超纯水中有轻微的团聚,水合粒径为70.1±32.5nm。ICP-MS分析检测子代血清中总铝含量发现,P1子鼠血清中Al2O3-NPs组血清总铝含量显着高于对照组、AlCl3（P<0.001,P<0.01）。而P21子鼠血清,各组间无显着性差异。P1子鼠肝、肺、脾、肾、脑,Al2O3-NPs组脏器总铝含量均显着高于对照组、AlCl3组（all P<0.001）。P21子鼠肝、肺、脾、肾、下丘脑、海马区、大脑皮层,Al2O3-NPs组脏器总铝含量均显着高于对照组、AlCl3组（all P<0.001）。具体如下,Al2O3-NPs组肝、肺、脾、肾脏中总铝含量显着高于对照组、AlCl3组（all P<0.001）;Al2O3-NPs、AlCl3组下丘脑总铝含量显着高于对照组（P<0.001,P<0.01）;Al2O3-NPs、AlCl3组海马区总铝含量显着高于对照组（P<0.001,P<0.01）,Al2O3-NPs组总铝含量高于AlCl3组（P<0.05）;Al2O3-NPs组大脑皮层中总铝含量显着高于对照组、AlCl3组（both P<0.001）。结论孕期Al2O3-NPs经鼻暴露后,子代血清及各脏器中出现铝蓄积,尤其是在大脑中出现蓄积。第二部分 孕期纳米氧化铝经鼻暴露引起子代海马CA1区突触结构改变目的由于孕期纳米氧化铝暴露后出现子代大脑铝蓄积,为研究对子代突触可塑性影响,观察分析海马CA1区突触结构改变及突触相关基因蛋白改变。方法（1）子鼠海马区总RNA提取,real-time PCR检测突触相关基因mRNA表达水平;（2）子鼠海马区蛋白质提取,Western Blot分析突触相关蛋白表达水平;（3）P21子鼠采用心脏灌注固定后,TEM观测CA1区突触结构变化。结果real-time PCR显示,子代大脑海马区突触NR2B、PSD-95、SNAP25的mRNA表达水平在各组间无显着性差异。子代大脑海马区突触相关蛋白NR2B、PSD-95的表达水平在各组间存在显着性差异,而SNAP25表达水平未出现差异。灰度分析显示,Al2O3-NPs和AlCl3组PSD-95蛋白表达显着高于对照组（both P<0.001）,Al2O3-NPs和AlC13间无显着性差异;Al2O3-NPs组NR2B蛋白表达显着高于AlCl3和对照组（both P<0.001）,AlCl3和对照组间无显着性差异。统计分析TEM照片,各组间突触计数、突触后致密物厚度均存在显着性差异,而突触活性区长度各组间无显着性差异。如下,Al2O3-NPs和AlCl3组突触计数显着高于对照组（P<0.05,P<0.001）,AlC13组突触计数显着高于Al2O3-NPs组（P<0.05）;Al2O3-NPs和AlCl3组突触后致密物厚度显着小于对照组（P<0.01,P<0.001）。结论孕期SD大鼠Al2O3-NPs经鼻暴露引起的海马区铝蓄积,造成了子代海马区突触相关蛋白（NR2B/PSD-95）表达改变,海马CA1区突触结构改变,这都可能导致子代神经发育损伤。第三部分孕期纳米氧化铝经鼻暴露对子代学习记忆行为的影响目的为研究孕期Al2O3-NPs经鼻暴露引起的子代海马CA1区突触微结构改变,是否导致子代学习记忆行为的改变。方法雌雄C57BL/6小鼠各30只,交配怀孕后孕鼠单独饲养,随机分为3组（ddH20,Al2O3-NPs,AlCl3（1.4mg Al/kg体重））,整个孕期每天鼻腔滴注直至子鼠出生停止染毒。子鼠P35进行学习记忆实验（跳台实验、避暗实验、水迷宫实验）,完成后处死并收集脏器,Western Blot分析突触相关蛋白（NR2B、PSD-95、SNAP25）表达水平。结果C57BL/6小鼠行为学结果显示,各组间小鼠错误次数未出现显着性差异。子代大脑海马区关键蛋白NR2B、PSD-95的表达水平在各组间存在显着性差异,而SNAP25表达水平未出现显着。灰度分析结果显示,Al203-NPs组NR2B蛋白表达显着高于AlCl3和对照组（P<0.001,P<0.05）,对照组NR2B蛋白表达显着高于AlCl3组（P<0.001）;AlCl3组PSD-95蛋白表达显着高于对照组、Al2O3-NPs组（both P<0.001）,Al2O3-NPs和对照组间无显着性差异。结论孕期Al2O3-NPs经鼻暴露可改变子代海马CA1区突触微结构,海马区NR2B/PSD-95蛋白表达水平改变,但并未引起子代出现学习记忆行为损伤。
李贵花,王星,刘德斌,李志军,张少杰[6]（2017）在《电击死心脏窦房结组织纤维连接蛋白的表达》文中提出目的通过研究电击死心脏窦房结组织中纤维连接蛋白（Fibronectin,Fn）的蛋白水平,为电击死的诊断及死亡时间鉴定提供新的理论依据。方法采用免疫组化技术（SP法）检测电击死亡人窦房结15例（人电击组）、重度颅脑损伤人窦房结15例（人对照组）、电击死亡兔窦房结35例（兔电击组分7组:0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h）和断颈处死兔窦房结35例（兔对照组分7组:0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h）的Fn蛋白表达水平。结果人电击组Fn阳性表达率为100%,有强弱之分;人对照组Fn阳性表达率为6.67%,组间差异有极显着性统计学意义（P<0.01）。兔电击组电击后即刻（0 h）就有Fn表达,与兔对照组相比,差异有统计学意义（P<0.05）;电击后3 h、6 h至12 h Fn表达分布越来越广泛,与兔对照组比较差异有极显着性统计学意义（P<0.01）;Fn表达在电击死后24 h逐渐下降,至电击死后48 h仍与兔对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）,而阴性对照组则未见类似改变。结论电击使窦房结Fn表达明显增强,并且随着死亡时间的延长窦房结Fn蛋白阳性表达的光密度值呈规律性变化,可为法医学电击死诊断和死亡时间的鉴定提供新的理论参考依据。
张国忠,李瑞利,冯国伟,毕海涛,王松军,丛斌,左敏[7]（2015）在《电击死大鼠心脏超微结构及HSP70、HIF-1α表达变化》文中研究指明目的观察电击死大鼠心脏超微结构及热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）、低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）的表达变化,探讨其是否能作为电击死法医学鉴定的依据。方法将72只SD大鼠随机分为电击死组、死后电击组和对照组。通过透射电镜观察电击死大鼠心肌超微结构的改变,并采用免疫组织化学技术观测心肌HSP70和HIF-1α的表达变化。结果电击大鼠心肌细胞肌原纤维断裂,线粒体嵴和膜溶解消失,Z线、M线排列紊乱。HSP70和HIF-1α在电击死组呈强阳性表达,与死后电击组、对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 HSP70和HIF-1α在电击死组表达明显上调,有望作为电击死的诊断参考指标。
李瑞利[8]（2014）在《电击死大鼠心脏超微结构及HSP70、HIF-1α、表达变化的研究》文中进行了进一步梳理目的：因电流作用导致人体死亡称电击死。电击死典型尸体征象有电流斑、电灼伤痕、电击花纹及皮肤金属化等。电流斑是诊断电击死的主要形态学依据，寻找并提取电流损伤的皮肤、镜检确认电流斑是诊断电击死的主要依据。但在实际案例中并非每一例电击死都存在电流斑，且死后电击也可以出现电流斑。目前缺乏电流斑电击死的诊断以及生前和死后电击的鉴别是法医病理学鉴定的难点，也是法医学亟待解决的问题，该类案件主要是结合案情、受害人群、触电现场及尸体检验等作出综合判断。而法医病理学尚缺乏较为特异性的形态学或其他方面的指标为诊断提供依据。本实验在建立大鼠电击死模型的基础上，应用HE染色、透射电镜及免疫组织化学染色方法，观察电击死引起心脏超微结构及热休克蛋白70（HSP70）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的变化，探讨其在电击死与死后电击中的不同改变，为电击死的法医病理学鉴定提供一定的诊断依据。方法：健康Sprague-Dawley（SD）大鼠56只，体重220g±10g，雌雄不限，适应环境喂养7天，随机分7组，每组8只。对照组、死后30分钟对照组、死后60分钟对照组：对照组采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后仰卧位固定在鼠架上，将对侧的前后肢用脱毛膏做去毛处理，断头处死大鼠，开胸后取其心脏，局部取材部分切成（0.5-1mm3）小块2-3块，放入装有4%戊二醛的小瓶中，备行透射电镜观察。将剩余心脏部分及肢体局部皮肤放入4％的多聚甲醛中固定，制备石蜡切片，进行HE染色观察，应用免疫组织化学方法观察心脏HSP70、HIF-1α表达情况。死后30分钟对照组和死后60分钟对照组用同样方法处死大鼠，室温放置至相应时间点后取其心脏和皮肤，观察指标同对照组。电击死组：采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后将大鼠仰卧位固定在鼠架上，将对侧的前后肢用脱毛膏做去毛处理，并连接于自制的电击设备，闭合电路后用220V电压电击大鼠2分钟致死，关闭电源后撤去电击设备后即刻取材，实验内容同对照组。死后电击组、死后30分钟电击组、死后60分钟电击组：采用1ml水合氯醛腹腔注射麻醉后仰卧位固定在鼠架上，断头处死大鼠，做去毛处理后，死后电击组即刻用220V电压电击大鼠2分钟，关闭电源后撤去电击设备即刻取材，实验内容同对照组。死后30分钟电击组与死后60分钟电击组分别于处死后30分钟、60分钟用220V家用电压电击大鼠2分钟，关闭电源后撤去电击设备即刻取材，实验内容同上。数据以“均数±标准差（Mean±SD）”表示，用SPSS16.0统计软件进行统计学分析，各组均数的比较行单因素方差分析（ANOVA），用最小显着差法（least significant difference， LSD）作两两比较，以P<0.05为有显着统计学差异。结果：1电击大鼠的一般表现与电击处皮肤观察电击死组大鼠通电后出现强直性抖动，尾巴高高翘起，有淡黄色尿液排出，部分大鼠有大便排出，肢体电击处有烧灼表现；电流斑与接触导体走行一致，色呈灰黄，质较硬、干燥，中央凹陷，周围稍隆起，边缘钝圆，与周围组织分界清晰。死后电击组大鼠也出现强直性抖动，尿液及大便排出。电流斑同样与接触导体走行一致，质较硬、干燥，中央凹陷，与周围组织分界清楚。2HE染色结果2.1皮肤HE染色对照组HE染色光镜下观察见表皮细胞无异常，排列整齐，细胞和胞核无极性化。电击死组光镜下观察见表皮细胞融合变薄、致密、着色深，细胞呈极性化改变，以基底层的细胞最为明显，基底层细胞及细胞核染色深，纵向伸长并且严重扭曲变形。死后电击组光镜下观察见表皮细胞融合变薄，致密，染色较深，细胞间界限不清，表皮细胞胞浆均质化，表皮下空泡形成，基底层细胞及细胞核染色深，纵向伸长并且严重扭曲变形，有核流征表现。2.2心脏HE染色对照组的心肌组织结构清晰可见，心肌细胞大小一致，以心肌动静脉为中心呈索状整齐排列，死后30分钟对照组、死后60分钟对照组的心肌细胞染色仅见部分区域有水肿表现，局部嗜酸性变。电击死组心肌细胞间质有水肿表现，胞浆染色变淡，胞核染色变淡、增大，心肌层有断裂及收缩带坏死的改变，心肌细胞有嗜酸性变。死后电击组的心肌细胞有轻度的水肿，胞浆染色变淡，胞核染色变淡、增大，部分心肌细胞有嗜酸性变；死后30分钟电击组、死后60分钟电击组的心肌细胞染色仅见部分区域有水肿表现，局部嗜酸性变。死后电击各组心肌无断裂及收缩带坏死。3心脏透射电镜观察对照组电镜下观察发现肌纤维间质无异常，血管周围间质无水肿，血管内皮细胞吞饮小泡排列整齐，毛细血管周围无异常表现，结构清楚，Z线M线清晰、无断裂。电击死组电镜下观察发现肌原纤维断裂并且溶解消失，间质出现水肿，线粒体嵴和膜消失并溶解，肌纤维间质水肿，血管周围间质出现水肿，血管内皮细胞吞饮小泡排列密集，毛细血管周围水肿，结构模糊混乱，Z线M线模糊排列紊乱可见断裂。死后电击组电镜下观察发现细胞核边移，肌纤维间质水肿，线粒体嵴和膜消失并溶解，Z线M线模糊排列紊乱。4免疫组织化学结果HIF-1α蛋白在心肌细胞内的表达为胞浆着色，对照组、死后30分钟对照组、死亡60分钟对照组心肌细胞阳性染色较少，各组之间无明显差异。电击死组镜下观察心肌细胞的胞浆染色增强，与对照组比较有明显增高，具有统计学差异（P＜0.001）；死后电击组有阳性表达，与对照组比较具有统计学意义（P＜0.01），死后30分钟电击组与死后60分钟电击组与对照组比较无明显差异。HSP70蛋白在心肌细胞的表达为胞浆着色，对照组、死后30分钟对照组、死后60分钟对照组偶见胞浆黄染出现，阳性染色并不明显，各组之间无明显差异。电击死组细胞黄色增强，与对照组比较有明显增高，具有统计学差异（P＜0.001）；死后电击组有阳性表达，与对照组比较具有统计学意义（P＜0.01），死后30分钟电击组与死后60分钟电击组与对照组比较无明显差异。结论：生前电击和死后电击均可出现电流斑，所以其不能作为区分生前电击与死后电击的依据。而电击死心脏HSP70、HIF-1α蛋白的表达比死后不同时间再电击明显增多，所以其对电击死与死后电击的鉴别诊断具有一定的意义。
萧维维,李兴彪,王陈锋,侯帅,林秀聘,赵瑞,李钰,董缪武[9]（2013）在《水、油污中无电流斑电击死大鼠皮肤和心肌的病变》文中研究说明目的探讨水中、油污中无电流斑电击死法医学鉴定的病理形态学依据。方法 SD大鼠28只,分为水中、油污中无电流斑电击死各1组,典型电流斑组、正常对照组、死后电击组、死后水中、油污中电击各1组共7组。采用肉眼、光镜及投射电镜观察水中、油污中无电流斑电击死大鼠皮肤和心肌组织病理学改变,并与其它各组进行比较。结果采用肉眼观察,生前水中、油污中无电流斑电击死大鼠皮肤未见明显电流斑。普通光镜观察,可见电击中心部位表皮变性坏死、脱落,表皮细胞变薄、致密,表皮细胞或/和毛囊、汗腺、皮脂腺发生极性化改变。电镜观察,透明层和角质层分离脱落,基底细胞肿胀、细胞器减少、核固缩,汗腺导管上皮肿胀,棘细胞中粗面内质网扩张融合成泡状,线粒体肿胀空泡化;但光镜与电镜的变化与生前电击死比较不明显、典型。而死后电击组皮肤则无明显病理学改变。实验各组大鼠心肌的改变与皮肤改变类同。结论采用光镜和投透射电镜观察在潮湿环境中电击死的组织病理学改变,可为无电流斑电击死提供依据。
杨超朋,肉孜·巴依斯,田雪梅,王福磊,闫换芳,李琳,张田,李峰[10]（2012）在《无电流斑电击伤的研究进展》文中研究表明无电流斑电击伤的鉴定是法医学中的难点之一,由于缺少明显的体表痕迹,此类案件的鉴定难度较大。国内外学者采用光镜、电镜、原子吸收光谱等仪器,利用组织化学等方法,对无电流斑电击伤进行了大量的研究,笔者在此将相关研究成果进行综述,希望能够为此类案件的鉴定提供一定的依据。
二、大鼠电击死心脑肺及皮肤超微结构的改变（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大鼠电击死心脑肺及皮肤超微结构的改变（论文提纲范文）
（1）基于Wnt/β-catenin通路探讨左归丸对先天肾虚仔鼠免疫功能的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 理论研究 |
| 1.先天肾虚的理论研究 |
| 1.1 先天肾虚的病因病机 |
| 1.2 先天肾虚的表现 |
| 2.先天肾虚与免疫的相关研究 |
| 2.1 免疫的中医相关研究 |
| 2.2 先天肾虚引起免疫紊乱的理论研究 |
| 2.3 先天肾虚引起免疫紊乱的现代医学研究 |
| 2.4 先天肾虚的治疗方法 |
| 3.总结 |
| 第二部分 动物实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 动物模型制备 |
| 2.3 给药剂量和方法 |
| 2.4 标本采集 |
| 2.5 检测指标 |
| 3.实验结果 |
| 3.1 先天肾虚模型指标结果 |
| 3.2 仔鼠胸腺指数和脾脏指数 |
| 3.3 仔鼠TECs超微结构 |
| 3.4 仔鼠胸腺内TMSβ4和Tα1 含量 |
| 3.5 仔鼠胸腺和脾脏内T细胞的分型 |
| 3.6 仔鼠胸腺内Wnt4,β-catenin,Foxn1 蛋白的表达 |
| 3.7 仔鼠胸腺内Wnt4,β-catenin,Foxn1 基因的表达 |
| 4.讨论 |
| 4.1 孕鼠肾虚 |
| 4.2 仔鼠先天肾虚 |
| 4.3 先天肾虚对胸腺的影响 |
| 4.4 先天肾虚对Wnt/β-catenin信号通路的影响 |
| 4.5 先天肾虚对T细胞的影响 |
| 4.6 左归丸对先天肾虚的作用 |
| 第三部分 细胞实验研究 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 实验动物及细胞来源 |
| 1.2 药物 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 原代TECs细胞培养 |
| 2.2 含药血清制备 |
| 2.3 分组及干预方法 |
| 2.4 检测指标 |
| 2.5 统计方法 |
| 3.结果 |
| 3.1 免疫荧光鉴定TECs |
| 3.2 左归丸含药血清CCK-8 检测 |
| 3.3 抑制剂ICG-001 CCK-8 检测 |
| 3.4 不同抑制剂浓度对Wnt4 表达量的影响 |
| 3.5 TECs内 TMSβ4和Tα1 的含量 |
| 3.6 TECs内 Wnt4,β-catenin,Foxn1 基因的表达量 |
| 3.7 TECs内 Wnt4,β-catenin,Foxn1 蛋白的表达量 |
| 4.讨论 |
| 4.1 含药血清和抑制剂浓度 |
| 4.2 先天肾虚对TECs的影响 |
| 4.3 TECs内 Wnt/β-catenin信号通路的表达 |
| 讨论 |
| 1.先天肾虚模型 |
| 2.先天肾虚与免疫紊乱 |
| 2.1 先天肾虚影响免疫器官 |
| 2.2 先天肾虚影响免疫细胞 |
| 3.先天肾虚影响Wnt/β-catenin信号通路的表达 |
| 4.先天肾虚与补肾填精法的应用 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1.实验图片 |
| 2.综述 先天肾虚胎鼠胸腺免疫功能的研究进展 |
| 参考文献 |
| 3.发表论文 |
| 致谢 |
（2）运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 1 现代医学对冠心病的认识 |
| 1.1 流行病学 |
| 1.2 病理生理机制 |
| 2 心肌缺血/再灌注损伤与自噬 |
| 2.1 自噬的发生过程 |
| 2.2 多种信号通路调控自噬 |
| 2.3 心肌缺血再灌注损伤与Beclin1、Atg-5 蛋白 |
| 3 运动预处理 |
| 3.1 运动预处理相关研究 |
| 3.2 运动预处理的心脏保护相关机制 |
| 实验研究 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 指标检测及方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 实验大鼠的情况 |
| 2.2 各组大鼠心功能的差异 |
| 2.3 各组大鼠心肌梗死面积(IS%) |
| 2.4 各组大鼠心肌细胞超微结构与自噬体的形成 |
| 2.5 各组大鼠心肌Beclin1、Atg-5 蛋白表达 |
| 讨论 |
| 1 离体心脏Langendorff缺血/再灌注模型的制备及影响模型制备的因素 |
| 1.1 老龄大鼠离体心脏MIRI模型的制备 |
| 1.2 影响模型制备的主要因素 |
| 2 运动预处理方案的选择 |
| 3 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心功能的影响 |
| 4 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌梗死面积的影响 |
| 5 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌细胞超微结构与自噬体的形成的影响 |
| 6 运动预处理对老龄大鼠离体MIRI心肌Beclin1、Atg-5 蛋白表达的影响 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
| 个人简历 |
（3）不同温度水疗干预对大鼠慢性应激损伤的防护效应及机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验方案 |
| 2.2 慢性应激动物模型制备 |
| 2.3 水疗干预方案 |
| 2.4 无创血压测量 |
| 2.5 血糖测定和糖耐量实验 |
| 2.6 血清激素和组织炎症因子检测 |
| 2.7 肠系膜微动脉分离和血管功能检测 |
| 2.8 蛋白定量-BCA法 |
| 2.9 蛋白免疫印迹 |
| 2.10 离体细胞实验方案 |
| 2.11 旷场实验、高架十字迷宫实验和转棒实验 |
| 2.12 透射电镜及线粒体数目测算 |
| 2.13 统计分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 噪声复合足底电击刺激28 天可更好的构建大鼠慢性应激模型 |
| 3.2 不同温度水疗对大鼠慢性应激的效应不同,其中热水浴对抗应激的综合效应最好 |
| 3.3 长期冷水浴、冷热交替水浴影响慢性应激大鼠糖耐量变化 |
| 3.4 热水浴对慢性应激大鼠探索行为能力与焦虑的影响 |
| 3.5 冷水浴、冷热交替水浴改善慢性应激大鼠运动协调能力 |
| 3.6 热水浴改善慢性应激大鼠肠系膜微血管内皮功能 |
| 3.7 热水浴影响应激大鼠血管抗氧化蛋白、抗衰老蛋白和热休克蛋白表达 |
| 3.8 热水浴增加血管NO生物利用度 |
| 3.9 温热效应增加内皮细胞DDAH1 表达和NO分泌水平 |
| 3.10 热水浴减轻慢性应激大鼠心肌损伤 |
| 3.11 热水浴对慢性应激大鼠心肌自噬相关蛋白表达的影响 |
| 3.12 热水浴对慢性应激大鼠心肌线粒体结构的影响 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（4）针刺对应激性高血压前期大鼠心脏基因表达谱的影响（论文提纲范文）
| 摘要 ABSTRACT 符号说明 第一部分 文献综述 |
| 综述一: 高血压前期研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二: 应激性高血压研究概况 |
| 参考文献 |
| 综述三: 基因芯片技术在心血管疾病研究中的应用 |
| 参考文献 |
| 综述四: 基因芯片技术在针灸研究中的应用进展概述 |
| 参考文献 |
| 综述五: 关键基因与心血管疾病关系研究进展 |
| 参考文献 前言 第二部分 实验研究 |
| 实验一: 针刺对应激性高血压前期大鼠血压及心肌组织形态学的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验二: 针刺对应激性高血压前期大鼠心肌基因表达谱的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验三: 针刺对应激性高血压前期大鼠心肌组织中基因HbA1c、Igfbp-3、Fik3ca、Car4表达的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 综合讨论: 针刺对不同发病阶段的应激性高血压前期大鼠心脏基因表达谱的影响差异分析 |
| 1.针刺调控不同发病阶段SIPH大扇心肌差异表达基因的数量不同 |
| 2.针刺调控不同发病阶段SIPH大鼠心肌差异表达基因的富集功能不同 |
| 3.针刺调控不同发病阶段SIPH大鼠心肌差异表法基因澈活的KEGG通路不同 |
| 4.针规调控不同发病阶段SIPH大鼠心肌的关键基因不同 |
| 小结 |
| 参考文献 结语 研究创新点 存在问题与不足 致谢 在学期间主要研究成果 |
（5）孕期纳米氧化铝经鼻暴露对子代海马CA1区突触结构及学习记忆行为的影响（论文提纲范文）
| 主要缩略词中英文对照 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 孕期纳米氧化铝经鼻暴露引起子代海马区铝蓄积 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 孕期纳米氧化铝经鼻暴露引起子代海马CAI区突触结构改变 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 孕期纳米氧化铝经鼻暴露对子代学习记忆行为的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 主要创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（6）电击死心脏窦房结组织纤维连接蛋白的表达（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 仪器与试剂 |
| 1.2 样本来源 |
| 1.2.1 尸体样本 |
| 1.2.2 实验动物分组与动物模型建立 |
| 1.3 HE染色 |
| 1.3.1 载玻片和盖玻片的处理 |
| 1.3.2石蜡包埋-HE染色 |
| 1.4 免疫组化 |
| 2 结果 |
| 2.1 人窦房结组织HE染色结果 |
| 2.2 人窦房结组织Fn免疫组化结果 |
| 2.3 兔窦房结组织HE染色结果 |
| 2.4 兔窦房结组织Fn免疫组化结果 |
| 3 讨论 |
（7）电击死大鼠心脏超微结构及HSP70、HIF-1α表达变化（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1.1实验动物 |
| 1.2试剂与仪器 |
| 1.3方法 |
| 1.3.1实验动物分组及模型的制备、取材 |
| 1.3.2透射电镜观察 |
| 1.3.3免疫组织化学染色 |
| 1.3.4结果判定 |
| 1.4统计学处理 |
| 2结果 |
| 2.1透射电子显微镜观察 |
| 2.2HSP70的免疫组织化学染色 |
| 2.3HIF-1α的免疫组织化学染色 |
| 3讨论 |
（8）电击死大鼠心脏超微结构及HSP70、HIF-1α、表达变化的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 电击死的法医病理学研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（9）水、油污中无电流斑电击死大鼠皮肤和心肌的病变（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及其分组 |
| 1.2 动物模型建立 |
| 1.3 病理学观察 |
| 2 结 果 |
| 2.1 肉眼及光镜观察 |
| 2.1.1 皮肤 |
| 2.1.2 心肌 |
| 2.2 电镜观察 |
| 2.2.1 皮肤 |
| 2.2.2 心肌 |
| 3 讨 论 |
（10）无电流斑电击伤的研究进展（论文提纲范文）
| 1 无电流斑电击伤的成因及机制 |
| 2 无电流斑电击伤的损伤特征及研究进展 |
| 2.1 皮肤 |
| 2.2 心脏 |
| 2.3 血管 |
| 2.4 血液 |
| 2.5 其他 |
| 3 小结与展望 |
四、大鼠电击死心脑肺及皮肤超微结构的改变（论文参考文献）
- [1]基于Wnt/β-catenin通路探讨左归丸对先天肾虚仔鼠免疫功能的影响及其机制研究[D]. 任梅荣. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [2]运动预处理对老龄大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心肌梗死面积及Beclin 1、Atg-5蛋白表达的影响[D]. 王雪. 黑龙江中医药大学, 2019(01)
- [3]不同温度水疗干预对大鼠慢性应激损伤的防护效应及机制[D]. 田沛. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [4]针刺对应激性高血压前期大鼠心脏基因表达谱的影响[D]. 贾文睿. 北京中医药大学, 2017(08)
- [5]孕期纳米氧化铝经鼻暴露对子代海马CA1区突触结构及学习记忆行为的影响[D]. 管磊剑. 南京医科大学, 2017(05)
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