一、确炎舒松对增生性瘢痕PCNA、bcl-2表达的影响（论文文献综述）
邵帅[1]（2020）在《三法三穴对SNI大鼠施万细胞增殖和神经瘢痕形成的影响》文中研究表明[目的]为评价三法三穴对SNI大鼠坐骨神经SC增殖和神经瘢痕形成的影响而开展本实验,本实验从行为学、组织形态学与分子生物学三个层面,评价三法三穴干预能否通过调节TGF-β1/Smad2通路蛋白表达,影响SNI模型大鼠坐骨神经损伤点SC增殖及神经瘢痕的形成,促进SNI大鼠后肢运动功能的恢复。以期进一步揭示推拿促进坐骨神经损伤后修复的机理,完善推拿治疗周围神经损伤的理论基础,为推拿治疗周围神经损伤疾病提供科学证据。[方法]1 动物分组、造模和干预方法选取健康雄性SD大鼠78只,随机分为假手术组、模型组、三法三穴组,每组各26只。采用坐骨神经夹持损伤法制备SNI模型大鼠。三法三穴组从造模后第8天（d）开始,对大鼠殷门穴、承山穴、阳陵泉穴进行点法、拨法、揉法干预,每穴每手法1min。干预10d休息1d,共干预20次。2行为学检测方法每组每个时间点随机选取6只大鼠进行行为学观察。在造模后7d、14d、21d、28d,检测各组大鼠斜板试验角度。在造模后7d、28d,检测各组大鼠SFI。3组织形态学检测方法每组随机选取4只大鼠,在造模后28d时运用HE染色法,观察SNI大鼠坐骨神经损伤点SC细胞数目和神经瘢痕厚度及染色深度的变化。4蛋白定量检测方法每组每个时间点随机选取4只大鼠,运用免疫荧光标记法,观察造模后7d、28d时坐骨神经损伤点中S100、TGF-β1、Smad2及造模后28d时坐骨神经损伤点Ⅰ/Ⅲ型胶原和FN的表达变化。每组每个时间点随机选取6只大鼠,运用Western-blotting技术,检测坐骨神经损伤点在造模后7d、14d、28d三个时间点TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达变化。5统计方法使用Image J 1.48u软件分析免疫荧光和Western-blotting图像。使用SAS 8.0软件对数据进行统计分析。[结果]1三法三穴干预对SNI大鼠运动功能恢复的影响SFI结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、28d,大鼠SFI显着降低（P<0.01）。三法三穴组与模型组相比,大鼠SFI显着升高（P<0.01）,且接近假手术组水平。斜板实验结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、14d、21d、28d,大鼠斜板倾斜角度显着降低（均有P<0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后14d、21d,大鼠斜板倾斜角度有升高趋势（P>0.05）,造模后28d,斜板倾斜角度显着升高（P<0.05）。以上结果提示:三法三穴干预能够促进SNI大鼠后肢精细动作及后肢肌力的恢复,说明三法三穴干预能够促进SNI大鼠后肢运动功能的恢复。2三法三穴干预对SNI大鼠坐骨神经SC增殖的影响HE染色结果:假手术组神经纤维轴索及髓鞘完整、排列紧密,SC核嵌于鞘膜外。模型组神经纤维稀疏、散乱,鞘膜外SC核数量较假手术组减少。三法三穴组坐骨神经可见再生的神经纤维,并有很厚的髓鞘包绕、轴索清晰,鞘膜外SC核数量较模型组明显增多。S100免疫荧光染色结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、28d,SNI大鼠坐骨神经损伤点SC标记物S100的平均光密度值明显降低（均有P<0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后28d,坐骨神经S100平均光密度值明显升高（P<0.05）。以上结果提示:三法三穴干预能够增加神经损伤后期SC的数目。3三法三穴干预对SNI大鼠坐骨神经瘢痕形成的影响HE染色结果:造模后28d,假手术组坐骨神经损伤点神经外膜结缔组织深染,模型组神经外膜结缔组织深染,三法三穴组神经外膜结缔组织染色较模型组明显变浅。Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN免疫荧光染色结果:造模后28d,与假手术组相比,模型组SNI大鼠坐骨神经外膜Ⅰ/Ⅲ型胶原、FN表达均明显增多（均有P<0.05）。与模型组相比,三法三穴组SNI大鼠坐骨神经外膜Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN表达均明显减少（均有P<0.05）。以上结果提示:三法三穴干预能够抑制SNI大鼠坐骨神经Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN分泌,从而抑制神经外膜瘢痕形成。4三法三穴干预对TGF-β1/Smad2通路蛋白表达的影响免疫荧光染色结果:TGF-β1表达部位与S100高度重合,且在模型组、三法三穴组坐骨神经外膜也出现高表达,Smad2表达在DAPI表达位置附近。模型组与假手术组相比,造模后7d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1的表达量明显升高（P<0.05）,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1的表达量未见明显差异（P>0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1的表达量未见明显差异（P>0.05）。模型组与假手术组相比,造模后7d、28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经Smad2的表达量明显升高（均有P<0.05）,三法三穴组与模型组相比,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经Smad2的表达量无明显差异（P>0.05）。Western-blotting结果:模型组与假手术组相比,造模后7d、14d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量明显升高（均有P<0.05）,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量无明显差异（P>0.05）。三法三穴组与模型组相比,造模后14d,坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量出现下调趋势（P>0.05）,造模后28d,SNI大鼠损伤侧坐骨神经TGF-β1、Smad2、p-Smad2的表达量无明显差异（P>0.05）。以上结果提示:坐骨神经损伤后,TGF-β1主要在SC和损伤神经外膜中表达,Smad2在细胞核周围表达。三法三穴干预在周围神经损伤早期对TGF-β1/Smad2通路蛋白有轻微的下调作用,可能与神经瘢痕形成有关。[结论]三法三穴干预能够增加损伤后期SNI大鼠坐骨神经SC的数目。三法三穴干预能够通过轻微下调TGF-β1/Smad2通路蛋白表达,抑制SNI大鼠坐骨神经瘢痕的形成,以促进SNI大鼠运动功能恢复。
姚晓东[2]（2018）在《MiR-1224-5p通过TGF-β1/Smad3通路影响瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭》文中进行了进一步梳理瘢痕疙瘩是一种良性肿瘤,临床表现为异常的增生,超出创伤的范围,侵犯临近组织,不能自行消退。瘢痕疙瘩常发生于耳部、下颌部、前胸部、肩背部及四肢关节等部位。瘢痕疙瘩的特征是成纤维细胞过度增殖和胶原的过度生成,经常引起瘙痒、疼痛、外观不良及功能障碍。临床上虽然瘢痕疙瘩的治疗方式多样,如手术,激素局部注射和放疗等,但是瘢痕疙瘩的发病机制仍不明确,目前对瘢痕疙瘩发病机制的研究是急需解决的一大难题。MicroRNA（miRNA）是一类单链非编码小分子RNA,影响多种细胞生物过程,如增殖、凋亡、分化及细胞外基质的产生。迄今为止,研究已经发现了miRNA参与多种疾病的发生和发展,如结直肠癌,乳腺癌,肺癌,淋巴瘤和肝脏肿瘤等。越来越多的证据表明在一些炎症及皮肤肿瘤中的miRNA表达异常,包括瘢痕疙瘩。目前,国内外关于miRNA在瘢痕疙瘩发病机制中研究尚处于起步阶段。既往的研究发现miR-1224-5p在肿瘤发生中发挥重要作用,参与了细胞的增殖、凋亡。miRNA被发现在一些肿瘤中存在异常表达,例如直肠癌、胶质瘤、肺癌等,但其在瘢痕疙瘩发病中的具体作用尚不清楚。本研究拟通过在体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞中转染miR-1224-5p模拟物实现miR-1224-5p的过表达,研究miR-1224-5p对纤维化经典通路TGF-β1/Smad3以及对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭的影响,探讨其在瘢痕疙瘩发病机制中可能的作用,并为瘢痕疙瘩的靶向治疗和联合治疗提供新的理论依据。第一部分MiR-1224-5p在瘢痕疙瘩组织及成纤维细胞中的表达目的验证瘢痕疙瘩组织及成纤维细胞中miR-1224-5p的表达水平方法收集瘢痕疙瘩患者及正常皮肤组织,并分别原代培养瘢痕疙瘩及正常成纤维细胞,予免疫荧光进行细胞鉴定。采用实时荧光定量PCR检测miR-1224-5p在11组瘢痕疙瘩、正常皮肤组织及成纤维细胞中表达的差异性。结果（1）对原代培养的成纤维细胞进行波形蛋白免疫荧光染色,证实原代培养的细胞为较高纯度的成纤维细胞,而非类上皮细胞;（2）实时荧光定量PCR检测miR-1224-5p在瘢痕疙瘩组织及细胞中的表达与正常组相比表达明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）。结论（1）miR-1224-5p在瘢痕疙瘩组织中的相对表达量低于正常皮肤组织,说明miR-1224-5p在瘢痕疙瘩及正常皮肤中表达存在明显差异。（2）与正常皮肤成纤维细胞相比,miR-1224-5p在瘢痕疙瘩成纤维细胞中显着低表达,提示miR-1224-5p可能对瘢痕疙瘩成纤维细胞起到抑制生长的作用。第二部分MiR-1224-5p调控瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭的机制研究目的探讨miR-1224-5p对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭等生物学行为的影响及其相关分子机制方法将瘢痕疙瘩成纤维细胞分为五组进行转染,分别为对照组,转染模拟物无意义序列对照组,转染miR-1224-5p模拟物组,转染miR-1224-5p抑制物阴性对照组及转染miR-1224-5p抑制物组。运用实时荧光定量PCR验证转染模拟物及抑制物后各组细胞中miR-1224-5p的表达水平是否符合实验要求。通过CCK-8及Ed U实验检测各组成纤维细胞增殖能力,Transwell实验检测各组成纤维细胞侵袭能力,流式细胞仪检测各组成纤维细胞凋亡情况。运用Western Blot技术检测与细胞增殖及凋亡相关分子caspase-3、Bcl-2及Bax蛋白水平变化,并通过实时荧光定量PCR及Western Blot检测TGF-β1、Smad3的RNA及蛋白水平变化。结果（1）CCK-8实验结果显示瘢痕疙瘩成纤维细胞转染miR-1224-5p模拟物组72h生长速度明显滞后于对照组及模拟物无意义序列对照组,差距有统计学意义（P<0.05）;瘢痕疙瘩成纤维细胞转染miR-1224-5p抑制物组在72 h生长速度明显快于抑制物阴性对照组,差距有统计学意义（P<0.05）;（2）Ed U实验显示瘢痕疙瘩成纤维细胞转染miR-1224-5p模拟物组细胞内细胞核减少,DNA的复制活性明显降低,并且将Ed U阳性细胞所占百分比进行统计:对照组及模拟物无意义序列对照组分别为41.2%、45.1%,而miR-1224-5p模拟物组为21.0%,百分占比明显减低,差距有统计学意义（P<0.05）,抑制物阴性对照及miR-1224-5p抑制物组分别45.9%及86.2%,转染抑制物组明显升高,差距有统计学意义（P<0.05）;（3）运用流式细胞仪检测各组瘢痕疙瘩成纤维细胞的凋亡情况,对照组、转染模拟物无意义序列对照组、转染miR-1224-5p模拟物组、转染miR-1224-5p抑制物阴性对照组及转染miR-1224-5p抑制物组凋亡率分别为9.92±0.42%,10.12±0.24%、15.81±0.31%、10.78±0.46%、5.93±0.37%。miR-1224-5p mimic（模拟物）组较对照组、转染模拟物无意义序列对照组及转染miR-1224-5p抑制物阴性对照组细胞凋亡率较明显升高,而miR-1224-5p inhibitor（抑制物）组较对照组、转染模拟物无意义序列对照组及转染miR-1224-5p抑制物阴性对照组细胞凋亡率明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）;（4）Transwell小室结果显示瘢痕疙瘩成纤维细胞对照组及模拟物无意义序列对照组细胞转移到小室下壁的细胞数目相同,明显多于瘢痕疙瘩成纤维细胞miR-1224-5p模拟物组,差距有统计学意义（p<0.05）。相反的是,转染miR-1224-5p抑制物组细胞数少于抑制物阴性对照组（p<0.05）;（5）Western blot实验结果显示与瘢痕疙瘩成纤维细胞未处理组及无意义序列对照组相比,瘢痕疙瘩成纤维细胞miR-1224-5p模拟物组caspase-3、Bax的蛋白水平明显上调,并且Bcl-2,TGF-β1及Smad3的蛋白水平明显下调;而相反的是,相对于转染抑制物阴性对照组,转染miR-1224-5p抑制物组caspase-3及Bax的蛋白水平明显表达增强,Bcl-2的蛋白水平明显表达减弱;（6）实时荧光定量PCR实验结果提示转染miR-1224-5p模拟物组,与未处理组及无意义序列对照组相比,TGF-β1及Smad3的RNA水平表达下调,差异有统计学意义（p<0.05）;与抑制物阴性对照组相比,转染miR-1224-5p抑制物组TGF-β1及Smad3的RNA水平表达上调,差异有统计学意义（p<0.05）。结论miR-1224-5p的模拟物能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖、侵袭,促进瘢痕疙瘩成纤维细胞的凋亡;miR-1224-5p的抑制物能够促进瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、侵袭,抑制其凋亡。miR-1224-5p调控caspase-3、Bcl-2及Bax的表达,并受TGF-β1/Smad3信号通路调控。预示着miR-1224-5p可作为瘢痕疙瘩靶向治疗的潜在靶点。
刘青武[3]（2018）在《瘢痕疙瘩的临床及中医体质类型分析》文中研究说明研究目的:探索瘢痕疙瘩患者的临床特征及中医体质类型。研究方法:采用临床问卷调查的方式,对110例瘢痕疙瘩患者进行问卷调查,分析瘢痕疙瘩患者的临床特征及中医体质类型。结果:（1）临床特征:110例瘢痕疙瘩患者,性别和年龄方面:男性45例（40.9%）,女性65例（59.1%）,性别无明显差异（P>0.05）;发病年龄6-70岁,10～30岁人数最多（79.1%）,发病年龄小于20岁者,易多部位发病,发病年龄大于20岁者,易单部位发病（P<0.05）;就诊年龄16～80岁,高峰为32岁,20～40岁人数最多（71.9%）;病程方面:病程0.5～55年,其中1～17年的最多,共有93人（84.6%）;单发与多发方面:多发者多于单发者（P<0.05）,女性单发的百分比多于男性,男性多发的百分比多于女性（P<0.05）;瘢痕大小方面:中瘢痕最多（P<0.05）;男性的大瘢痕百分比多于女性（P<0.05）,中瘢痕和大瘢痕的病程较小瘢痕长（P<0.05）;瘢痕严重程度方面:中度瘢痕最多（P<0.05）;重度瘢痕的病程长于轻、中度瘢痕（P<0.05）;家族史方面:有家族史的百分比较多（P<0.05）,早发有家族史者多,迟发无家族史者多（P<0.05）,有家族史者病程较长（P<0.05）。发病因素中,频率排在前几位的是毛囊炎、痤疮、无明显诱因、皮肤手术及皮肤外伤等。加重因素中,频率排在前几位的是无明显诱因、毛囊炎、痤疮、瘢痕手术、摩擦/压迫等。（2）中医体质分析:110例患者单一体质有38例,兼夹体质有72例。72例兼夹体质患者中,兼夹气虚质36例,兼夹阳虚质30例,兼夹阴虚质38例,兼夹痰湿质33例,兼夹湿热质39例,兼夹血瘀质25例,兼夹气郁质22例,兼夹特禀质4例。110例患者单一体质和兼夹体质总计265例,其中湿热质最多,有47例,其次依次为阴虚质39例,气虚质37例,阳虚质36例,痰湿质34例,血瘀质25例,气郁质23例,平和质18例（基本是9例）,特禀质6例;瘢痕疙瘩病例组与一般人群比较,平和质的百分比减少,湿热质、阳虚质、阴虚质、痰湿质、血瘀质、气郁质的百分比增加;性别、早发与迟发、身体质量指数、家族史及严重程度的中医体质分布无明显差异（P>0.05）。（3）皮损辨证与体质:110例瘢痕疙瘩患者中热毒瘀阻型有60例,气滞血瘀型33例,气虚血瘀型17例。热毒瘀阻型瘢痕疙瘩以湿热质最多,其次是阴虚质;气滞血瘀型以湿热质最多,其次是痰湿质;而气虚血瘀型以气虚质、阴虚质最多,其次是痰湿质、阳虚质、血虚质,但各皮损证型间的体质分布无明显差异（P>0.05）。结论:（1）瘢痕疙瘩多分布于10～30岁的年轻人,早发者多见多发,迟发者多见单发;病程的长短与瘢痕的大小及严重程度有关;瘢痕疙瘩还与患者性别、家族史等有关;毛囊炎、痤疮、皮肤手术是最常见的引起瘢痕疙瘩的诱因及加重因素。（2）瘢痕疙瘩患者中大多数表现为兼夹体质,少数为单一体质。湿热质占据比例最大,其次依次为阴虚质、气虚质、阳虚质、痰湿质、血瘀质、气郁质、平和质、特禀质;相对于一般人群,瘢痕疙瘩患者平和质的百分比减少,湿热质、阳虚质、阴虚质、痰湿质、血瘀质、气郁质的百分比增加。（3）瘢痕疙瘩患者的中医体质分布在性别、早发与迟发、身体质量指数、家族史及瘢痕严重程度方面无明显差异。（4）热毒瘀阻型、气滞血瘀型瘢痕疙瘩以湿热质为主,气虚血瘀型以气虚质为主,但各证型间的体质分布无明显差异。
刘青武,王思丹,陈静,杨知山,寇然,陈颖,杨顶权[4]（2017）在《瘢痕疙瘩的中医药治疗》文中提出瘢痕疙瘩是皮肤科常见的良性皮肤肿瘤,目前发病机制尚不清楚,中医药治疗瘢痕疙瘩具有悠久的历史,本文通过对近年有关中医药治疗瘢痕疙瘩的方法及作用机制分类综述,认为中医药治疗瘢痕疙瘩简便易行,安全有效,采用中西医结合的方法不仅可以提高疗效,还能降低复发率。
周仁鹏[5]（2016）在《miR-21在瘢痕疙瘩中促进胶原合成的作用和机制》文中进行了进一步梳理目的:瘢痕疙瘩（Keloid）是临床上继发于皮肤真皮损伤后,以瘢痕疙瘩组织中成纤维细胞异常增殖、细胞外基质（尤其是胶原）大量沉积为特征的疾病。目前研究发现,miR-21在纤维化的心肌、肾、肺等组织中表达显着增加,促进的纤维化的发生。先前microRNA芯片研究结果表明,miR-21在瘢痕疙瘩组织中高表达。本课题主要研究miR-21异常表达是否影响胶原的合成,进而导致瘢痕疙瘩形成,以及miR-21是否是治疗瘢痕疙瘩的潜在靶点。方法1.应用Real-time PCR比较正常皮肤和瘢痕疙瘩组织及两者分离的成纤维细胞中miR-21、Smad7、Col1a1和Col3a1的表达。2.分别转染miR-21的模拟物和抑制物,检测Smad7,Col1a1以及Col3a1表达;应用结晶紫染色检测细胞增殖能力。3.进行外源性TGF-β1诱导,检测TGF-β1对成纤维细胞miR-21表达的影响。检测TGF-β1、miR-21模拟物或抑制剂处理下Col1a1、Col3a1以及Smad7表达。4.在成纤维细胞中转染Smad 7 siRNA,检测纤维化指标的表达。5.建立瘢痕疙瘩组织块移植裸鼠模型,探索miR-21抑制剂对体内瘢痕疙瘩生长的影响。结果:1.瘢痕疙瘩组织和分离的成纤维细胞中miR-21,Col1A1,Col3A1表达水平高;Smad7的表达低。2.正常成纤维细胞转染miR-21模拟物后,Smad7表达降低,Col1A1,Col3A1表达显着增加。瘢痕疙瘩成纤维细胞转染miR-21抑制剂后,作用反之。正常成纤维细胞转染miR-21mimic后,成纤维细胞增殖能力显着增加,瘢痕疙瘩成纤维细胞转染miR-21抑制剂后,作用反之。3.TGF-β1诱导miR-21、Col1A1,Col 3A1表达增加,Smad7表达降低;转染miR-21模拟物作用相同,而转染miR-21抑制剂作用相反。4.相对于对照组,正常成纤维细胞中转染Smad 7 siRNA后,Col1a1和Col3a1蛋白和核酸水平表达显着增加。5.应用miR-21抑制剂降低裸鼠模型中瘢痕疙瘩组织块的体积和质量。结论:1、瘢痕疙瘩miR-21高表达降低Smad7的表达,增加Col1A1,Col 3A1的表达;miR-21能促进成纤维细胞的增殖能力。2、TGF-β1促进miR-21的表达,且TGF-β1与miR-21都能促进Col1A1,Col 3A1的表达,降低Smad7的表达。3、miR-21inhibitor处理裸鼠皮下移植瘢痕疙瘩能显着降低移植的瘢痕疙瘩体积和质量。
宋飞,向盈盈,张小文[6]（2014）在《紫杉醇抗良性胆管瘢痕纤维化的最佳抵抗因素研究》文中认为目的探讨紫杉醇（paclitaxel,PTX）抗良性胆管瘢痕纤维化的最佳抵抗因素,为临床防治胆管良性瘢痕纤维化提供有效依据。方法体外培养人胆管上皮细胞（biliary epithelial cell,BEC）,并将配制好的PTX药物浓度梯度按0.001 uM、0.005 uM、0.1 uM、0.5 uM、1 uM加入细胞培养板培养48 h,MTT法检测PTX对BEC半抑制率IC50,从而确定最佳PTX浓度;人胆管上皮细胞培养0 h,24 h,48 h,72 h,MTT法测100 nM、250 nM、500 nM 3种不同含量的紫杉醇-壳聚糖缓释膜（PTX-Chitosan Sustained release membrane,PTX-SRM）与最佳浓度PTX对BEC的抑制率,得到最佳浓度的PTX-SRM;细胞培养48 h,72 h后采用Western Blot和Realtime PCR方法检测PTX及PTX-SRM对BECα-SMA、E-cadherin、Vimentin蛋白及基因表达变化。结果单独PTX对良性胆管瘢痕发挥抵抗作用的最佳浓度为250 nM;PTX和PTX-SRM均能有效抑制BEC的增殖、转化;中、低浓度的PTX-SRM对良性胆管瘢痕纤维化的治疗效果最佳,最佳载药量分别为100 nM、250 nM;PTX-SRM对BEC的抑制持续时间长于单独PTX（P<0.05）。结论PTX-SRM对BEC增殖、转化的抑制作用优于单独PTX给药,为临床对良性胆管瘢痕的预防和治疗提供了科学可行的新方法。
杨国际[7]（2012）在《曲安奈德对人良性胆管瘢痕成纤维细胞作用的实验研究》文中研究说明目的：研究曲安奈德对体外培养的人良性胆管瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡的影响及TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达,探讨曲安奈德在治疗良性胆管瘢痕中的应用可能及作用机理。方法：复苏并传代培养前期建立的人良性胆管瘢痕成纤维细胞,选用第3～5代成纤维细胞随机分为对照组和曲安奈德组,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同浓度（Omg/ml、0.0625mg/ml、0.125mg/ml、0.25mg/ml、0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、4mg/ml、8mg/ml）曲安奈德溶液在不同时间（24h、48h、72h）对胆管瘢痕成纤维细胞增殖和活力的影响；应用流式细胞仪（Annexin V/PI双标记）检测曲安奈德半数抑制浓度（IC50）作用72小时后胆管瘢痕成纤维细胞的凋亡情况；采用细胞免疫荧光及蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测其TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达。采用SPSS13.0软件对实验数据进行分析。结果：①人良性胆管瘢痕成纤维细胞复苏2天即长满培养瓶底,细胞呈长梭形,形态单一,增殖旺盛。②MTT法显示：曲安奈德对人良性胆管瘢痕成纤维细胞的增殖有明显抑制作用,其抑制作用具有明显的药物浓度、时间依赖性；在0.0625mg/ml～8mg/ml范围内,曲安奈德浓度越高,对细胞的生长抑制率越高（P<0.05）；药物作用时间越长,抑制率越高（P<0.05）。其24h、48h、72h的IC50分别为6.71mg/ml、4.33mg/ml、2.72mg/ml,选用72h的IC50作为药物实验浓度。③nnexin V/PI双标记法提示曲安奈德明显促进人良性胆管瘢痕成纤维细胞的凋亡④细胞免疫荧光化学及蛋白免疫印迹（Western Blot）法提示曲安奈德对人良性胆管瘢痕成纤维细胞TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达具有明显的抑制作用。结论：曲安奈德能明显抑制人良性胆管瘢痕成纤维细胞的增殖,并具有明显的药物浓度、时间依赖性；其可促进该细胞的凋亡,同时通过抑制该细胞TGF-β1、α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达而减少人良性胆管瘢痕的形成。
孟德峰[8]（2011）在《环磷酰胺对兔耳早期增生性瘢痕组织的影响》文中认为目的:本研究通过口服药物“环磷酰胺（CTX）”对兔耳早期增生性瘢痕的影响,探讨口服免疫抑制剂对早期瘢痕治疗的方法。方法:利用纯种日本大耳白兔建立增生性瘢痕的动物模型。依据环磷酰胺（CTX）对家兔免疫抑制的剂量,将不同剂量的环磷酰胺片溶于10ml蒸馏水中制成水溶剂溶液,再应用兔子灌胃法服入不同剂量的环磷酰胺水溶液。共分成4组（每组8只）:A组10ml蒸馏水、B组5mg/Kg.d、C组10mg/Kg.d、D组30mg/Kg.d。在建动物模型前及灌胃后两周、4周时采血常规观察白细胞、淋巴细胞变化。继续喂养4周（28天）后在同样的麻醉条件下,切取标本、石蜡包埋、切片,采取HE染色、VG染色法观察HI、NA、AA数值变化,以及通过免疫组织化学法观察两种蛋白Bax、Bcl-2及其Bax/Bcl-2比值的情况。结果:服用环磷酰胺后,兔耳腹侧面增生性瘢痕的形成受到明显抑制。其中白细胞和淋巴细胞的对照组与剂量组以及各剂量组间差异均有显着性意义（P<0.01）,且随药物浓度的增加而减少,与对照组间差异有显着意义。HE染色中HI值对照组（A组）与各剂量组间均有显着性差异（P<0.01）。伴随着药物剂量的增加而HI值变小。VG染色中NA值随药物剂量的逐渐增大而变小,B组、C组、D组均与对照组（A组）存在显着性差异（P<0.01）。但实验组中C组与D组之间无显着性差异（P 0.05）。另外AA值在实验组B组、C组、D组均与对照组（A组）存在显着性差异（P<0.01）;且各组间也均存在显着性差异（P<0.01）;伴随着环磷酰胺药物剂量的增大,AA的数值相应变小。Bax蛋白表达阳性率在B组、C组、D组均与对照组（A组）存在显着性差异（P<0.01）。但实验组中C组与D组之间无显着性差异（P 0.05）;而Bcl-2蛋白表达阳性率在实验组中（B组、C组、D组）均与对照组（A组）间存在显着性差异（P<0.01）,且各组间也均存在显着性差异（P<0.01）,随着环磷酰胺药物剂量的增大,Bcl-2蛋白表达阳性率相应变小;Bax/Bcl-2比值在实验组中（B组、C组、D组）均与对照组（A组）间存在显着性差异（P<0.01）;且各组间也均存在显着性差异（P<0.01）;随着环磷酰胺药物剂量的增大,Bax/Bcl-2蛋白的比值也相应变大。结论:口服环磷酰胺通过“降低机体免疫力和促细胞凋亡”作用,从而对兔耳早期增生性瘢痕有明显的治疗作用。
张奇[9]（2010）在《水蛭素对人增生性瘢痕成纤维细胞作用的实验研究》文中研究说明增生性瘢痕（hypertrophic-scar,HS）是创伤后,尤其是深度烧伤后最常见的一种病理性愈合现象。其本质是成纤维细胞（fibroblast,FB）的异常增殖和细胞外基质的过度沉积。在当今,尽管对增生性瘫痕的发病机制和治疗手段进行了大量的研究,但目前仍没有理想的结果。因此寻求有效防治增生性瘢痕的方法是创伤修复领域的重要课题。经研究表明,水蛭素具有抑制器官纤维化、抗炎等作用。本实验对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞（hypertrophic scar fibroblast ,HSFb）进行了以下实验内容,深入研究了水蛭素对HSFb的抑制作用,探讨水蛭素对HS的作用方式和机制,为临床治疗HS提供理论依据。目的研究水蛭素诱导体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞凋亡的作用及相关机制。方法分离培养HSFb,取4-7代细胞,实验组水蛭素浓度为1u/ mL、0.5 u/ mL、0.25 u/ mL、0.125 u/ mL,对照组选择完全培养基处理,观察药物对细胞的影响。检测指标:1倒置相差显微镜观察细胞形态变化;2 MTT法检测细胞活力及细胞计数;3免疫细胞化学染色检测HSFb中bax和bcl-2的表达;4Western blot法检测bax和bcl-2的蛋白表达。结果1 MTT比色结果显示水蛭素作用于HSFb的增殖呈现出明显的抑制趋势,且和药物浓度呈相关性。2水蛭素处理后细胞凋亡率增加,和对照组相比有统计学差异。3免疫组化实验图形分析软件分析结果表明,和对照组相比,水蛭素干预组bax表达增加,bcl-2表达下降。4Western blot法检测和对照组相比,水蛭素干预组bax表达增加,bcl-2表达下降。结论本实验通过对体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞不同指标的检测,证实水蛭素对人增生性瘢痕成纤维细胞有显着的抑制作用,其抑制作用可能与以下几个方面有关:1水蛭素可改变细胞形态;2水蛭素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖;3水蛭素增加人增生性瘢痕成纤维细胞中bax的表达;4水蛭素抑制人增生性瘢痕成纤维细胞中bcl-2的表达。
汪明清,杜明国[10]（2009）在《重症乳腺增生非手术治疗的临床研究》文中研究说明目的探讨重症乳腺增生的非手术治疗价值。方法对67例104处乳腺增生性包块,应用抗增生药物曲安奈德,5-氟尿嘧啶等乳腺包块内注射,合并乳腺溢液导管内注射,结合雌激素拮抗剂他莫昔芬、托瑞米芬,中成药六神丸等非手术方法。结果一次注射包块消散41处,占39.9%（41/104）;重复注射后包块消散10处,占9.6%（10/104）;包块注射后缩小（往往合并有其它不甚明确包块）,口服雌激素拮抗剂他莫昔芬或托瑞米芬及中成药六神丸。三个月内包块完全消散16处,占15.3%（16/104）。结论抗增生药物曲安奈德、5-氟尿嘧,啶包块内注射及溢液乳腺导管内注射,结合口服雌激素拮抗剂他莫昔芬（或托瑞米芬）及中成药六神丸等综合治疗,能使重症乳腺增生包块消散、缩小、变软,导管溢液消失。
二、确炎舒松对增生性瘢痕PCNA、bcl-2表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、确炎舒松对增生性瘢痕PCNA、bcl-2表达的影响（论文提纲范文）
（1）三法三穴对SNI大鼠施万细胞增殖和神经瘢痕形成的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 推拿治疗周围神经损伤的机理研究进展 |
| 1 推拿能够促进SNI大鼠损伤神经超微结构修复 |
| 2 推拿能够促进SNI大鼠运动功能的恢复 |
| 3 推拿能够促进SNI大鼠感觉功能的恢复 |
| 4 推拿对SNI大鼠干预的最佳刺激参数 |
| 参考文献 |
| 综述二 转化生长因子-β1对周围神经损伤后修复的研究进展 |
| 1 转化生长因子-β1蛋白概述 |
| 2 TGF-β1参与周围损伤后修复 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 实验研究 |
| 实验一 三法三穴对SNI大鼠行为学及坐骨神经瘢痕和SC的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 实验二 三法三穴对SNI大鼠TGF-β1/Smad2通路蛋白的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附件 |
| 附件1 三法三穴干预后坐骨神经HE染色结果 |
| 附件2 坐骨神经S100在不同时间点的表达情况 |
| 附件3 三法三穴干预后坐骨神经Ⅰ/Ⅲ型胶原及FN的表达情况 |
| 附件4 三法三穴干预后坐骨神经TGF-β1的表达情况 |
| 附件5 三法三穴干预后坐骨神经Smad2的表达情况 |
| 附件6 三法三穴干预前后坐骨神经TGF-β1的表达变化 |
| 附件7 三法三穴干预前后坐骨神经Smad2的表达变化 |
| 在学期间主要研究成果 |
（2）MiR-1224-5p通过TGF-β1/Smad3通路影响瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 第一部分 MIR-1224-5P在瘢痕疙瘩组织及成纤维细胞中的表达 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.结论 |
| 第二部分 MIR-1224-5P调控瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭的机制研究 |
| 1.材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 4.结论 |
| 参考文献 |
| 综述一 MICRORNA在纤维化疾病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 皮质类固醇激素注射及其联合治疗在瘢痕疙瘩治疗上的进展 |
| 参考文献 |
| 英文缩写词表 |
| 博士生期间的科研活动 |
| 致谢 |
（3）瘢痕疙瘩的临床及中医体质类型分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 瘢痕疙瘩的现代研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 瘢痕疙瘩的中医药治疗 |
| 参考文献 |
| 第二部分 临床研究:瘢痕疙瘩的临床及中医体质类型分析 |
| 前言 |
| 1. 临床资料 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.3 研究对象来源 |
| 1.4 排除病例标准 |
| 1.5 剔除标准 |
| 2. 研究方法 |
| 2.1 瘢痕疙瘩的严重程度评分 |
| 2.2 瘢痕疙瘩的早发与迟发 |
| 2.3 瘢痕疙瘩的单发与多发 |
| 2.4 瘢痕的大小 |
| 2.5 发病诱因 |
| 2.6 统计学方法 |
| 3. 结果 |
| 3.1 临床特征 |
| 3.2 其他一般情况 |
| 3.3 中医体质分析 |
| 3.4 瘢痕疙瘩皮损辨证分析 |
| 4. 讨论 |
| 4.1 瘫痕疙瘩的临床特征 |
| 4.2 瘫痕疙瘩与中医体质 |
| 4.3 瘫痕疙瘩的皮损辨证 |
| 5. 问题与不足 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）瘢痕疙瘩的中医药治疗（论文提纲范文）
| 1 瘢痕疙瘩的中医病机 |
| 2 中药治疗瘢痕疙瘩的相关机制 |
| 2.1 抑制成纤维细胞增生及胶原合成 |
| 2.2 抑制TGF-β表达 |
| 2.3 抑制信号转导通路 |
| 2.4 促进细胞外基质的降解 |
| 3 中医内治 |
| 4 中医外治 |
| 4.1 古方外用 |
| 4.2 现代制剂 |
| 4.3 内外结合 |
| 4.4 离子导入 |
| 4.5 中药注射液 |
| 4.6 火针治疗 |
| 5 中西医结合治疗 |
| 6 中药复方的研究 |
| 6.1 黑布膏药 |
| 6.2 复方芪参提取物 |
| 7 结语 |
（5）miR-21在瘢痕疙瘩中促进胶原合成的作用和机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 绪论 |
| 第一部分 miR-21在正常皮肤和瘢痕疙瘩中的表达差异及调控纤维化作用 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 主要仪器及试剂 |
| 1.3 实验方法 |
| 2 结果 |
| 3 小结 |
| 4 讨论 |
| 第二部分 TGFβ1/miR21/Smad7通路在瘢痕疙瘩纤维化形成中的作用 |
| 前言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 实验材料(实验动物) |
| 1.2 主要仪器及试剂 |
| 1.3 实验方法 |
| 2 结果 |
| 3 小结 |
| 4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
（7）曲安奈德对人良性胆管瘢痕成纤维细胞作用的实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩略语一览表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（8）环磷酰胺对兔耳早期增生性瘢痕组织的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英汉缩略词对照表 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料与仪器 |
| 1.2 主要实验试剂 |
| 1.3 主要实验仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 免疫因素对瘢痕的影响 |
| 3.2 细胞凋亡对瘢痕的影响 |
| 4 结论 |
| 5 问题 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（9）水蛭素对人增生性瘢痕成纤维细胞作用的实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 水蛭素对平面培养的人增生性瘢痕成纤维细胞的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 4 统计学分析 |
| 5 实验结果 |
| 第二部分 水蛭素对瘢痕成纤维细胞中Bax、bcl-2 表达的影响 |
| （一） 免疫组化检测水蛭素对 Bax 和bcl-2 基因表达的影响 |
| 1 实验材料与仪器 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| （二） Western blot 法检测水蛭素对Bax 和bcl-2 基因表达的影响 |
| 1 实验材料和仪器 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果分析 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 1 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 |
| 致谢 |
（10）重症乳腺增生非手术治疗的临床研究（论文提纲范文）
| 1 临床资料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4 结论 |
四、确炎舒松对增生性瘢痕PCNA、bcl-2表达的影响（论文参考文献）
- [1]三法三穴对SNI大鼠施万细胞增殖和神经瘢痕形成的影响[D]. 邵帅. 北京中医药大学, 2020(04)
- [2]MiR-1224-5p通过TGF-β1/Smad3通路影响瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及侵袭[D]. 姚晓东. 苏州大学, 2018(01)
- [3]瘢痕疙瘩的临床及中医体质类型分析[D]. 刘青武. 北京中医药大学, 2018(08)
- [4]瘢痕疙瘩的中医药治疗[J]. 刘青武,王思丹,陈静,杨知山,寇然,陈颖,杨顶权. 皮肤科学通报, 2017(06)
- [5]miR-21在瘢痕疙瘩中促进胶原合成的作用和机制[D]. 周仁鹏. 上海交通大学, 2016(03)
- [6]紫杉醇抗良性胆管瘢痕纤维化的最佳抵抗因素研究[J]. 宋飞,向盈盈,张小文. 中国生化药物杂志, 2014(03)
- [7]曲安奈德对人良性胆管瘢痕成纤维细胞作用的实验研究[D]. 杨国际. 昆明医科大学, 2012(11)
- [8]环磷酰胺对兔耳早期增生性瘢痕组织的影响[D]. 孟德峰. 桂林医学院, 2011(05)
- [9]水蛭素对人增生性瘢痕成纤维细胞作用的实验研究[D]. 张奇. 广西医科大学, 2010(08)
- [10]重症乳腺增生非手术治疗的临床研究[J]. 汪明清,杜明国. 西部医学, 2009(12)