一、淫羊藿治疗股骨头坏死（论文文献综述）
齐琳,任忠陆[1]（2022）在《中药治疗股骨头坏死的作用机制研究进展》文中进行了进一步梳理股骨头坏死是骨科难治疾病之一,其具有较高的致残率,严重影响患者身体健康和生命质量,给患者带来极大的心理压力。目前,中药治疗股骨头坏死颇有特色,逐渐被人们认可,故从近年来中药单体、中药经方、自拟方剂3个方面对治疗股骨头坏死的作用机制进行综述,期望为未来中药更加合理有效治疗股骨头坏死提供一定的理论支持。
李嘉骏,夏天,刘佳敏,陈锋,陈豪特,卓映宏,吴炜锋[2]（2022）在《淫羊藿苷调控成骨信号相关通路治疗激素性股骨头缺血性坏死的分子机制》文中研究表明背景:研究证实淫羊藿苷具有促进成骨和防治激素性股骨头缺血坏死的作用,若能明确其在骨头坏死中的药物-靶点-通路调控机制,则对激素性股骨头缺血性坏死的有效治疗有重要意义。目的:从淫羊藿苷对Wnt、PI3K/AKT、mTOR和雌激素信号通路调控成骨的作用机制来综述其防治激素性股骨头缺血性坏死的研究进展,旨在为淫羊藿苷对股骨头坏死的有效防治提供思路和借鉴。方法:检索PubMed数据库、Web of science数据库、中国知网、维普及万方数据库中2014至2020年相关文献,检索词分别为"淫羊藿苷,糖皮质激素,激素性股骨头坏死,股骨头坏死,信号通路,发病机制,icariin,glucocorticoid,ONFH,Osteonecrosis of the Femoral Head,Signaling pathways,pathogenesis,Wnt,Wnt/β-catenin,PI3K/AKT,m TOR,ERs",排除较陈旧及重复的文献,通过整理共纳入56篇文献进行分析探讨。结果与结论:（1）淫羊藿苷具有促进骨代谢和改善血液循环等功效,其在治疗股骨头坏死中的作用机制已成为研究焦点;（2）淫羊藿苷可调控Wnt、PI3K/AKT、mTOR及雌激素受体等相关信号通路,干预激素性股骨头缺血性坏死起到成骨作用;（3）淫羊藿苷对激素性股骨头缺血性坏死的相关信号通路具有调节作用,但目前有关实验研究还不能具体明确其作用机制,相关临床研究较少,探讨淫羊藿苷的作用机制以及其在临床上的应用将会是研究的热点和方向。
杜晨阳,李慧英,汪利合,孟东方,马博[3]（2021）在《“三补一活”方干预兔激素性股骨头坏死作用机制研究》文中研究说明目的进一步阐释激素性股骨头坏死（Steroid-induced avascular necrosis of femoral head, SANFH）的分子机制,系统探究"三补一活"方治疗SANFH的物质基础和生物效应靶点,为临床防治SANFH提供新的治疗方法。方法采用改进的马血清加甲强龙的方法诱导制备兔SANFH动物模型,将实验随机分成3组:正常组、模型组、实验组,每组6只,给予实验组"三补一活"中药方剂灌胃,给予正常组和模型组实验动物以生理盐水灌胃,1次/天,连续灌胃6周后,针对三组实验动物分别在光镜下进行组织形态学观察即空骨陷窝率计数,采用western blot法检测细胞自噬相关蛋白Beclin-1、Atg5及凋亡相关蛋白caspase-3的表达水平,及PCR定量检测上述分子mRNA含量。结果光镜下空骨陷窝率计数,实验组和模型组较正常组均明显上升（P<0.05）,但实验组低于模型组（P<0.05）。经灌胃6周后western blot检测三组兔股骨头组织中自噬相关蛋白Beclin-1和Atg5表达水平情况,实验组与正常组水平相当且明显高于模型组（P<0.05）,凋亡相关蛋白caspase-3表达水平情况,实验组与正常组水平相当且明显低于模型组（P<0.05）。经灌胃6周后PCR定量检测三组兔股骨头组织中Beclin-1和Atg5mRNA表达量,实验组与正常组水平相当且明显高于模型组（P<0.05）,caspase-3mRNA表达量,实验组与正常组水平相当且明显低于模型组（P<0.05）。结论 "三补一活"方能显着提高兔激素性股骨头坏死模型中自噬相关蛋白Beclin-1和Atg5的表达,降低凋亡相关蛋白caspase-3表达,降低空骨陷窝率,对维持细胞稳态,延缓骨坏死进程起到了积极作用,为临床采用"三补一活"方治疗激素性股骨头坏死提供一定依据。
陈浩,杜斌,刘锌,侯伟,高飞飞[4]（2021）在《淫羊藿治疗糖皮质激素相关型股骨头坏死研究进展》文中指出糖皮质激素相关型股骨头坏死（glucoticorticoidassociated osteonecrosis of the femoral head,GAONFH）属于非创伤性股骨头缺血性坏死,是指长期或大剂量应用糖皮质激素,导致股骨头活性成分死亡,进而引起股骨头负重区骨小梁结构改变、股骨头不可逆塌陷,最终导致髋关节功能障碍的一类疾病[1]。该病以中青年多见,预后差,致残率高[2, 3],且由于该病患者大多有基础疾病,
宋世雷[5]（2021）在《基于miR-17-5p/MAPK/mTOR信号探讨淫羊藿苷促进成骨细胞自噬机制研究》文中研究表明目的:糖皮质激素的长期过度使用会造成激素性股骨头坏死,而发生激素性股骨头坏死的机制多样复杂,其中成骨细胞的生成不足或凋亡过快是影响因素之一。因此造成治疗激素性股骨头坏死的困难加大。目前有研究发现通过细胞自噬有利于细胞的新生,而MAPK/mTOR信号通路已被证实具有参与调控细胞自噬的功能。而近年来发现淫羊藿在治疗激素性股骨头坏死有显着疗效,并根据网络药理学的研究发现淫羊藿可能参与调控制miR-17-5p/MAPK/mTOR信号轴促进激素性股骨头坏死的自噬。因此本文通过探讨淫羊藿苷诱导miR-17-5p/MAPK/mTOR信号通路促进成骨细胞自噬的机制,为淫羊藿治疗激素性股骨头坏死提供基础研究支持。方法:对大鼠成骨细胞系ROS1728分组培养,设空白组,阴性对照组,淫羊藿苷组,miR-17-5p抑制表达组,淫羊藿苷mTOR通路抑制剂组分别给予相应处理48h后,采用qRT-PCR检测细胞miR-17-5p、MAPK1和MAPK3 mRNA的表达水平,Western Blot检测细胞ULK1、ATG13、BCl2、LC3B、P62蛋白的表达水平,并通过透射电镜观察细胞内自噬体变化情况,并进行统计学分析。结果:与空白对照组对比淫羊藿苷组的miR-17-5p、ULK1、ATG13、LC3B、P62表达水平升高,而MAPK1和MAPK3 mRNA的表达水平都降低（P<0.01）;与阴性对照组相比淫羊藿苷组的miR-17-5p、ULK1、ATG13、LC3B、P62表达水平升高,MAPK1、MAPK3 mRNA与BCl2蛋白表达水平下降（P<0.01）;与淫羊藿苷组相比,miR-17-5p抑制表达组中miR-17-5p、ULK1、ATG13、P62和LC3B蛋白表达水平下降,MAPK1、MAPK3 mRNA与BCl2蛋白表达水平则上升（P<0.01）,而淫羊藿苷mTOR通路抑制剂组的ULK1、ATG13、P62和LC3B蛋白表达水平较淫羊藿苷组高（P<0.01）,电镜结果显示激素可诱导成骨细胞损伤引起细胞自噬,而淫羊藿苷可促进细胞自噬,miR-17-5p抑制表达后细胞自噬减弱,淫羊藿苷mTOR通路抑制剂组则促进细胞自噬的发生。结论:本研究说明淫羊藿苷可能通过提升成骨细胞内miR-17-5p的表达水平,通过抑制MAPKmRNA的表达,降低mTOR的活性,促进自噬小体的生成,促进成骨细胞的自噬。
刘洪智[6]（2021）在《淫羊藿苷经miR-23b干预激素性股骨头坏死机制的体内研究》文中进行了进一步梳理研究背景激素性股骨头坏死（Steroid-induced osteonecrosis of the femoral head,SONFH）的预防和治疗具有重要意义。糖皮质激素能够引起骨微血管内皮细胞（Bone microvascular endothelial cells,BMECs）的损害,是SONFH发病的关键环节。淫羊藿苷（Icariin,ICA）可干预微小RNA的表达,调节血管内皮细胞功能对SONFH有保护作用。ICA可以干预经激素处理的BMECs的细胞功能。miR-23b是调节血管功能及内皮细胞功能的重要物质,能够调节细胞血管生成和凋亡相关的调节蛋白。目的1.利用大鼠SONFH动物模型,评估ICA经miR-23b干预保护激素性股骨头坏死的疗效。2.探讨ICA和miR-23b在SONFH损伤中的分子作用机制,发现干预SONFH的药物作用靶点。方法1.采用8周龄、健康SD大鼠70只随机分为A)SONFH+miR-23b过表达载体病毒感染组（SONFH+miR-23b）,B)SONFH+miR-23b 干扰载体病毒组（SONFH+miR-23bsponge）,C)SONFH+淫羊藿苷治疗组（SONFH+ICA）,D)SONFH+淫羊藿苷+miR-23b过表达载体病毒感染组（SONFH+ICA+miR-23b）,E)SONFH+淫羊藿苷+miR-23b干扰载体病毒组（SONFH+ICA+miR-23bsponge）,F)空载体病毒组（miR-23bNC）,G)对照组（Control）共7组,每组10只。6周后麻醉处死所有大鼠,取股骨头组织及外周血,运用Micro-CT,组织病理学,免疫组织化学,股骨头组织RT-qPCR,流式检测实验来评估研究淫羊藿苷的对SONFH的保护治疗作用。2.采用8周龄、健康SD大鼠30只随机分为空白对照组,SONFH组和SONFH+淫羊藿苷治疗组。6周后麻醉处死所有大鼠取出股骨头。分别分离和培养BMECs。行细胞免疫荧光法鉴定,细胞活性检测,应用质粒Ad-miR-23b,Ad-miR-23b sponge分别转染SONFH组和SONFH+淫羊藿苷治疗组BMECs,用Ad-miR-23b NC转染空白对照组,同时分别留1空白对照组和SONFH+淫羊藿苷治疗组BMECs用PBS刺激代替,共计7组。Western blot检测以上7组BMECs中SEEMA6A,VEGF,PI3K,Bax,Bcl-2和Sprouty2,RAF,MEK,ERK目标蛋白的表达。双萤光素酶报告基因检测验证miR-23b的作用靶点。结果1.70只SD大鼠实验期间均存活。Micro-CT扫描,结果显示SONFH+miR-23b干扰载体病毒组软骨下骨区域骨密度较低,厚度变薄,骨微结构破坏严重,SONFH+淫羊藿苷+miR-23b过表达载体病毒感染组软骨下骨结构基本完整,厚度稍薄,骨微结构可见少许破坏,骨密度略降低。SONFH+淫羊藿苷治疗组等其余各组也可见中等量的骨密度减低,骨微结构破坏。HE染色结果显示与空白对照组或空载体病毒组相比,SONFH+miR-23b干扰载体病毒组,SONFH+淫羊藿苷+miR-23b过表达载体病毒感染组空腔骨陷窝的比例具有明显统计学差异。免疫组化结果显示空白对照组和空载体病毒组棕染的CD31阳性细胞数量最多,可见最大量完整血管结构;SONFH+miR-23b干扰载体病毒组棕染的CD31阳性细胞数量最少,鲜见完整血管结构存在;SONFH+淫羊藿苷+miR-23b过表达载体病毒组棕染的CD31阳性细胞数量较多,可见到大量完整血管结构。RT-qPCR结果显示ICA和miR-23b上调可抑制SEMA6A和Sprouty2mRNA的表达,上调VEGF mRNA的表达。流式检测实验结果显示SONFH+miR-23b干扰载体病毒组CD4+T/CD8+T值最低,SONFH+淫羊藿苷+miR-23b过表达载体病毒感染组的CD4+T/CD8+T值表达相对较高,其他各组的CD4+T/CD8+T表达值介于两组之间。2.根据分离细胞在光镜下的形态,细胞免疫荧光表达CD31和vWF,表明成功分离BMECs。CCK-8结果显示,3组BMECs在第2,4,6天细胞活力无明显差异。Western blot结果显示ICA和miR-23b可以抑制SEMA6A和Sprouty2的表达,促进VEFG的表达,激活PI3K/Akt信号通路,MAPK/ERK通路,同时可降低Bax蛋白的表达和促进Bcl-2蛋白的表达。我们通过双萤光素酶报告基因检测验证miR-23b的作用靶点可能是SEMA6A。结论我们发现ICA可以影响动物模型股骨头组织的miR-23b的表达,使之表达升高,可以延缓动物模型SONFH的进展。ICA通过调节miR-23b表达,进而提高辅助性T细胞数量及比值,增强实验动物的免疫力。ICA和miR-23b能够调节动物模型股骨头组织细胞血管生成和凋亡相关的调节蛋白有SEMA6A,VEGF,PI3K,Sprouty2,作用机制涉及到PI3K/Akt信号通路,MAPK/ERK通路和细胞凋亡。ICA能够通过上调SONFH大鼠动物模型BMECs的miR-23b表达而抑制SEMA6A,Sprouty2等下游信号分子的表达,激活PI3K/Akt信号通路,MAPK/ERK通路,继而对激素性BMECs损伤的血管生成及细胞凋亡等过程起调节作用。利用双荧光素酶基因报告实验检测发现SEMA6A可能是miR-23b的直接作用靶点。
时利军[7]（2021）在《淫羊藿苷在激素诱导的股骨头坏死中骨修复与炎症反应研究》文中提出第一部分:淫羊藿苷对早期激素性股骨头坏死兔骨组织形态和显微结构的影响目的:长期或大量使用糖皮质激素（glucocorticoid,GC）已经成为非创伤性股骨头坏死（osteonecrosis of the femoral head,ONFH）的首要致病原因。该病发生机制复杂,临床诊疗十分棘手,目前尚缺乏特异性的治疗手段。淫羊藿苷（icariin,ICA）为8-异戊烯基黄酮苷类化合物,是中药淫羊藿的主要活性成分。现代药理学研究证实ICA具有调节骨代谢、增强机体免疫、促进骨生长等多种药理活性。本研究旨在利用GC诱导的早期股骨头坏死兔模型观察ICA对骨组织形态和显微结构的影响,评估ICA对早期激素性ONFH的干预效果。方法:选取50只成年新西兰兔（体质量2.5～3.0 kg）,随机分为对照组（n=10）、激素组（n=20）及淫羊藿苷组（n=20）。激素组和淫羊藿苷组动物采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）和甲泼尼龙（methylprednisolone,MPS）序贯注射法制备激素性ONFH动物模型。淫羊藿苷组在首次注射甲泼尼龙时开始灌喂淫羊藿苷药液,每日1次,连续6周。对照组及激素组灌喂等量生理盐水,连续6周。6周后处死动物,取动物双侧股骨头标本进行研究:①肉眼观察各组股骨头标本外观形态差异;②使用Micro-CT对各组标本进行连续扫描和三维重建,观察骨组织形态变化,并定量分析松质骨显微结构参数,主要包括骨小梁数量（trabecular number,Tb.N）、骨小梁相对体积（bone volume to total volume,BV/TV）、骨小梁厚度（trabecular thickness,Tb.Tn）和骨小梁分离度（trabecular separation,Tb.Sp）;③通过HE染色观察各组股骨头标本组织病理学特征,骨细胞病理改变,并计算空骨陷窝率;④利用同步辐射相位衬度纳米微观成像及重建技术,分析观察各组标本单根骨小梁显微结构变化。结果:实验过程中43只动物（对照组9只;激素组16只;淫羊藿苷组18只）纳入结果分析。①肉眼观察,三组动物标本在股骨头轮廓外形、塌陷与否及软骨面色泽方面均有明显差异。②骨组织形态Micro-CT扫描重建观察,激素组股骨头标本塌陷明显,骨小梁稀疏、断裂、排列紊乱;淫羊藿苷组股骨头标本塌陷不明显,骨小梁结构轻度退变,而对照组无变化。松质骨显微结构参数测量分析,激素组和实验组Tb.N、Tb.Tn、BV/TV低于对照组（P<0.05）,Tb.Sp高于对照组（P<0.05）;实验组 Tb.N、Tb.Tn、BV/TV 高于激素组（P<0.05）,Tb.Sp 低于对照组（P<0.05）。③组织病理特征观察,激素组骨细胞凋亡和空骨陷窝数增加,骨小梁间可见脂肪细胞堆积,部分呈囊状融合;淫羊藿苷组骨小梁形态较激素组规则完整,骨细胞坏死数量少,脂肪细胞肥大不明显。对照组动物标本无ONFH发生,激素组标本ONFH发生率为81.3%（13/16）,实验组为66.7%（12/18）,差异无统计学意义（P=0.448）;激素组空骨陷窝率（33.1%±1.4%）高于淫羊藿苷组（18.9%±0.8%,P<0.05）,两者均高于对照组（12.7%±1.5%,P<0.05）。④同步辐射相位衬度成像观察显示,激素组骨小梁变薄、断裂,结构破坏严重,淫羊藿苷组骨小梁体积厚度正常,结构相对完整。结论:在激素诱导的早期股骨头坏死兔子模型中,淫羊藿苷能够缓解激素对骨组织结构的破坏作用,改善骨组织形态,稳定骨显微结构,促进损伤骨组织自我修复,同时减少骨细胞坏死、凋亡,降低空骨陷窝率,延缓病情进展。第二部分:淫羊藿苷和糖皮质激素对大鼠骨髓来源的巨噬细胞mRNA表达的影响目的:巨噬细胞在激素性股骨头坏死发生和进展过程中发挥重要的调控作用。激素诱导骨细胞和骨髓组织损伤后吸引大量巨噬细胞迁移至坏死区,后者分泌大量促炎因子,进一步扩大炎性反应,组织破坏加重,导致骨坏死病情进展。淫羊藿苷能够通过转换巨噬细胞的功能状态控制炎症反应,抑制骨吸收,延缓病情进展,但具体发生机制仍不清楚。该实验旨在研究淫羊藿苷和糖皮质激素对大鼠骨髓源性巨噬细胞（bone marrow-derived macrophages,BMMs）mRNA 表达的影响,并利用生物信息学方法分析差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）对巨噬细胞功能的影响。方法:体外分离提取大鼠骨髓源性巨噬细胞,使用巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）进行诱导分化7天,通过形态学观察和细胞免疫组化进行鉴定。将细胞随机分为对照组（n=3）、激素组（n=3）和淫羊藿苷组（n=3）,后两组分别经地塞米松（dexamethasone,DEXA）和地塞米松+淫羊藿苷（Icariin,ICA）干预24h,CCK-8法检测各组细胞活性。使用高通量测序分析三组细胞mRNA表达谱,采用基因表达差异显着性分析方法筛选DEGs,对DEGs进行基因功能GO（gene ontology,GO）与信号通路富集 KEGG（kyoto encycopedia of genes and genomes,KEGG）分析。使用STRING数据库构建DEGs蛋白质-蛋白质互作网络（PPI）,鉴别关键基因（hub gene）,筛选PPI网络基因模块,建立miRNA-Gene调控网络。结果:激素组和淫羊藿苷组大鼠BMMs活性均低于对照组,而淫羊藿苷组细胞活性高于激素组。经高通量测序,激素组和对照组大鼠BMMs样本共筛选出了 641个DEGs,其中DEGs上调358个,下调283个。GO和KEGG功能富集分析表明这些DEGs主要参与应激、脂质代谢、蛋白质分解等生物学过程,并涉及与细胞间紧密连接、氮素代谢相关的信号通路;基于PPI网络数据筛选出了 6个关键基因,分别是 Rp126-psl、Ghrl、LOC500594、LOC688462、LOC683961、Gng4;miRNA-Gene 调控网络显示 mo-miR-125b-5p、mo-miR-9a-5p 和 mo-miR-9a-5p 与DEGs具有交互作用。激素组和淫羊藿苷组大鼠BMMs样本共筛选出了 629个DEGs,其中DEGs上调300个,下调329个。GO和KEGG功能富集分析表明这些DEGs主要参与细胞黏附、离子跨膜转运、细胞膜筏极化等生物学过程,并涉及钙离子信号通路、神经活性配体-受体相互作用通路相关的信号通路;基于PPI网络数据筛选出了 7个关键基因,分别是LOC688462、LOC683961、Rp126-psl、LOC500594、Rp128、Gng4、Ghrl;miRNA-Gene 调控网络显示mo-miR-125b-5p、mo-miR-9a-5p、mo-miR-128-3p、mo-miR-290 和 mo-miR-382与DEGs具有交互作用。结论:激素对大鼠BMMs活性具有抑制作用,而淫羊藿苷能够缓解激素对细胞活性的抑制作用。经激素和淫羊藿苷干预后,大鼠BMMs的基因表达发生显着变化,差异表达的基因在巨噬细胞多个生物学过程和和信号通路中具有潜在作用,有助于理解巨噬细胞在不同环境下功能变化的分子机制及其在激素诱导股骨头坏死发生发展中的作用。
王俊骁[8]（2021）在《基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨骨痹通消方调控细胞自噬与激素性股骨头坏死发病机制的研究》文中研究指明目的通过向SPF小鼠注射脂多糖及强的松龙制成激素性股骨头缺血性坏死动物模型,观察激素引起自噬对骨坏死的影响及应用骨痹通消方后对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响,探讨自噬与激素性股骨头坏死病因之间的关系。方法造模:1.本研究选择90只20-23g雄性SPF级昆明小鼠,随机分为两组,模型组78只,剩余12只为对照组。模型组给与脂多糖LPS进行腹腔注射,并按照体重换算1kg注射1mg,观察第二周为间隔周,在第三周再行注射的同时在小鼠臀部进行PND（泼尼松龙注射液）同时注射,用量为100mg/kg,随后的每3天注射一次,直至8周造模完成。对照组注射同等剂量的生理盐水。待造模结束后随机选取造模组的2只小鼠进行MRI（核磁共振）检测,观察小鼠股骨头坏死病变情况,并选取两组的24只小鼠血液经ELISA法检测BALP、PINP水平来观察激素性股骨头坏死小鼠模型是否造模成功。2.将成功建立的60只激素性股骨头坏死模型的小鼠随机分为治疗组、阳性对照组、模型组,每组20只及12只小鼠的对照组。治疗组小鼠以骨痹通消方灌胃,阳性对照组以通络生骨胶囊灌胃,模型组及对照组予以生理盐水进行灌胃,共治疗8周。分别将每组实验动物造模后取材。光镜下计算各组空骨陷窝率,细胞免疫荧光法及Western blotting法检测微管相关蛋白LC3-Ⅱ表达,实时荧光定量qRT-PCR和Western blotting法检测Akt、mTOR及自噬相关蛋白Beclin1的表达。结果及讨论:结果1.模型组小鼠磁共振显示左侧髋部高信号影,经ELISA法测量两组BALP、PINP含量,模型组均较正常减少,且具有统计学意义。2.细胞免疫荧光标记与空白对照组及模型组相比,治疗组、阳性对照组微管相关蛋白LC3-Ⅱ的表达均增加。3.实时荧光定量RT-PCR检测空白对照组Beclin1 mRNA表达稳定,4次标本检查基本没有大的波动变化,其余组都以此组数值为基数。第2周激素性股骨头坏死动物标本自噬相关蛋白Beclin1 mRNA升高至对照组的16.01倍（P<0.01）,第4周是对照组的8倍,第6周是对照组的3倍,第8周为0.46倍。模型组与阳性对照组均比模型组明显升高,第4周是对照组的6倍,第6周下降至0.28倍,第8周0.48倍;与空白对照组相比,治疗组的Akt mRNA表达明显下降;与空白对照组相比,治疗组的mTOR mRNA表达明显下降。激素使用后,迅速激活Beclin1开始诱导细胞自噬,但是随着病情进展,Beclin1 mRNA表达逐渐缓和。因为激素影响Beclin1 mRNA也高于对照组,但是由于骨痹通消方对自噬的抑制,影响Beclin1 mRNA基因表达,明显低于治疗组。4.Western blotting检测与空白对照组相比,治疗组微管相关蛋白LC3-Ⅱ表达明显升高（P<0.01）,p-Akt组及p-mTOR蛋白表达显着减少（P<0.01）。讨论1.股骨头缺血性坏死在年轻人群众普遍发生,非常容易使人致残,超过70%的人会继发为骨性关节炎。而激素的使用是引起股骨头缺血性坏死的一大主要因素。之所以临床上针对股骨头坏死的治疗方案层出不穷且没有一个很好的明确阻止疾病发生及发展的治疗方案,就是因为该病的致病原因没有明确的解释。本文即是通过相关实验,明确细胞自噬与骨坏死之间的关系,明确激素性股骨头坏死疾病发生过程中细胞自噬扮演的角色。Jia等研究表明,激素性股骨头缺血性坏死发病机制与骨细胞凋亡、自噬有关联密切。2.此次实验,在观察相关指标时发现,注射激素的治疗组微管相关蛋白LC3-Ⅱ、Beclin1 mRNA及Beclin1蛋白表达迅速上升,且第2、4周上升迅速,第6、8周上升速度有所减缓,说明激素能很快诱导细胞自噬发生。Akt mRNA、mTOR mRNA表达下降,激素能抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路反向调节引起细胞自噬。骨痹通消方介入后,能明显影响微管相关蛋白LC3-Ⅱ、自噬相关蛋白Beclin1及Akt mRNA、mTOR mRNA的表达,抑制细胞自噬。
赵杰[9]（2020）在《早中期非创伤性股骨头坏死的发病因素分析及临床用药观察》文中认为目的:回顾性收集相关临床资料,分析早中期非创伤性股骨头坏死（Non-traumatic osteonecrosis of femoral head,NONFH）的发病危险因素;以早中期NONFH患者作为研究对象,观察骨宝胶囊联合阿托伐他汀钙片及阿仑膦酸钠的临床疗效,评价该治疗方式对患者VAS疼痛评分、Harris评分、影像学评价、相关实验室指标及毒副反应等方面的作用。方法:1.发病因素回归分析:回顾性选择2018年3月至2019年3月于山东中医药大学附属医院骨科门诊及住院治疗且符合纳入标准的NONFH患者264例;收集2018年3月至2019年3月于山东中医药大学附属医院进行体检的健康者240例。本研究拟设置两组:NONFH患者为坏死组;无NONFH者为对照组,两组均采用自行设计的表格,由经统一培训专人收集并整理坏死组和对照组成员的一般基线资料及研究所需的影像学资料、实验室资料,进行统计学分析。2.药物临床观察:选择2018年3月至2019年8月于山东中医药大学附属医院骨科门诊及住院治疗且符合纳入标准的早中期NONFH患者70例,随机分为观察组（骨宝胶囊联合阿托伐他汀钙片及阿仑膦酸钠）与对照组（阿托伐他汀钙片联合阿仑膦酸钠）,每组各含患者35例,收集患者的一般基线资料,分别检测治疗前后VAS疼痛评分、Harris评分、影像学评价、血脂水平、凝血功能水平、碱性磷酸酶（ALP）水平等相关实验室指标,进行数据分析。结果:1.发病因素回归分析结果显示:坏死组与对照组在性别、饮酒史、激素使用史、血清甘油三酯（TG）、胆固醇（CHOL）、低密度脂蛋白（LDL）、D-二聚体水平、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）的差异有统计学意义（P<0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示性别为男性（OR=2.382,P=0.010<0.05）、有饮酒史（OR=3.601,P=0.008<0.05）、有激素使用史（OR=7.474,P=0.002<0.05）、TG升高（OR=1.414,P=0.008<0.05）、CHOL升高（OR=2.379,P=0.009<0.05）、LDL升高（OR=1.632,P=0.027<0.05）、D-二聚体水平升高（OR=1.919,P=0.006<0.05）、凝血酶原时间（PT）（OR=2.617,P=0.002<0.05）降低、活化部分凝血酶时间（APTT）（OR=1.316,P=0.002<0.05）降低是发生NONFH的独立危险因素。2.药物临床观察结果显示:经2个疗程（180天）治疗后,12名患者剔除本研究（观察组5例,对照组7例）;两组患者（观察组30人,对照组28人）一般临床基线资料均具有可比性（P>0.05）;两组经治疗后,观察组在改善患者VAS疼痛评分、Harris评分、影像学评价、凝血功能、血脂水平、ALP水平方面均优于对照组（P<0.05）。观察组与对照组均未出现严重不良反应。结论:1.性别为男性、有饮酒史、有激素使用史为NONFH发病的独立危险因素;血清甘油三酯（TG）、胆固醇（CHOL）、低密度脂蛋白（LDL）、血清D-二聚体水平升高为NONFH发病的独立危险因素;凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）降低为NONFH发病的独立危险因素。2.骨宝胶囊联合阿托伐他汀钙片及阿仑膦酸钠可有效缓解NONFH患者症状,改善患肢功能,促进成骨,降低相关实验室指征,有利于疾病预后。
骆帝[10]（2020）在《补肾活血胶囊通过Hedgehog信号通路调控成骨、成血管防治激素性股骨头坏死的机制研究》文中认为目的:利用Western blotting方法检测不同病因造成ONFH患者的股骨头样本大致病理形态与其中成骨与成血管相关蛋白的表达情况,为后续SONFH相关基础实验与临床治疗提供一定的理论基础与参照;再通过观察补肾活血胶囊对GC相关的ONFH SD大鼠骨组织重建及血管新生的影响和对GC处理的BMSCs成骨-成血管分化的影响,进一步研究补肾活血胶囊对动物与细胞实验中的成骨、成血管及Hedgehog信号通路相关因子的影响机制。方法:1.收集本院在2017年12月至2019年12月期间接受THA手术后的ONFH与股骨颈骨折患者的股骨头样本,挑选符合标准的股骨头按病因分别归入对照组、特发组、酒精组、激素组以及创伤术后组,采用Western blotting检测不同病因坏死骨组织的成骨与成血管相关指标的蛋白表达情况。2.通过使用对SD大鼠臀肌注射MPS的方法建立GC相关的ONFH大鼠模型,随后给予不同剂量的补肾活血胶囊加以干预,8周后通过组织病理学观察、荧光定量PCR检测与Western blotting分析在不同层面综合评价补肾活血胶囊对GC相关的ONFH大鼠骨组织重建及血管新生的影响。3.运用贴壁法提纯与扩增SD大鼠的BMSCs,并使用不同剂量的补肾活血胶囊含药血清与Dex进行干预培养,观察BMSCs的生长状况、增殖能力以及分化潜能,并采用细胞划痕实验、q PCR检测与Western blotting分析细胞中成骨、成血管与Hedgehog信号通路相关因子的蛋白表达变化;同时,建立SD大鼠RAOECs与BMSCs共培养体系,并对共培养后的RAOECs进行血管生成实验和Transwell迁移实验,观察其在补肾活血胶囊含药血清与Dex干预培养下的成血管能力与细胞活性的变化。结果:1.通过观察各组股骨头样本的大致形态与冠状面,发现不同病因ONFH患者股骨头样本在大致形态与剖面具有较为相似的病理表现,同时有相似的坏死和修复的组织学特征;Western blotting结果:在成骨方面,ALP蛋白的表达除创伤术后组显着低于对照组外,其余各组间均无显着差异（P>0.05）;Collgen I蛋白只有特发组与对照组没有统计学差异（P>0.05）,其余各组表达量均显着低于对照组（P<0.05）;与对照组相比,激素组、创伤术后组的OPN蛋白表达量均显着降低（P<0.05）,而特发组、酒精组则无显着差异（P>0.05）;对照组中RUNX2的蛋白表达量分别显着高于其余各组（P<0.05）;在成血管方面,不同病因造成的ONFH股骨头样本中CD31、VEGFA与KDR血管生成相关标记物蛋白的表达较对照组均存在显着下降的情况（P<0.05）;而VWF的蛋白表达量在各组间均未有显着差异（P>0.05）;在Hedgehog信号通路方面,Shh的蛋白表达量在不同病因的ONFH患者股骨头样本内不存在显着差异（P>0.05）;与对照组相比,酒精组与创伤术后组样本中信号通路下游细胞内信号因子Gli1的蛋白表达量出现了显着下降（P<0.05）,而特发组、激素组则未见显着差异（P>0.05）;各组中细胞内信号因子Gli2的蛋白表达量较对照组均出现了显着减少（P<0.05）。2.SD大鼠干预8周后,各组大鼠股骨头样本大体观无明显差异;软件分析HE染色结果显示:CG组骨小梁面积比率显着高与MG组（P<0.05）,LDG、MDG、HDG三组数据则均显着高于MG组（P<0.05）;而大鼠空骨陷窝率情况与骨小梁面积比率趋势一致,同为CG组显着高于MG（P<0.05）且LDG、MDG、HDG剂量三组均显着高于MG组（P<0.05）;软件分析免疫组织化学染色结果显示:与CG组相比,MG组大鼠股骨头成骨相关指标ALP、Collgen I、OPN与RUNX2不同程度的表达减少（P<0.05）;而灌胃不同剂量补肾活血胶囊的三个组则显着高于MG组（P<0.05）;MG组成血管相关指标CD31、VEGFA、KDR与VWF在股骨头中的表达强度相比较CG组均有明显下降（P<0.05）,而不同剂量补肾活血胶囊灌胃组与MG组相比均有显着升高（P<0.05）;q PCR检测结果显示:在成骨方面,CG组中ALP、Collgen I和RUNX2的m RNA表达均显着高于MG组（P<0.05）;LDG组中Collgen I与RUNX2的表达显着高于MG组（P<0.05）;MDG组中ALP与Collgen I的表达显着高于MG组（P<0.05）;而HDG组Collgen I的表达显着高于MG组（P<0.05）;在成血管方面,CG中CD31、VEGFA和KDR的m RNA表达均显着高于MG组（P<0.05）;LDG组中只有VEGFA的m RNA表达量明显多于MG组（P<0.05）;MDG组中CD31与VEGFA的m RNA表达量均显着多于MG组（P<0.05）;而HDG组VEGFA的m RNA表达量明显少于MG组（P<0.05）;在Hedgehog信号通路方面,CG组中Shh、Gli1和Gli2的m RNA表达量均明显多于MG组（P<0.05）;LDG组中则有Gli1和Gli2的表达显着高于MG组（P<0.05）;MDG组与HDG组中Shh、Gli1和Gli2的m RNA表达情况均显着高于MG组（P<0.05）;Western blotting结果分析显示:CG组样本中成骨相关ALP、Collgen I、OPN和RUNX2蛋白表达均显着高于MG组,而经过补肾活血胶囊LDG组中Collgen I、OPN和RUNX2三种蛋白表达情况均显着高于MG组表达（P<0.05）;MDG组中ALP、Collgen I和OPN三种蛋白表达均显着高于MG组（P<0.05）;HDG组显中ALP与Collgen I着高于MG组（P<0.05）;CG样本中成血管相关CD31、VEGFA、KDR和VWF四种蛋白表达均显着高于MG组,而LDG组中VEGFA、KDR两种蛋白表达情况均显着高于MG组表达（P<0.05）;而MDG组中VEGFA与KDR两种蛋白表达均显着高于MG组（P<0.05）,而CD31与VWF的表达则显着低于MG组（P<0.05）;HDG组显中KDR和VWF着高于MG组（P<0.05）;CG组样本中Hedgehog信号通路相关Shh、Gli1和Gli2蛋白三种蛋白表达均显着高于MG组,而经过补肾活血胶囊干预的LDG组中仅有Gli2蛋白表达情况显着高于MG组表达（P<0.05）;而MDG组中Shh和Gli2两种蛋白表达均显着高于MG组（P<0.05）;HDG组显中也仅有Gli2蛋白的表达着高于MG组（P<0.05）。3.本研究采用贴壁法可以提纯高纯度的原代SD大鼠BMSCs;原代BMSCs可顺利进行成骨、成脂与成软骨诱导分化;不同浓度的补肾活血胶囊含药血清不进对原代BMSCs具有促进增殖的作用,并且还可显着提高经Dex处理过的原代BMSCs的增殖活性;成骨诱导3周后,茜素红染色显示不同浓度补肾活血胶囊含药血清低、中、高剂量组与对照组染色结果相似,较模型组显着升高;BMSCs划线实验24h时,CG组与LDG、MDG、HDG三组的划线平均宽度均显着低于DG组（P<0.05）,且48h时趋势与24h时保持一致;将与SD大鼠BMSCs在不同浓度补肾活血胶囊含药血清与Dex进行共培养后的RAOECs进行血管生成实验,对CG与LDG、MDG、HDG三组的血管分支数量指标均显着高于MG组（P<0.05）;而在血管分支总长度指标上,CG组总长度数值显着高于DG组（P<0.05）,而MDG与HDG组的血管分支总长度显着高于DG组（P<0.05）;Transwell迁移实验结果表明:DG组迁移的细胞数量显着少于CG组（P<0.05）;MDG组迁移细胞数则显着多与DG组（P<0.05）;而LDG、HDG组迁移细胞数与模型组不存在显着差异（P>0.05）;q PCR结果显示:在Hedgehog信号通路方面,相比较于CG组,DG组中Shh、Gli1和Gli2的m RNA表达量均出现显着减少（P<0.05）;在含药血清方面,LG、HG组中Shh、Gli1和Gli2指标的m RNA表达量均显着多于CG组（P<0.05）,而MG组中的Shh和Gli2的m RNA表达情况较CG组均出现显着提高（P<0.05）;在干预方面,与DG组相比,MDG与HDG组中Shh、Gli1和Gli2各指标的m RNA表达量均出现显着升高（P<0.05）,而LDG组中的Shh和Gli2表达均显着高于DG组（P<0.05）;成骨方面,DG组相较于CG组ALP、Collgen I和RUNX2的m RNA表达量均有显着降低（P<0.05）;在含药血清方面,LG组中ALP、Collgen I和RUNX2的m RNA表达均显着高于CG组（P<0.05）,而MG与HG组中的ALP和RUNX2表达均显着高于CG组（P<0.05）;在干预方面,MDG组中ALP、Collgen I和RUNX2的m RNA表达均显着高于DG组（P<0.05）,LDG组中Collgen I和RUNX2的表达显着高于DG组（P<0.05）,而HDG组中ALP和Collgen I的表达则显着高于DG组（P<0.05）;成血管方面:CG组的CD31、VEGFA和KDR的m RNA表达均显着高于DG组（P<0.05）;LG、MG与HG组中CD31、VEGFA和KDR的m RNA表达均显着高于CG组（P<0.05）;在干预方面,MDG与HDG组中CD31、VEGFA和KDR的m RNA表达均显着高于DG组（P<0.05）,LDG组中VEGFA和KDR的m RNA表达量皆显着多于DG组（P<0.05）;Western blotting结果分析显示:在Hedgehog信号通路方面,DG组BMSCs的Shh、Gli1和Gli2三种蛋白的表达量相较于CG组均有明显降低（P<0.05）;LG组中的Shh、Gli1和Gli2各指标蛋白表达程度较CG组有显着增加（P<0.05）;MG、HG组中Gli1的蛋白表达量与CG组相比也有显着提升（P<0.05）;干预方面,LDG与MDG组相较于DG组的Shh、Gli1和Gli2三种蛋白表达量均有显着提高（P<0.05）;而HDG组则只有Gli2蛋白表达显着高于DG组P<0.05);在成骨方面,DG组BMSCs的ALP、Collgen I、OPN和RUNX2蛋白表达水平相较于CG组均有明显降低（P<0.05）;HG组中的ALP、Collgen I、OPN和RUNX2蛋白表达量均显着均高于CG组（P<0.05）;MG组中Collgen I、OPN和RUNX2的蛋白表达量显着高于CG组（P<0.05）;LG组中Collgen I和OPN的蛋白表达量显着高于CG组（P<0.05）;干预方面,MDG与HDG组相较于DG组的ALP、Collgen I、OPN和RUNX2蛋白表达水平方面均有显着提高（P<0.05）;而LDG组则在ALP、Collgen I和RUNX2的蛋白表达量上显着高于DG组（P<0.05）;在成血管方面,CG组BMSCs的CD31、VEGFA、KDR和VWF蛋白表达水平均显着高于DG组（P<0.05）;在CD31和VEGFA蛋白表达水平方面,LG、MG与HG三组表达情况与CG组相比提升明显（P<0.05）,但KDR和VWF的蛋白表达量则没有显着差异（P>0.05）;干预方面,LDG与MDG组相较于DG组在CD31、VEGFA、KDR和VWF的蛋白表达水平上均有显着提高（P<0.05）;而HDG组则在CD31、KDR和VWF的蛋白表达量上显着高于DG组（P<0.05）。结论:1.本研究通过对临床坏死的股骨头样本进行分析,初步了探究了不同病因导致的ONFH的初步机制。2.补肾活血胶囊可以通过Hedgehog信号通路对GC相关ONFH的SD大鼠骨重建与血管新生具有一定的促进作用。3.不同浓度的补肾活血胶囊含药血清可以通过Hedgehog信号通路可以调控并促进SD大鼠BMSCs向成骨与成血管方向的分化。
二、淫羊藿治疗股骨头坏死（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、淫羊藿治疗股骨头坏死（论文提纲范文）
（1）中药治疗股骨头坏死的作用机制研究进展（论文提纲范文）
| 1 单药治疗股骨头坏死及机制 |
| 2 中药复方治疗股骨头坏死及机制 |
| 2.1 经方 |
| 2.2 自拟方剂 |
| 3 小结 |
（2）淫羊藿苷调控成骨信号相关通路治疗激素性股骨头缺血性坏死的分子机制（论文提纲范文）
| 文章快速阅读： |
| 文题释义： |
| 0引言Introduction |
| 1 资料和方法Data and methods |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 入选标准 |
| 1.2.1 纳入标准 |
| 1.2.2 排除标准 |
| 1.3 质量评估 |
| 2 结果Results |
| 2.1 淫羊藿苷在骨代谢中的作用 |
| 2.1.1 淫羊藿苷促进成骨细胞形成 |
| 2.1.2 淫羊藿苷抑制骨吸收 |
| 2.2 淫羊藿苷抗SANFH的相关通路 |
| 2.2.1 淫羊藿苷调控Wnt/β-catenin信号通路促进成骨作用提高骨密度 |
| 2.2.2 淫羊藿苷激活PI3K/AKT信号通路调控血运及成骨分化影响股骨头缺血性坏死 |
| 2.2.3 淫羊藿苷通过mTOR信号通路对多条信号调控进而影响骨重建 |
| 2.2.4 淫羊藿苷作用雌激素受体介导激素信号表达影响激素性股骨头坏死 |
| 3 总结与展望Conclusions and prospects |
（3）“三补一活”方干预兔激素性股骨头坏死作用机制研究（论文提纲范文）
| 1 材料、仪器和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 给药手段 |
| 1.4 取材 |
| 1.4.1 空骨陷窝率 |
| 1.4.2 蛋白表达量Western blot检测 |
| 1.4.3 相关分子mRNA表达量的PCR检测 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 病理切片结果 |
| 2.2 空骨陷窝率观测结果 |
| 2.3 Western Blot实验结果 |
| 2.4 PCR实验结果 见表3。 |
| 3 讨论 |
（4）淫羊藿治疗糖皮质激素相关型股骨头坏死研究进展（论文提纲范文）
| 1 中医学对GA-ONFH的认识 |
| 1.1 中医学理论 |
| 1.2 中医药治疗股骨头坏死经验撷英 |
| 2 现代医学对GA-ONFH的研究 |
| 2.1 GA-ONFH的病因及发病机制 |
| 2.2 淫羊藿治疗GA-ONFH的药理学研究进展 |
| 2.2.1 淫羊藿总黄酮（total flavones of epimedium,TFE) |
| 2.2.2 ICA |
| 2.2.3 淫羊藿素（Icaritin,ICT) |
| 2.2.4 ICS |
| 2.2.6 淫羊藿多糖（epimedium polysaccharide,EPS) |
| 2.3 淫羊藿的应用研究 |
| 3 总结与展望 |
（5）基于miR-17-5p/MAPK/mTOR信号探讨淫羊藿苷促进成骨细胞自噬机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 实验研究 |
| 1.材料 |
| 1.1 实验细胞 |
| 1.2 实验主要药物与试剂 |
| 1.3 .实验主要仪器 |
| 1.4 引物(用Primer5软件/NCBI在线设计) |
| 2.实验方法 |
| 2.1 大鼠成骨细胞培养 |
| 2.2 茜素红染色鉴定成骨细胞: |
| 2.3 构建激素环境培养基 |
| 2.4 最大无毒浓度选择 |
| 2.5 实验分组 |
| 2.6 qRT-PCR检测成骨细胞miR-17-5p,MAPK1和MAPK3 mRNA的表达 |
| 2.7 Western Blot检测成骨细胞MAPK1、MAPK3、ULK1、ATG13、BCl2、P62和LC3B蛋白的表达水平 |
| 3.透射电镜观察细胞内自噬体变化情况 |
| 4.统计学方法 |
| 第二章 实验结果 |
| 1.茜素红染色鉴定成骨细胞结果 |
| 2.最大无毒浓度选择结果 |
| 3.各组成骨细胞miR-17-5p,MAPK1和MAPK3 mRNA的表达水平 |
| 4.各组成骨细胞信号通路下游蛋白ULK1、ATG13的表达水平 |
| 5.各组成骨细胞自噬标志性蛋白BCl2、P62和LC3B的表达水平 |
| 6.各组成骨细胞内自噬小体电镜结果 |
| 讨论 |
| 1.激素性股骨头坏死的定义及形成机制 |
| 2.淫羊藿苷治疗激素性股骨头坏死的机制研究 |
| 3.细胞自噬对成骨细胞保护的作用 |
| 4.miR-17-5p对成骨细胞的影响 |
| 5.MAPK/mTOR信号通路在细胞自噬中的作用机制及对其影响 |
| 6.LC3、BCL2、P62蛋白在自噬中的作用及意义 |
| 参考文献 |
| 第三章 综述 淫羊藿苷促进成骨细胞自噬对防治激素性股骨头坏死的研究 |
| 引言 |
| 1.自噬对成骨细胞的作用 |
| 2.淫羊藿对MAPK/mTOR信号通路的影响 |
| 3.MAPK/mTOR信号通路参与细胞自噬 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（6）淫羊藿苷经miR-23b干预激素性股骨头坏死机制的体内研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述一 MicroRNA在激素性股骨头坏死中的最新研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 miRNA在SONFH的研究进展 |
| 3 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 MicroRNA-23b的研究进展 |
| 1 概述 |
| 2 miR-23b在不同疾病中的调节作用和功能 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 文献综述三 淫羊藿苷对骨代谢的影响 |
| 1 概述 |
| 2 淫羊藿苷对骨代谢的具体影响 |
| 3 小结 |
| 参考文献 |
| 实验部分一 淫羊藿苷经miR-23b干预激素性股骨头坏死动物模型研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验仪器和实验材料 |
| 2 实验动物和分组 |
| 3 实验方法 |
| 4 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 一般情况 |
| 2 股骨头标本Micro-CT分析 |
| 3 股骨头标本苏木精-伊红染色分析 |
| 4 股骨头标本免疫组化分析 |
| 5 样本总RNA提取和实时荧光定量检测分析 |
| 6 外周血T淋巴细胞亚群流式检测实验 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 实验部分二 淫羊藿苷经miR-23b干预激素性股骨头坏死的作用机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 1 实验仪器和实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学分析 |
| 结果 |
| 1 BMECs细胞形态学观察与鉴定 |
| 2 BMECs细胞活力检测 |
| 3 Western blot |
| 4 双荧光素酶报告基因检测 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 博士期间发表论文 |
（7）淫羊藿苷在激素诱导的股骨头坏死中骨修复与炎症反应研究（论文提纲范文）
| 中英文缩写对照表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 淫羊藿苷对早期激素性股骨头坏死兔骨组织形态和显微结构的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 淫羊藿苷和糖皮质激素对大鼠骨髓来源的巨噬细胞mRNA表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 激素诱导股骨头坏死过程中骨代谢失衡与炎症反应研究 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（8）基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨骨痹通消方调控细胞自噬与激素性股骨头坏死发病机制的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词中英文对照表 |
| 前言 |
| 第一部分 基础理论研究 |
| 1.现代医学对SANFH的研究 |
| 1.1 病因病机 |
| 1.2 SANFH的病理改变及分期、各期特点 |
| 2.股骨头坏死临床治疗 |
| 2.1 非手术治疗 |
| 2.2 手术治疗 |
| 3.传统医学对股骨头坏死的认识 |
| 3.1 股骨头坏死的病因病机 |
| 3.2 股骨头坏死的辨证论治 |
| 第二部分 早期激素性股骨头坏死小鼠模型构建 |
| 1 实验材料和方法 |
| 1.1 设计 |
| 1.2 时间和地点 |
| 1.3 材料 |
| 2 实验仪器及耗材 |
| 2.1 造模药物及试剂 |
| 2.2 治疗药物 |
| 2.3 实验试剂 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 造模 |
| 3.2 RT-qPCR |
| 4 实验结果 |
| 第三部分 PI3K/Akt/mTOR信号通路与自噬的关系研究 |
| 第四部分 骨痹通消方治疗激素性股骨头缺血性坏死的理论研究 |
| 第五部分 实验结论 |
| 1.总结 |
| 2.创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 激素性股骨头缺血性坏死模型的建立及股骨头坏死模型建立的相关方法 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）早中期非创伤性股骨头坏死的发病因素分析及临床用药观察（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 第一部分 早中期NONFH发病因素回归分析 |
| 一、研究目的 |
| 二、临床资料 |
| (一)研究对象 |
| (二)诊断标准 |
| (三)纳入标准 |
| (四)排除标准 |
| 三、研究方法 |
| (一)研究分组 |
| (二)数据收集 |
| 四、统计学分析 |
| 五、研究结果 |
| (一)一般基线资料对比 |
| (二)实验室检查指标对比 |
| (三)早中期NONFH发病的多因素分析 |
| 第二部分 骨宝胶囊治疗早中期NONFH临床观察 |
| 一、研究目的 |
| 二、临床资料 |
| (一)研究对象 |
| (二)诊断标准 |
| (三)纳入标准 |
| (四)排除标准 |
| (五)病例脱落和剔除标准 |
| 三、研究方法 |
| (一)分组及用药 |
| (二)疗效评价指标 |
| 四、统计学分析 |
| 五、研究结果 |
| (一)两组患者完成研究情况 |
| (二)一般基线资料对比 |
| (三)疗效评价指标 |
| (四)安全性评价 |
| 讨论 |
| 一、中医对NONFH的认识 |
| 二、现代医学对于NONFH的认识 |
| (一)酒精与NONFH的关系 |
| (二)激素与NONFH的关系 |
| (三)脂质代谢与NONFH的关系 |
| (四)碱性磷酸酶(ALP)与NONFH的关系 |
| (五)炎症与NONFH的关系 |
| (六)凝血功能与NONFH的关系 |
| 三、方药分析 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 早中期股骨头坏死治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 发表论文 |
（10）补肾活血胶囊通过Hedgehog信号通路调控成骨、成血管防治激素性股骨头坏死的机制研究（论文提纲范文）
| 提要 |
| Abstract |
| 缩写词表 |
| 引言 |
| 第一章 不同病因的ONFH患者股骨头样本相关指标蛋白表达情况的检测与比较 |
| 1 研究目的 |
| 2 临床资料 |
| 2.1 病例收集 |
| 2.2 诊断标准 |
| 2.3 纳入标准 |
| 2.4 排除标准 |
| 2.5 病因判断标准 |
| 2.5.1 激素性股骨头坏死 |
| 2.5.2 酒精性股骨头坏死 |
| 2.5.3 特发性股骨头坏死 |
| 3 实验材料 |
| 3.1 实验样本 |
| 3.2 主要仪器 |
| 3.3 主要器械 |
| 3.4 主要试剂 |
| 4 实验方法 |
| 4.1 手术方式 |
| 4.2 股骨头样本的收集 |
| 4.3 股骨头样本的分组 |
| 4.4 Western blotting分析 |
| 4.5 统计学分析 |
| 5 实验结果 |
| 5.1 一般情况 |
| 5.1.1 患者一般情况 |
| 5.1.2 各组代表患者一般情况 |
| 5.2 各组股骨头样本一般情况 |
| 5.3 Western blotting分析 |
| 6 讨论 |
| 6.1 造成股骨头坏死的病因 |
| 6.2 股骨头坏死治疗方案 |
| 6.2.1 非手术治疗 |
| 6.2.2 手术治疗 |
| 6.3 不同病因ONFH发病机制的异同 |
| 7 结论 |
| 第二章 补肾活血胶囊基于Hedgehog信号通路对GC相关ONFH大鼠骨破坏的修复与血管再生的研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要仪器 |
| 2.3 主要器械 |
| 2.4 主要药物/试剂 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 补肾活血胶囊灌胃剂的制备 |
| 3.1.1 补肾活血胶囊组成与制备条件 |
| 3.1.2 补肾活血胶囊质量控制 |
| 3.1.3 补肾活血胶囊灌胃药液制备 |
| 3.2 动物分组方法与干预措施 |
| 3.3 病理学检测 |
| 3.3.1 股骨头组织的获取 |
| 3.3.2 HE染色 |
| 3.3.3 免疫组织化学分析 |
| 3.4 荧光定量PCR检测 |
| 3.5 Western blotting分析 |
| 3.6 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 一般情况 |
| 4.2 补肾活血胶囊可有效促进GC相关ONFH大鼠骨破坏的修复 |
| 4.2.1 股骨头样本大体观 |
| 4.2.2 HE染色分析 |
| 4.2.3 免疫组化学分析 |
| 4.2.4 荧光定量PCR检测 |
| 4.2.5 Western blotting分析 |
| 4.3 补肾活血胶囊可有效促进GC相关ONFH大鼠血管的再生 |
| 4.3.1 免疫组化学分析 |
| 4.3.2 荧光定量PCR检测 |
| 4.3.3 Western blotting分析 |
| 4.4 补肾活血胶囊可显着活化GC相关ONFH大鼠的Hedgehog信号通路 |
| 4.4.1 荧光定量PCR检测 |
| 4.4.2 Western blotting分析 |
| 5 讨论 |
| 5.1 激素性股骨头坏死动物模型的建立 |
| 5.1.1 模型动物的选择 |
| 5.1.2 模型的建立方法 |
| 5.1.3 动物模型的评价 |
| 5.2 中医对股骨头坏死的认识 |
| 5.3 补肾活血胶囊防治股骨头坏死的中医药基础与现代药理学探究 |
| 5.4 补肾活血胶囊对GC相关ONFH大鼠股骨头内骨破坏与血管损伤修复的促进作用 |
| 5.5 补肾活血胶囊对GC相关ONFH大鼠股骨头内Hedgehog信号通路的影响 |
| 6 小结 |
| 第三章 补肾活血胶囊含药血清通过Hedgehog信号通路调控BMSCs成骨成血管研究 |
| 1 研究目的 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 主要仪器 |
| 2.3 主要器械 |
| 2.4 主要药物/试剂 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 补肾活血胶囊含药血清的制备 |
| 3.1.1 制备补肾活血胶囊含药血清的材料 |
| 3.1.2 不同组别SD大鼠含药血清灌胃方法 |
| 3.1.3 SD大鼠补肾活血胶囊含药血清的获取 |
| 3.2 试剂的配制 |
| 3.2.1 细胞胎牛血清培养液 |
| 3.2.2 地塞米松磷酸钠配制液 |
| 3.2.3 细胞处理培养液 |
| 3.2.4 成骨诱导分化培养基 |
| 3.2.5 成脂诱导分化培养基 |
| 3.2.6 成软骨诱导分化培养基 |
| 3.3 原代BMSCs的提取与培养 |
| 3.4 原代BMSCs的鉴定 |
| 3.5 不同组别的培养与药物干预 |
| 3.6 细胞计数 |
| 3.7 BMSCs增殖检测 |
| 3.8 BMSCs成骨诱导后茜素红染色 |
| 3.9 BMSCs成脂诱导后油红O染色 |
| 3.10 BMSCs成软骨诱导行阿利辛染色 |
| 3.11 BMSCs划痕实验 |
| 3.12 RAOECs血管生成实验 |
| 3.13 RAOECs Transwell迁移实验 |
| 3.14 荧光定量PCR检测 |
| 3.15 Western blotting分析 |
| 3.16 统计学分析 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 含药血清基本情况 |
| 4.2 SD大鼠BMSCs鉴定 |
| 4.2.1 原代细胞形态学观察情况 |
| 4.2.2 流式细胞术鉴定 |
| 4.2.3 三系诱导分化 |
| 4.3 BMSCs增殖检测 |
| 4.4 补肾活血胶囊含药血清对诱导BMSCs成骨分化的影响 |
| 4.5 BMSCs划痕实验 |
| 4.6 RAOECs血管生成实验 |
| 4.7 RAOECs Transwell迁移实验 |
| 4.8 荧光定量PCR检测 |
| 4.9 Western blotting分析 |
| 5 讨论 |
| 5.1 含药血清的制备 |
| 5.1.1 中药含药血清研究方法发展的基本情况 |
| 5.1.2 制作含药血清实验动物的选择 |
| 5.1.3 给药剂量与方案 |
| 5.1.4 血清的采集、灭活与保存 |
| 5.2 SD大鼠原代BMSCs的提取、培养与鉴定 |
| 5.3 补肾活血胶囊含药血清对BMSCs生长增殖与成骨-成血管方面的干预作用 |
| 5.4 补肾活血胶囊含药血清对BMSCs中 Hedgehog信号通路的影响 |
| 6 小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 综述 干细胞疗法在股骨头坏死治疗中的应用进展 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
| 科技查新 |
| 博士期间参与科研课题情况 |
四、淫羊藿治疗股骨头坏死（论文参考文献）
- [1]中药治疗股骨头坏死的作用机制研究进展[J]. 齐琳,任忠陆. 中国药物经济学, 2022(01)
- [2]淫羊藿苷调控成骨信号相关通路治疗激素性股骨头缺血性坏死的分子机制[J]. 李嘉骏,夏天,刘佳敏,陈锋,陈豪特,卓映宏,吴炜锋. 中国组织工程研究, 2022(05)
- [3]“三补一活”方干预兔激素性股骨头坏死作用机制研究[J]. 杜晨阳,李慧英,汪利合,孟东方,马博. 时珍国医国药, 2021(10)
- [4]淫羊藿治疗糖皮质激素相关型股骨头坏死研究进展[J]. 陈浩,杜斌,刘锌,侯伟,高飞飞. 中国中西医结合杂志, 2021(11)
- [5]基于miR-17-5p/MAPK/mTOR信号探讨淫羊藿苷促进成骨细胞自噬机制研究[D]. 宋世雷. 广西中医药大学, 2021
- [6]淫羊藿苷经miR-23b干预激素性股骨头坏死机制的体内研究[D]. 刘洪智. 北京中医药大学, 2021(01)
- [7]淫羊藿苷在激素诱导的股骨头坏死中骨修复与炎症反应研究[D]. 时利军. 北京协和医学院, 2021(02)
- [8]基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨骨痹通消方调控细胞自噬与激素性股骨头坏死发病机制的研究[D]. 王俊骁. 安徽中医药大学, 2021(01)
- [9]早中期非创伤性股骨头坏死的发病因素分析及临床用药观察[D]. 赵杰. 山东中医药大学, 2020(01)
- [10]补肾活血胶囊通过Hedgehog信号通路调控成骨、成血管防治激素性股骨头坏死的机制研究[D]. 骆帝. 山东中医药大学, 2020(01)
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